IFA diagnostikasi: antikorlarni belgilashning mohiyati nimada, uni qanday o'tkazish kerak va u ba'zi kasalliklarda samaralimi? VIL-infektsiyani tashxislashning hozirgi usullari Anti VIL 1 2 sho.

Vlasniki patenti RU 2283497:

Vinahid biotexnologiya va tibbiyot galereyasiga keltiriladi. Antisuv Imuduale Counce-ga antiuus imoudef_cite lyuklari uchun o'tteptyfating spertue (Virusuiv imodef_cite lyuklari), antimus Imamudefite Imabuligite Imabuligiting IMUNI O). , p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), VIL 1 p24 antigeniga antikorlar va aniqlash reagentlari, bu holda VIL antigenlari va VIL antikorlari ferment bilan bog'langan tabletkalarning turli quduqlarida sorbsiyalangan. immunosorbent tahlili va vikorist sorbsiya uchun 96 quduqli polistirol plitalari mavjud. Vinahid sezgirlikni, kechirimlilikni, natijalarni baholashning sub'ektivligini kiritishni ta'minlaydi. 1 z.p. f-li, 10 tab., 1 il.

Vinahid biotexnologiya va tibbiyot galereyasiga keltiriladi. Vykoristannya: inson immunitet tanqisligi virusi 1 va 2, VIL 1 guruhi Pro va antigen p24 VIL 1 uchun oqsillarga xos antikorlarning barcha sinflarining namoyon bo'lishini farqlash.

Muhimligi: 1 va 2, VIL 1 guruhi Pro antikorlari spektrini aniqlash uchun fermentga bog'langan immunosorbent tahlilini sinovdan o'tkazish, p24 VIL 1 antijenini aniqlash va VIL 1 va 2, VIL 2 antikorlarini tekshirishning ijobiy yoki noaniq natijalarini tasdiqlash. guruh antijeni.

VINAHOD TAVSIFI

IVL-infektsiyasining laboratoriya diagnostikasi uchta direktivaga asoslanadi: a) VIL va uning tarkibiy qismlarini ko'rsatish; b) VILga antikorlarni aniqlash; v) immunitet tizimidagi sezilarli o'zgarishlar. Sered asosiy usullar laboratoriya diagnostikasi eng keng tarqalgan serologik - virusning antijenlerine antikorlarni aniqlash.

VIL-infektsiyada antikorlarni aniqlash uchun asosiy usullar ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili (IFA) va immunoblotting (IX). IFA kasallikning antikorlari bog'langan virusli antijenlarni plastinkalarda immobilizatsiya qilishga asoslangan va antigen-antikor kompleksi sichqonchaning monoklonal antikorlarini G va M immunoglobulinlariga peroksidaza bilan qo'shimcha konjugatsiya qilish uchun ishlatiladi. Usul o'ziga xos va sezgir bo'lib, bemorlarning 95% da virusga xos antikorlarni aniqlashga imkon beradi. Bundan tashqari, tushishning 5% infektsiyaning dastlabki bosqichiga to'g'ri keladi, agar qonda antikorlar kam bo'lsa yoki kasallikning terminal bosqichida, agar organizm antikorlarning keskin kamayishi orqali antikorlarni sintez qila olmasa. immunitet tizimi. Siz ham mumkin gibnopozitiv natijalar IFA, otoimmün kasalliklar va onkologik kasalliklar, shuningdek, Eshptein-Barr virusi keltirib chiqaradigan infektsiyalar bilan og'rigan bemorlarda muhimdir. Bunday holda, antikorlarning revmatoid omilga, Epstein-Barr virusiga yoki 1 va 2 gistozumlik sinfining bosh kompleksining oqsillariga o'xshash antigenik determinantlarga (HLA-4 va DQW3) va BIL antigenlari bilan bog'lanishiga o'zaro reaktsiyasi. Ko'pincha homilador ayollar va zaif yoshdagi odamlarda gibnopozitiv natijalar kuzatiladi. Noto'g'ri natijalarga gemoliz, lipemiya, sirowortlarning bakterial ifloslanishi ham sabab bo'lishi mumkin.

Cym bilan bog'liq holda, antikorlarni aniqlash natijalarining o'ziga xosligini tekshirish uchun bir qator usullar taklif qilingan va g'alaba qozongan. Ushbu usullardan uchtasi "Western Blot" modifikatsiyasida "immun blot" reaktsiyasini keltirib chiqarishi mumkin. Usulning mohiyati tajovuzkorlikda yotadi: birinchi bosqichda poliakrilamid jelda qo'shimcha elektroforez uchun molekulyar og'irlik uchun BILKIV VIL ostida ishlash kerak. Keyin poliakrilamid jeldan nitroselüloz membranasi yuzasiga elektroforetik o'tish sodir bo'ladi. Antigenlarning bu tarzda uzatilishi membrana tomonidan qo'shimcha bilvosita tahlil bilan aniqlanadi: membrana quyidagi material bilan inkubatsiya qilinadi; qochib ketadigan antikorlar nitroselüloz membranasiga o'tkazilgan VIL antijenlari bilan bog'lanadi va keyin konjugat bilan inkubatsiya qilinadi; antigen-antikor kompleksi o'rnatilganda, konjugat yangisiga qo'shiladi, konjugat kiritilgandan va substrat bilan inkubatsiya qilingandan so'ng, bu nitroselüloza hujayralarining mavjudligi chiqariladi va antigen-antikor-konjugat kompleksi eritiladi. Kresloda immunoblottingning ijobiy, zaif ijobiy va salbiy natijalariga misollar keltirildi.

VIL-1 va VIL-2 bilan kasallangan OIV-musbat osibda rivojlanayotgan oqsillar (p) va glikoproteinlarga (gp) antikorlar aniqlanadi: jadval A.

Jadvalda JSST tomonidan tavsiya etilgan immunoblotting natijalarini baholash mezonlari taqdimotida va Rossiya markazi SNIDomning oldini olish va unga qarshi kurashish.

VOZning Vihodyachi s mezonlari, ijobiy vvazhayut sirovatki, bu usulda IX qobiq VIL-1 ning ikkita oqsiliga qadar antikorlarni aniqlaydi. Faqat qobiq oqsillaridan biri (gp160, gp120, gp41) bilan reaksiyaning boshqa oqsillar bilan reaksiyasida yoki ularsiz sodir bo'lishi aniq bo'lganligi sababli, natija shubhali. SNIDning oldini olish va unga qarshi kurashish bo'yicha Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash vazirligining Federal ilmiy-metodik markazining ma'lumotlariga ko'ra, sirovatsni ijobiy deb talqin qilish va antikorlarning mavjudligi uchun faqat bitta qobiq oqsili mavjud.

P24 antijeniga antikorlarning mavjudligi davrda serokonversiyani ko'rsatishi mumkin, ammo oqsilning o'zi antikor bo'laklari birinchi bo'lib hisoblanadi. Env oqsillari bilan reaktsiyasiz gag va pol oqsillari bilan ijobiy reaktsiyalar erta serokonversiya bosqichini aks ettirishi mumkin, shuningdek, VIL-2 infektsiyasining mavjudligini yoki o'ziga xos bo'lmagan reaktsiyani ko'rsatishi mumkin.

VIL diagnostikasi immunoblottingga reaktsiyaning ekspert usuli sifatida bir qator kamchiliklarga ega:

1. VIL 1 p24 antigenini bir necha testda aniqlashning mumkin emasligi, ular bir soatlik antigen va VILgacha bo'lgan antikorlarni aniqlaydi, bu esa bir uchun skrining testlari sifatini pastki skrining (gluzdim bo'lmagan) uchun tekshirishi mumkin. -Rossiya Federatsiyasida VIL 37 ga qadar antigen va antikorlarni soatlik aniqlash ). 2001 yil: "Qon quyish stantsiyalarida obstezhen donorlar uchun bir kechada VIL ga antigen va antikorlarni aniqlaydigan test tizimlarini ishlab chiqish kerak").

2. IgG sinfidan tashqari antikorlarni aniqlash. 3 va 4-avlodlarning vikariy testlarida (IgG va IgM antikorlarini ko'rsatadigan) yo'q qilingan ijobiy natijalarni tasdiqlash mumkin emas.

3. Test natijalarini sharhlashning subyektivligi, ayniqsa, "shubhali" va "ahamiyatsiz" natijalar va kob bosqichlari serokonversiya (bu sharsharalarda nitroselüloz membranalarida paydo bo'ladigan silliq belgilar loyqa, muzni buzilmagan ko'z bilan ko'rish mumkin va turli odamlar tomonidan baholanganda ular ko'pincha chalkashlikdan qo'rqishadi).

4. Tahlil natijalarini avtomatlashtirilgan hisob-kitoblarni baholashning mumkin emasligi.

5. IFA sezgirligi tufayli eng past.

6. Qayta tiklashning etarli emasligi (aralashmani ushlab turishda nitroselüloz membranasi rivojlanadi va og'ir tushkunliklarda VILning namoyon bo'lishi yoki namoyon bo'lishining ob'ektiv tasdig'i bo'la olmaydi).

7. Reaksiyani shakllantirishdagi qiyinchiliklar va tejamkorlik (nitroselüloz membranasining kon'yunksiyalari moyil bo'lib, tez-tez buziladi).

8. IB to'plamlarining yuqori xilma-xilligi.

Vídomiy reagenti, bir soat davomida vyznachennja antigenív i antikorlar í bir xil patogenga, shu jumladan VIL (DE 4236189 F1, 28.04.1994). VIL-infektsiyani turli bosqichlarda tashxislash imkonini beruvchi test tizimi mavjud emas.

Ushbu vino zavodining menejeri test tizimini sotib olishi kerak, uning yordamida VIL 1 va 2, VIL 1 guruhlari Prota antijeni p24 VIL 1 gacha bo'lgan antikorlar uchun skrining testlarida ijobiy yoki kümülatif natijalarni tasdiqlash mumkin. bir martalik antijenler uchun antigen testlari.

Technichne Risnia-ning ÍMUNUPHERMENT test tizimiga erishish uchun Identifíkatsííín spektri Antitail to Viruus IMUNUDEFÍTsiturit ilyuni (vil) í í í ina toviva, i potipo potipo po po imudennaya peruvennaya novennaya R2414 virusi va R2414 boʻlgan virusga qarshi kurash. -2 guruh O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), VIL 1 p24 antigeniga antikorlar va reagentlar, haddan tashqari ta'sir qilishda VIL antigenlari va VILni aniqlash. antikorlar ferment immunoassay uchun plitalarning turli quduqlarida adsorbsiyalanadi.

Bundan tashqari, vikorist sorbsiya uchun ferment immunoassay uchun 96-quduqli polistirolli assortimentli yoki assortimentsiz plitalar qo'llaniladi.

TECHNIKIY RESULATE, SHO CIM VINARADE POLIGAYAê YOV MOGALOSTÍ PIDDERDENNY ANTITY TO POSITIVE NATIJALARINI QABUL QILING Víl 1 І 2, Víl 1 Grup Pro Antigen R24 Víl 1, Vococíítívíês Vílí, Vococíítííês Víní, Subíííêus Reviewyka' IB varosty ning muhim to'plamlari bilan kamroq bog'langan.

Tse tekhníchne ríshennya vídríznyaêtsya víd vídomih:

1. Vykoristannya immunologik reaktsiyalar uchun qattiq fazali planshet sifatida.

2. p 24 VIL gacha bo'lgan antikorlar va VIL antijenlari to'plami uchun sorbent sifatida bir soatlik sinovlar.

Vinahid qadam qo'ygan dumba bilan tasvirlangan.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR + AG r24 VIL 1" kengaytirilgan sinov tizimining kobi:

Immunosorbent - VIL-1 tarkibiy oqsillariga o'xshash rekombinant antijenler: gp41 (env VIL-1 va VIL 1 guruhi O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), VIL-2: gp36 (env) va VIL 1(p24) antijeniga monoklonal sichqoncha antikorlari, polistirol tarqatuvchi plastinka chiziqlaridagi sorbsiyani ajratish.

Immunosorbent vikoristni tayyorlash uchun:

1. OIV-1 gp41 E. Coli shtammi No AHIV 103 tomonidan ishlab chiqariladigan oqsildir.

2. OIV-1 gp120 - E. Coli shtammi No AHIV 109 tomonidan ishlab chiqariladigan oqsil.

3. OIV-1 p24 E. Coli shtammi No AHIV 105 tomonidan ishlab chiqariladigan oqsildir.

4. OIV-1 p31 - E. Coli shtammi No AHIV 108 tomonidan ishlab chiqariladigan oqsil.

5. OIV-2 p36 E. Coli shtammi No AHIV 106 tomonidan ishlab chiqariladigan oqsildir.

Konjugat 1, liyofillangan yoki kamdan-kam hollarda - biotin bilan konjugatsiyalangan p24 VIL1 antijeniga sichqoncha monoklonal antikorlari.

1. Konjugat 2, liyofillangan yoki kam uchraydigan, - VIL-1 tarkibiy oqsillariga o'xshash rekombinant antigenlar yig'indisi: gp41 (env VIL-1 va VIL 1 guruhi O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (po1) ; VIL-2: gp36 (env), biotin bilan konjugatsiyalangan;

2. Konjugatlar 3, 4 - liyofilizatsiyalangan yoki kamdan-kam hollarda - streptavidin, xron peroksidaza bilan etiketlanadi;

Oldingi tekshiruvlar jarayonida test tizimining dizayni ko'rib chiqildi, vv komponentlarini tayyorlash texnologiyasi o'zgartirildi va immunoenzimatik reaktsiya optimallashtirildi va amalga oshirildi.

"DS - IFA - ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+Ag p24 VIL 1" test tizimida IFA ni o'rnatishda p24 gacha sorbsiyalangan antikorlari bo'lgan plastinka quduqlariga 25 µl konjugat-1 qo'shing va quduqlarga. sorbsiyalangan antijenler bilan - 25 µl kon'yugat-2. Reaktsiya sxemasi quyida ko'rsatilgan. Oxirgi dozadan 25 µl hosil qilish uchun teriga teshik oching. Bu bilan antijenli quduqlarda rang to'q sariqdan qizil rangga, antikorlari bo'lgan quduqlarda esa yashildan suriyaga o'zgaradi. Sumish 45 daqiqa davomida 37°C da shakerda (yoki termostatda 37°C da 1 yil) inkubatsiya qilinadi. Keyin, in'ektsiyasiz, p24 antijeni uchun plastinkaning teshiklariga 50 µl kon'yugat-3 va maqsadli antigenning teshiklariga 50 µl kon'yugat-4 qo'shing. Shakerda 37°C da 20 daqiqa davomida (yoki termostatda 37°C da 30 minut) inkubatsiyadan so'ng plastinkani yuving va substrat aralashmasini oching. Reaksiyaning oxirgi soati 1 yil 25 minut (yoki 1 yil 50 minut). Maqsadli bemorda mavjud bo'lgan p24 antijeni p24 gacha monoklonal antikorlar bilan bog'lanadi va o'ziga xos antikorlar plastinkada rekombinant antijenler bilan kompleks hosil qiladi. Eritilgan p24 bilan anti-p24-p24 immun kompleksi anti-p24-biotin konjugatlarini, keyin streptavidin-peroksidazani va Ag-biotin konjugati bilan Ag-BIL-Ab-BIL immun komplekslarini, so'ngra streptavidin-peroksidazani namoyon qiladi.

Reaksiyani o'rnatish sxemasi.

Natijalarning shakli sochning ikki uzunligida spektrofotometrik tarzda amalga oshiriladi: 450/620-680 nm "takroriy" fittingni sozlash bilan. 450 nm uzunlikdagi bir tebranish davri uchun natijalarning ruxsat etilgan ko'rinishi.

Tahlil natijalari to'g'ri, chunki K-li quduqlarda optik bo'shliqning (OD) o'rtacha qiymati 0,2 dan ko'p bo'lmagan, K+ bo'lgan quduqlarda - 1,0 dan past emas. VP tanqidiy. formula uchun to'lov:

VP tanqidiy. gp41 = teng qiymat VP K-(gp41)+0,15

VP tanqidiy. gp120 = teng qiymat VP K-(gp120)+0,15

VP tanqidiy. p24 = teng. qiymat VP K-(R24) +0,15

VP tanqidiy. p31 = teng. qiymat VP K-(R31) +0,15

VP tanqidiy. gp36 = por_vn. qiymat VP K-(gp36)+0,15

VP tanqidiy. Ag p24 = povn. qiymat VP to-(Ag p24)+0,04

de 0,15 va 0,04 - koeffitsientlar, virobnik asosida statistik ishlov berish usuli bilan belgilanadi. Test tizimini ishlab chiqish jarayonida vikoristano qilish kerak edi:

1. Sog'lom donorlardan qon namunalari (n=610).

2. OIV bilan bog'liq bo'lmagan turli xil infektsiyalar (GRH, pnevmoniya, tonzillit, gerpetik va sitomegalovirus infektsiyalari, sifiliz, xlamidiya, virusli gepatit A, B va C (n=224)) bilan kasallangan qon siroplari.

3. Qon siropi bilan og'rigan bemorlar turli yuqumli bo'lmagan kasalliklar - travmalar, yurak-qon tomir tizimi kasalliklari, onkologiya (n=35).

4. Ayol ayollarning qon namunalari (n=40).

5. Qon testlari, IFAda seropozitiv va immunoblot tomonidan tasdiqlangan (n=428).

6. VIL 1,2 va antigen p24 antikorlarini bir soat davomida kiritish uchun ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlillarida olingan ijobiy natijaga ega bo'lgan ayol sirovoklari namunalari va immunoblotda sezilarli bo'lmagan natija (n=123).

7. VIL 1.2 ga antikorlarni yo'q qilmaydigan sirovatokning ichki paneli, Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash vazirligi tomonidan immunoenzimatik test tizimlari va immunoblot (n = 21) ni ro'yxatga olish bo'yicha norozilik bildirildi.

8. OIV 1 ANTIGEN STANDARTI, BIO RAD, Frantsiya, mushuk. No 72217, bu virus lizatidan olingan antigen.

9. Biznesning ichki standarti. Zrazok, scho 200 pg / ml p 24 antigen konsentratsiyasini almashtirish, virusli lizatni olib tashlash va standart "OIV 1 ANTIGEN STANDARD" kompaniyasi "BIO RAD" bo'yicha titrlash, Frantsiya, kat. № 72217.

10. Sirovatokning standart paneli, birinchi turdagi inson immunitet tanqisligi virusiga (VIL 1) antikorlarni sinash uchun scho - VZG 42-28-212-93-02P, "Medico-biological Union", Novosibirsk.

11. Sirovatokning standart paneli, boshqa turdagi (VIL 2) insonning immunitet tanqisligi virusiga antikorlarni tekshirish uchun scho - VZG-42-28-216-02P, "Tibbiyot va biologik ittifoq", Novosibirsk.

12. Sirovatokning standart paneli, birinchi turdagi va boshqa (VIL 1, 2) odamning immunitet tanqisligi virusiga qarshi antikorlardan o'ch olmaslik uchun - VZG-42-28-214-94-02P, "Mediko-biologik. Ittifoq", Novosibirsk.

P24 antijenini aniqlashda test tizimining sezgirligini baholash OIV I ANTIGEN STANDARDI, BIO RAD, ichki qabul qilish standartiga muvofiq amalga oshirildi. G'olib bo'lgan ichki standartda 40 pg / ml dan 5 pg / ml gacha oddiy donor plazmasi bilan VIL 1, 2 ga antikorlarni erituvchi sifatida kechiktirmaslik uchun 4 ta ketma-ket 2 marta suyultirish tayyorlandi. Ko'rinadigan antigenning eng kichik miqdori sezgirlik mezoni sifatida qabul qilindi. 1-jadvalda keltirilgan ma'lumotlarni olib tashlang.

Maxsus antikorlarni aniqlashda test tizimining sezgirligini baholash uchun biz insonning immunitet tanqisligi virusiga (VIL 1, 2) antikorlarni aniqlash uchun standart sinov panellaridan foydalandik (OSO 42-28-212-93-02P p.012, VZG 42-216 - 02P (VIL 2) p.003).

Optimal ma'lumotlar 3, 4-jadvallarda keltirilgan.

“DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1” test tizimining diagnostik samaradorligi “Jenscrin-VIL-Ag/Am” (Bio-Rad), “DIA-OIV” test tizimlari bilan solishtirildi. 1/2" (Diaprof-Med), "Vironostics VIL Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Rekombinant-VIL1.2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-VIL-1.2 K" (Amercard) , "VIL-1, VIL-2-IFA-Avitsenna" (Avitsenna). Barcha ko'rsatilgan testlarda ichki paneldagi sirovatokning qaysi sinoviga e'tiroz bildirildi. 5-jadvalda ko'rsatilgan natijalar "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" ning yuqori diagnostika samaradorligini ko'rsatadi.

“DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1” test tizimining sezgirligi bemorlarning qon zardobi bilan ham o‘rganilib, immunobloting yordamida VIL musbat deb tasdiqlandi. Zagal 428 ta shunday sirovatga norozilik bildirgan. VIL va p24 antijenining turli oqsillariga antikorlarni aniqlashning bir qator variantlari tahlil qilindi. Natijalar 6-jadvalda keltirilgan.

6-jadval VIL 1 musbat ayollarni tekshirishda VIL 1 va p24 antigenining turli oqsillariga antikorlarni aniqlash natijalari (n=428)
% namoyon bo'lishi	Protein profili
	anti-gr41	anti-gr120	anti-r24	anti-r31	p24
51,1%	+	+	+	+	-
35,3%	+	-	+	+	-
4%	+	-	+	-	-
3,3%	+	-	-	+	-
1,4%	+	-	-	+	+
1,2%	+	+	+	+	+
1,2%	+	+	-	+	+
0,9%	+	-	+	+	+
0,7%	+	-	+	-	+
0,5%	+	-	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	-
okremyh oqsillar yoki Ag p24 antikorları% aniqlash	100%	53,9%	93,2%	94,4%	6,1%

VIL 1 ni ijobiy sinovdan o'tkazishda ayollarning 3% gp36 (env VIL 2) ga ijobiy reaktsiya ko'rsatdi. MP/OPcrit 2.0 dan oshib ketmasdan tsikh zrazkahga ega bo'ling. Biz adabiyot ma'lumotlaridan oq tashqi qobiq VIL 1 (gp41) va VIL 2 (gp36) o'zaro faoliyat reaktivligi haqidagi ma'lumotlarni oldik.

Natijalarni talqin qilish

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + AGr24 VIL 1" da standart va ichki panellardan olingan ijobiy sirovoklar va namunalarning VIL sinovini tahlil qilish ushbu test natijalarini sharhlash mezonlarini kengaytirish imkonini beradi. Tavsiya etilgan mezonlar 7-jadvalda keltirilgan.

Ushbu mezonlarga asoslanib, IVL musbat sirowortlarning barcha holatlari (n=428) ijobiy "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL1" deb tasniflangan. Standart panelda VIL 1 ga antikorlarni uradigan 16 ta belgi bor edi, 14 tasi ijobiy, 2 tasi esa ahamiyatsiz deb belgilangan. VIL 2 ga antikorlar uchun qasos olgan standart paneldan 8 ta belgi ijobiy deb topildi. VIL 1 ga antikorlar uchun qasos olgan ichki paneldagi 10 nuqtadan 7 tasi ijobiy, 3 tasi esa ahamiyatli emas edi.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" test tizimining sezgirligi bemorlarning qon zardobida ham o'tkazildi, bu esa bir vaqtning o'zida antikorlarni aniqlaydigan ferment immunoassay test tizimlarida ijobiy natijaga olib kelishi mumkin. va p24 antijeni va immunoblotdagi ahamiyatsizligi. Zaxal 123 ta bunday norozilik namoyishiga norozilik bildirdi. Ma'lumotlar 8-jadvalda keltirilgan.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" da immunoblot (n=123) bo'yicha ahamiyatsiz natijaga ega bo'lgan sirovatlar sinovdan o'tkazilganda 72 ta namuna (58,5%) ijobiy natija ko'rsatdi. Ulardan 26 tasi (21,1%) ayolda p24, 20 tasi (16,3%), antikorlar 16 tasi (13%), p24 tasida bitta proteingacha bo'lgan antikorlar bilan 10 tasi (8,1%). ikki va undan ortiq proteingacha. Shunday qilib, faqat bitta antikorni tekshirish (p24 aniqlanmasdan) 30 ta ijobiy test (24,4%) ijobiy bo'lishiga imkon beradi. Sinovda p24 antijenining aniqlanishi musbat 42 ta qo'shimcha belgini (34,1%) ko'rsatishga imkon berdi.

Vikoristan bula test tizimining o'ziga xosligini baholash uchun serotiplarning standart paneli ishlatilgan, shuning uchun antikorlar VIL 1, 2 (n = 20) ga chiqarilmagan; sog'lom donorlardan qon siropi namunalari (n=610), VIL bilan bog'liq bo'lmagan turli yuqumli kasalliklarga chalingan bemorlardan qon siropi namunalari (n=224); turli yuqumli bo'lmagan kasalliklar - travma, yurak-qon tomir tizimi kasalliklari, onkologiya (n=35) bilan qon zardobidagi kasalliklar holatlari; ayol ayollarning qon namunalari (n = 40). Usyi 929 kishi norozilik bildirgan. Sog'lom donorlarning qon sirovatlaridan bir namunasi chibnopozitiv natijani ko'rsatdi - gp41 va p24 gacha bo'lgan antikorlar aniqlandi. Sog'lom donorlarning 7 ta qon siropi va VIL bilan bog'liq bo'lmagan yuqumli kasalliklarga chalingan bemorlarning 2 qon siropi p24 uchun ijobiy natija ko'rsatdi.

Test tizimining o'ziga xosligini baholash uchun salbiy testlarning standart paneli sinovdan o'tkazildi (OSO 42-28-214-94-02p, p.009). O'ziga xoslik 100% ga aylandi.

Shunday qilib, o'tkazilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" test tizimining o'ziga xosligi normal donorlar va kasalliklarning ilgari aniqlangan qon sirovatida 99% ga etadi. turli infektsiyalar va somatik kasalliklar bilan.

Olingan ma'lumotlar "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" kengaytirilgan test tizimining yuqori diagnostika samaradorligini ko'rsatadi. Sinov tizimi OIV oqsillarining 1 va 2-turi va p24 BIL1 antigenining oxirgi turigacha bo'lgan antikorlarni aniqlash uchun vikoristan bo'lishi mumkin, bu esa antikorlarni aniqlaydigan test tizimlari yoki antikorlarni va p24 antikorlarini aniqlaydigan test tizimlari bilan ijobiy skrining natijasini tasdiqlaydi. bir marta. Test tizimi ijobiy natijalarni tasdiqlash uchun immunoblotga muqobil test sifatida vikoristan bo'lishi mumkin, shuningdek, VIL va p24 antijeniga antikorlarning dinamikasini oshirish uchun. turli bosqichlar infektsiyalar.

PEREVAGI TEST

1. Tablet formatida ferment immunoassayni tasdiqlash

2. VIL 1, 2 antikorlar spektrini va p24 VIL 1 antijenini aniqlaydigan testni tasdiqlash.

3. Barcha Ig sinflarining antikorlarini aniqlash

4. p24 ni aniqlash uchun sezuvchanlik 5 pg/ml dan kam

5. Immunoblot bilan solishtirganda ahamiyatsiz natijalar sonining tezligiga ruxsat berish

6. Tahlil vaqti - 1 yil 25 min (imunoblot - 3 yoshdan 20 yoshgacha)

7. Barcha komponentlar va diqqatga sazovor joylarning kiritilishini vizual baholash.

1. Gp41 (env VIL-1 va VIL-2 guruhi O) bo'lgan birinchi va boshqa turdagi, birinchi turdagi guruh odamlari, odamning immunitet tanqisligi virusi (OIV) ga antikorlar spektrini aniqlash uchun immun ferment test tizimi, gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), VIL 1 antijeni p24 ga antikorlar va aniqlovchi reagentlar, haddan tashqari ta'sir qilishda VIL antigenlari va VIL antikorlari turli quduqlarda adsorbsiyalanadi. fermentga bog'langan immunosorbent tahlili uchun plitalar.

2. 1-bandga muvofiq ferment immunoassay test tizimi, u vikorist 96-quduqli polistirollarni turli xil yoki ferment immunoassay uchun turli plitalardagi sorbsiyalash uchun ko'rib chiqiladi.

Bugungi kunda SNID dunyosida dunyoning eng katta kengayishi retrovirus subgenus virusi bo'lib, ular lentiviruslar yoki ko'proq "umumiy" deb ataladi. Haqiqatan ham, inson tanasida hid taxminan 10 yil o'tgach, taxminan uch soatdan keyin faollikni ko'rsata boshlaydi.

Birinchi va boshqa turdagi immunitet tanqisligi aniqlangan. Ammo siz birinchi turdagi virusning kengayishi haqida jasorat bilan gapirishingiz mumkin. Qonni ichib, axlatga kelib, immunitetni isbotlagandek, virus tez ko'paya boshlaydi. Tanib olish uchun ishlatiladigan CD4 molekulasi erishib bo'lmaydigan dushmanni aniqlasa, u butun organizmni yuqtirishi mumkin. Ertaroq tashxis qo'yganlar uchun, bemorlarning vaqtini olishlari va uzoq umr ko'rishlari uchun ular ko'proq imkoniyatga ega.

Agar biror kishi o'zini SNIDga ishontira olsa, u xato qilmaydi. Bunday tashxis qo'yishning eng keng tarqalgan asosi qonda immunitet tanqisligiga antikorlarni aniqlashdir - virus mavjudligiga reaktsiya sifatida ayblangan oqsillar va hid 1,5 oydan 6 oygacha bo'lgan davrda joylasha boshlaydi. mumkin bo'lgan infektsiya soati. Ushbu davr tugagunga qadar diagnostikadan o'tish kerak.

Antikorlar soni aniqlanadi, immunoassay fermenti (IFA) nomi o'tkazib yuborilgan vikorist tahlili. Qaysi usul ishonchli, sharob teng darajada aniq va juda sezgir, qi ko'rsatkichlari 99,5% dan yuqori bo'lishi kerak. Farmatsevtika bozori IFA uchun bir qator diagnostik test to'plamlarini targ'ib qiladi: Combibest VIL, Anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL, CombiBest anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL 1 2 d 0172. Test tizimlari uchinchisiga qadar qolishi kerak. avlod. Belgilangan reagentlarning etishmasligi: hidlar har doim ham kasallikni erta ko'rsatmaydi. Odam allaqachon virusga ega, u sheriklar uchun potentsial xavflidir, ammo qonda hali ham antikorlar yo'q.

Asosiy uskunada 12 * 8 yoki 192 anti-VIL tahlillarini o'tkazish uchun bir qator testlarni o'rnating. Ular bilan o'z-o'zini tuzatish tavsiya etilmaydi. Preparatlar tavsifida, bu har ikki turdagi SNID ga antikorlar sonini aniqlash - bu smut belgisi ekanligi ta'kidlangan. Shuningdek, SNIDga barcha sinflarning antikorlarini tayinlang. Agar antikorlar bo'lmasa, kasallik aniqlanmaydi.

"Ishga tushirish" testlarining to'rtdan bir qismi, krem ​​antikorlari, SNID antijenlari, binoning hidi infektsiyani erta aniqlash uchun uchinchi avlod infektsiyasini kamaytiradi. Tenglashtirish uchun: qonda 2L ê antijeni, 5-dobidan boshlab, birinchi antikorlar oldinroq emas, bir oy ichida kamroq paydo bo'ladi. CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (to'plam 1) va CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (to'plam 2) 4-avloddan oldin sinovdan o'tkazilishi kerak. Ushbu reagentlar to'plami bilan tezlashgandan so'ng, 1, 2 - p24 antijeniga antikorlar aniqlanadi, qon zardobiga yoki inson qon plazmasiga etib boradi. Bagato mamlakat zastosovuyt IFA test o'zini 4 avlodlar, masalan, men uni Antigen / Antikor, qisqartirilgan - AGATE chaqiraman.

Sinov anonim ravishda amalga oshiriladi.

VIL-infektsiyasi bir qator usullarning kombinatsiyasi, o'ziga xos profilaktika va terapiyaning samarasizligi tufayli nazoratsiz kasallik deb tasniflanadi. VIL-infektsiyasi bilan epidemiologik vaziyatni nazorat qilish uchun skrining diagnostik kuzatuvidan o'tish muhimdir. VIL-infektsiyani diagnostika qilishning o'rtacha usullari soni semirib ketgan bemorlarda kasallikning serologik belgilarini aniqlashga imkon beruvchi ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili (IFA) bilan band.

Cyoma Rydomlenní da Sirovattsí Kroví 40 823 OSIB-da Víl uchun Antitail visnant natijasini taqdim etdi, uni Pazínti zhínechih consorals, Polikíkínik, Líkaren Mist va Torzhni Centerív, Scho Spetsívyíal tomonidan iste'mol qilindi. virusli gepatit B, bu venerik kasalliklar bilan). Kuzatuv 2005 yilda Milliy akusherlik va ginekologiya ilmiy-tadqiqot institutining immunologiya laboratoriyasida o'tkazildi. OLDINDAN. Otta RAMS yuqumli kasalliklar.

Qon serozi seromalarini birlamchi tikish uchun "Comb_Best anti-VIL-1+2" (ZAT "Vektor-Best", Novosibirsk) test tizimi sinovdan o'tkazildi - 2 (A, G va M sinflarining immunoglobulinlari) . Ushbu diagnostika to'plamida rekombinant VIL oqsillari planshetlarning quduqlariga immobilizatsiya qilish uchun ham, peroksidaza xron bilan konjugat holatida ham kiritiladi. Sirovoklarni tahlil qilish natijalarini baholash sinov tizimi bo'yicha ko'rsatmalarning tavsiyasiga binoan amalga oshirildi: salbiy (VIL-1 va VIL-2 ga antikorlar yo'q) sinov namunalari, optik quvvat (OD) deb hisoblanadi. ulardan IFAda OPcrit qiymatidan oshmagan.

Laboratoriya skriningida 40 823 ta qisqichbaqadan 40 222 tasi (98,5%) ELISA natijasi salbiy ekanligi aniqlandi va tekshirilgan namunalarning 601 tasi (1,5%) dastlab ijobiy deb tasniflandi. Ertasi kunning natijasiga ko'ra, dublikatlarda (planshetning ikkita qudug'i) 601 sirowort terisini takroriy tahlil qilish natijasida 440 (73,2%) slugs ijobiy, 161 (26,8%) esa salbiy deb baholandi. Sog'liqni saqlash va ijtimoiy rivojlanish vazirligining tavsiyasiga ko'ra, 440 ta skrining-musbat siroplar muzlatilgan va qo'shimcha yordam ko'rsatish uchun 30 im-sonli tibbiyot referent laboratoriyasining maslahat-diagnostika xonasiga o'tkazildi. S.P. Botkina. "EKOlab-Vironostics VIL 1.2 Ag/At" ("EKOlab", Elektrogorsk), "Genscreen Plus" ning turli xil ferment immunoassay test tizimlarida quyidagi tadqiqotlar o'tkazildi. OIV Ag-Ab” (“BioRad”, AQSH), shuningdek, immunoblot to'plamlari. Tasdiqlovchi testlarda 440 ta onaning tahlili natijalari viltning oʻsishiga imkon berdi, ularda 323 tasi (73,4%) ijobiy, 102 tasi (23,2%) taʼsirida salbiy taʼsir koʻrsatdi. 15 ta kuzatuv namunalari uchun (3,4%) ahamiyatsiz tahlil natijalari olib tashlandi.

Quyidagilar shuni ko'rsatadiki, bizning laboratoriyamizda CombiBest anti-VIL-1+2 test tizimining sinovlarini dastlabki sinovdan o'tkazishda olingan 323 ta ijobiy ayolning 314 tasi (97,2%) uchun 0,900 dan 1,780 gacha bo'lgan. 9 (2,8%) srazkív - 0,500–0,900. 52 ta bemor (51%) uchun 102 ta salbiy sirovokni skriningdan olingan OD qiymatlari 0,195 dan 0,400 gacha bo'lgan oraliqda sinovdan o'tkazildi; 40 ta (39,2%) namunalar uchun - 0401-0800; 10 (9,8%) tozalaydi - 0,800 dan ortiq.

Shu tariqa, olib borilgan ishlar natijasida VIL-infektsiyada serologik markerlar mavjudligi uchun qon sirovatlarining birinchi septisemiyasi “Comb_Best anti-VIL-1+2” test tizimi testlari bilan ko'rsatildi. yuqori samarali hisoblanadi. Ijobiy skrining natijalari 73% hollarda referent laboratoriyada qo'shimcha kuzatuv tadqiqotlari bilan tasdiqlangan va 40 823 testdan o'tgan bemorlarning 0,25% dan kamida ijobiy natijalar qayd etilgan.

Tavsif

Tayyorgarlik

Ko'rsatma

Natijalarni talqin qilish

Tavsif

Uchrashuv usuli Ferment immunoassay (IFA).

Kuzatuv materiali Qon zardobi

Uyga borish mumkin bo'lgan yo'l

VIL 1 va 2 turdagi antikorlarni va p24 VIL antijenini birgalikda aniqlash, test.

Hurmat. Ijobiy va kümülatif reaktsiyalar bilan natijani ko'rsatadigan shartlar 10 ish kuniga qadar oshirilishi mumkin. SNID (Buffaled immunitet tanqisligi sindromi) ga olib keladigan BIL (odamning immunitet tanqisligi virusi) - retroviruslar oilasiga tegishli. U odamdan odamga boshning loyqaligi va vena ichiga dori yuborish yoki terapevtik muolajalar uchun shpritslar, ham heteroseksual, ham gomoseksual jinsiy aloqa paytida yuqadi. Virusning yuqishi yuqtirilgan qon va mahsulotlarni quyish, ona yurtimizdan organlarni donorlik qilish, shifokorlarda - infektsiyalangan igna va asboblar bilan jarohatlanganda sodir bo'lishi mumkin. VL bilan infektsiya infektsiyalangan onadan bolaga (vertikal yo'l) yo'l bilan yuqishi mumkin, ammo surunkali antiretrovirus terapiyaning oldini olishning zamonaviy usullari barcha tavsiyalar bilan bunday xavfni minimal darajaga tushirishi mumkin.

Virus va klitinaning o'zaro ta'siri jarayoni bir qator bosqichlarni o'z ichiga oladi: virus va klitin o'rtasidagi bog'liqlik, uning tunikasining rivojlanishi, sitoplazmaga kirishi, virus RNK dan DNK sintezi, virus DNK ning xost genomiga kiritilishi. Agar shunday bo'lsa, infektsiyaning yashirin bosqichi boshlanadi. Bunday holatda provirus DNKsi faollik ko'rsatmasdan va lordning hayotiga aralashmasdan bir soat davom etishi mumkin. Virusli oqsillarning ifodasi bo'lmasa-da, virusga qarshi immunitet mavjud emas. Organizmning immun tizimini tavsiflovchi VIL ga antikorlar virus DNKsi va virusning faol ko'payishi faollashganidan keyin paydo bo'ladi. Yashirin davrning trivalligi past omillarga, shu jumladan organizmning individual genetik xususiyatlariga bog'liq.

VILga qarshi antikorlar infektsiyadan keyingi kundan boshlab ayblanishi mumkin; í̈x vmíst zbílshuêtsya 2-4 kun cho'zilgan va zberígaêtsya boy rokív cho'zilgan. Infektsiyalarning 90-95 foizida hidlar infektsiyadan keyingi dastlabki uch oyda, 5-9 foizida - uch oydan olti oygacha bo'lgan davrda, 0,5-1 foizda - hayot davomida paydo bo'ladi.

INFEKTSIONning birinchi bosqichida, hatto virusga antikorlar paydo bo'lishidan oldin (keyin serokonversiyadan oldin) serozning plazma namunalarida VIL, zocrema iogo kapsid oqsili p24 antigenlari mavjudligini aniqlash mumkin. Keyinchalik, serokonversiyadan so'ng, VIN aniqlanmaydi.

OIV Ag/Ab Combo testidan (Architect, Abbott) foydalanish mumkin bo'lgan 4-avlod test tizimlarining kombinatsiyasi VIL 1 va 2 turdagi ikkala antikorni, shuningdek, erta aniqlash imkonini beruvchi P24 VIL antijenini aniqlaydi. infektsiyadan. VIL-infektsiyani aniqlash uchun INVITRO laboratoriyasida o'tkaziladigan skrining testining o'ziga xos xususiyatlaridan oldin varto, muvaffaqiyatning yuqori o'ziga xosligi (> 99,5%); Serokonversiya davriga xos bo'lgan antikorlarga tahlil qilish uchun 100% sezgirlik va p24 antijeni uchun testga nisbatan sezgirlik 18 pg / ml ga yaqin.

Rossiya Federatsiyasi Sog'liqni saqlash vazirligining buyrug'i bilan VIL suvoro tartibga solish bo'yicha laboratoriya obstezhennja o'tkazish tartibi va vikoristannya ruxsat immunoenzimatik (IFA) usullari bilan VIL uchun antikorları aniqlash amalga oshirish uchun skrining (sinov) bosqichini o'z ichiga oladi. , va tekshirish bosqichi (pídtverzhuê) ko'proq Shuni ta'kidlash kerakki, eng qisqa skrining IFA-tizimlari 100% o'ziga xoslikni kafolatlamaydi, shuning uchun bemorning qon zardobining xususiyatlari bilan bog'liq bo'lgan o'ziga xos bo'lmagan, hibno-musbat natijalar ehtimoli mavjud. Shuning uchun infektsiyaning IFA skriningining ijobiy natijasi tasdiqlovchi testlarda tasdiqlanmasligi mumkin, shundan so'ng bemorga salbiy yoki ahamiyatsiz natija ko'rsatiladi. Agar kuzatuv natijasi ko'rsatilmagan bo'lsa, test 2-3 kundan keyin dinamik ravishda takrorlanishi kerak.

Bolalarda, OIV bilan kasallangan onalar bilan kasallangan odamlarda OIV infektsiyasining laboratoriya diagnostikasi o'ziga xos xususiyatlarga ega bo'lishi mumkin. VIL (IgG klassi)gacha bo'lgan onaning antikorlari 18 oylikgacha qonda aylanishi mumkin. Yangi tug'ilgan chaqaloqlarda VIL ga antikorlarning mavjudligi virusning platsenta to'sig'iga kirmaganligini anglatmaydi. VIL bilan kasallangan onalarning bolalari tug'ilgandan keyin 36 oy davomida laboratoriya-diagnostik obstruktsiyadan o'tadilar.

Tayyorgarlik

Maxsus tayyorgarlik talab qilinmaydi. Qon namunasini kunning qolgan qismidan keyin 4 yildan kechiktirmasdan olish tavsiya etiladi. Belgilangan muddatga tayyorgarlik ko'rish uchun eng muhim tavsiyalar bilan tanishishingiz mumkin. VIL ga antigen va antikorlarni aniqlashni oldinroq emas, balki mumkin bo'lgan infektsiyadan keyin kamida ikki marta, uch va olti martadan keyin takrorlash salbiy natija bilan kuzatib boring. "INVITRO" TOVda bo'lish uchun arizalarni ro'yxatdan o'tkazish pasport yoki almashtirilishi mumkin bo'lgan hujjat (migratsiya kartasi, yashash joyi bo'yicha ro'yxatdan o'tish muddati, harbiy xizmatga bag'ishlanish, pasportni berishda yakuniy rasmiylashtirish) orqasida amalga oshiriladi. pasport, ro'yxatga olish organi). Hujjat obov'yazkovo taqdimoti noto'g'ri va vaqt va Rossiya Federatsiyasi post-ro'yxatga olish va fotosurat haqida ma'lumot aybdor. Pasportning (uning o'rnini bosuvchi hujjat) haqiqiyligi uchun bemor biomaterialni yetkazib berish uchun anonim ariza berish huquqiga ega. Anonim obstezhenny, ariza va rad etilgan mijoz turi bo'lsa, biomaterialga faqat bemorga va arizani tuzadigan tibbiy xodimlarga raqam beriladi. ! Anonim saqlanadigan tergov natijalarini kasalxonaga yotqizish uchun taqdim etish mumkin emas, professional sharhlar ORUIBda ro'yxatdan o'tishni talab qilmaydi.

Tan olishdan oldin ko'rsating

• Zbilshennya limfa tugunlari ikki hududdan ortiq.
• Leykopeniya bilan limfopeniya.
• Kechasi ichish.
• Asossiz sababga ko'ra keskin ozib ketgan.
• Uch kundan ortiq diareya, aniq sabab yo'q.
• Noma'lum sabablarga ko'ra isitma.
• Vaginatsiyani rejalashtirish
• Operatsiyadan oldingi tayyorgarlik, kasalxonaga yotqizish.
• Qo'zg'atuvchi infektsiyalar yoki undan keyingi belgilar: sil, manifest toksoplazmoz, tez-tez takrorlanadigan gerpes virusi infektsiyasi, ichki organlarning kandidozi, takroriy gerpes zoster nevralgiyasi, viklikana mikoplazmasi, pnevmokistis yoki pnevmonella.
• Yosh yigitda Kaposi sarkomasi.
• Vipadkovi stateeví aloqalar.

Natijalarni talqin qilish

Natijalarni talqin qilish tashxisni emas, balki shifokorga ma'lumot berishdir. Ushbu bo'limdagi ma'lumotlarni o'z-o'zini tashxislash va o'zini o'zi aniqlash uchun ishlab chiqa olmaydi. Ushbu obstezhennia natijasida g'olib bo'lgan shifokor bilan to'g'ri tashxis qo'yish uchun va men boshqa tomirlardan ma'lumotga muhtoj bo'laman: anamnez, boshqa obstezheniya natijalari.

Shaxslar Mustaqil laboratoriya INVITRO da vafot etdi: test yakísny. Natijalarni taqdim etish shakli: VIL 1 va 2 ga antikorlarning mavjudligi va p24 antijeni "salbiy" deb hisoblanadi. Skrining fermenti immunoassayida VIL yoki antigenga antikorlar aniqlangan taqdirda, sirowort namunasi SNIDning Moskva markaziga immunoblot usuli bilan qo'shimcha tasdiqlash uchun tuzatiladi, bu ijobiy va ahamiyatsiz natijalarni tasdiqlaydi.

Ijobiy natija:

1. OIV infektsiyasi;
2. takroriy yoki qo'shimcha natijalarga olib keladigan hibnopozitiv natija *);
3. tadqiqot 18 oygacha bo'lgan bolalarda, VIL bilan kasallangan onalarning bolalarida informatsion emas edi.

*Antitil skrining test tizimining VIL 1 va 2 va VIL 1 va 2 antijeni (HIV Ag/Ab Combo, Abbott) bo'yicha o'ziga xosligi, reagentlar tomonidan taqdim etilgan baholashlarga ko'ra, dunyo aholisida ham 99,6% ga yaqinlashadi. va potentsial shovqinlari bo'lgan bemorlar guruhida (HBV, HCV, qizilcha, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. va in. infektsiyalari, otoimmün patologiyalar (shu jumladan revmatoid artrit, antinuclear mavjudligi) antikorlar), IgG, IgM siljishi, monoklonal gammopatiya, gemodializ, ko'p qon quyish).

VIL-ínfektsíí'ni o'z vaqtida tashxislash juda muhim yondashuvga aylanadi, buning uchun avvalo, ko'tarilish qulog'i nima uchun kasallikning keyingi rivojlanishini ko'rish va kasal odamning hayotini davom ettirish yaxshiroq ekanligiga boy bo'lishi mumkin. Qolgan yillarda dahshatli kasallikning Galusian ko'rinishida vagomiya rivojlanishi kuzatiladi: eski test tizimlari mukammallar bilan almashtiriladi, konditsionerlik usullari qulayroq bo'ladi va ularning aniqligi sezilarli darajada yaxshilanadi.

Ushbu maqolada, VIL-infektsiyani tashxislashning hozirgi usullari haqida ma'lum, zodagonlar muammoni o'z vaqtida hal qilish va bemorning normal hayotini yaxshilash uchun tasvirlangan.

VIL diagnostika usullari

Rossiyada VIL-infektsiyani tashxislash uchun ikkita tenglikni o'z ichiga olgan standart protsedura o'tkaziladi:

• IFA test tizimi (skrining tahlili);
• immunoblot (IB).

Shuningdek, diagnostika uchun boshqa usullardan foydalanish mumkin:

• ekspress test.

IFA test tizimlari

VIL-infektsiyani aniqlash uchun diagnostikaning birinchi bosqichida skrining testi (IFA) o'rnatiladi, bu laboratoriyalarda VIL oqsillarini yaratish uchun asos bo'lib, u infektsiya paytida tanada tebranadigan o'ziga xos antikorlarni ushlaydi. . Sinov tizimining reagentlari (fermentlari) bilan har qanday o'zaro ta'sirdan so'ng indikatorning ifloslanishi o'zgaradi. Rangning o'zgarishini hisobga olgan holda, ular maxsus jihozlarda qayta ishlanadi, shuning uchun tanlangan tahlil natijasi aniqlanadi.

Shunday qilib, IFA testlari natijani VIL-infektsiyasi kiritilgandan keyin bir necha kun o'tgach ko'rsatishi mumkin. Ushbu tahlil virus mavjudligini ko'rsatmaydi, lekin u yangi narsaga antikor ishlab chiqarishni ko'rsatadi. Ba'zi hollarda, inson organizmida VIL ga antikorlar infektsiya maydonida 2 kundan keyin pishira boshlaydi, lekin ko'pchilik odamlarda 3-6 kundan keyin yomon hid tebranadi.

Turli xil sezuvchanlikdan IFA-testlari avlodining ísnuê chotiri. Dunyoning qolgan qismida III va IV avlod test tizimlari ko'proq ishlab chiqilgan, chunki ular sintetik peptidlar yoki rekombinant oqsillar asosida yaratilgan va ko'proq o'ziga xoslik va aniqlikka ega bo'lishi mumkin. Ular VIL-infektsiyani tashxislash, VIL tarqalishini kuzatish va donor qonini qayta tekshirish paytida bemorning xavfsizligi uchun g'alaba qozonishlari mumkin. III va IV avlod IFA-test tizimlarining aniqligi 93-99% ni tashkil qiladi (G'arbiy Evropa erlarida ishlab chiqariladigan sezgirroq testlar - 99%).

IFA testi uchun bemorning venasidan 5 ml qon olinadi. Qabul qilish va tahlil qilishning qolgan qismi o'rtasida kamida 8 yil o'tishi mumkin (qoida tariqasida, siz kelajakda g'alaba qozonasiz). Bunday testni infektsiya o'tkazilgandan keyin 3 kundan kechiktirmasdan (masalan, yangi qonuniy sherik bilan himoyalanmagan nizomdan keyin) o'tkazish tavsiya etiladi.

IFA testining natijalari 2-10 kun ichida olinadi:

• salbiy natija: fahivtsya olib kelmaydi infektsiya VIL mavjudligini ko'rsatuvchi;
• hibnomanfiy natija: ehtiyot bo'lishingiz mumkin erta shartlar infektsiya (3 kungacha), sezilarli asfiksiya bilan SNIDning kech bosqichlarida va qonni noto'g'ri tayyorlashda;
• hibnopozitiv natija: ba'zi kasalliklarda va qonni noto'g'ri tayyorlashda xavfli bo'lishi mumkin;
• ijobiy natija: infektsiyani ko'rsatadi VIL infektsiyasi, IBni o'tkazish va bemorni mutaxassisga SNID markaziga yuborish uchun.

Nima uchun IFA testi ijobiy natijalar berishi mumkin?

VIL uchun IFA testining noto'g'ri natijalari qon namunalarini noto'g'ri olish yoki bunday holatlar va kasalliklarga chalingan bemorlarda yuzaga kelishi mumkin:

• ko'p miyelom;
• Epstein Barr virusi tomonidan qo'zg'atilgan yuqumli kasallik;
• lagerdan keyin;
• otoimmün kasallik;
• vaginess fonida;
• emlashdan keyingi lager.

Yuqorida tavsiflangan sabablarga ko'ra qonda o'ziga xos bo'lmagan o'zaro reaktiv antikorlar bo'lishi mumkin, ularning paydo bo'lishi VIL-infektsiyasi qo'zg'atmagan.

Qolgan yillarda chibnopozitiv natijalarning chastotasi shu bilan birga III va IV avlod test tizimlarining haddan tashqari ko'pligi, peptid va rekombinant oqsillarning sezgirligi (hidlar qo'shimcha genetik muhandislik bilan sintez qilingan) natijasida kamaydi. in vitro). Bunday Elishay testlari boshlanganidan so'ng, noto'g'ri natijalarning chastotasi sezilarli darajada kamaydi va 0,02-0,5% ga yaqinlashdi.

Cibnopozitiv natijaning namoyon bo'lishi odamning VIL bilan kasallanganligini anglatmaydi. Bunday hollarda JSST yana bitta Elishay testini o'tkazishni tavsiya qiladi (4-avlod obov'yazkovo).

Bemorning qoni "takrorlash" belgisi bilan ma'lumotnoma yoki hakamlik laboratoriyasiga yuboriladi va IV avlod IFA test tizimida davom ettiriladi. Agar yangi tahlil natijasi salbiy bo'lsa, unda birinchi natija kechirim (chibnopozitiv) deb tan olinadi va IB o'tkazilmaydi. sumnívnym ijobiy soni boshqa sinov birinchi soat natijasi bilan kasal odam VIL-ínfikuvannya zarurligini tasdiqlash uchun 4-6 kun ichida IX amalga oshirish uchun tayinlanadi.

Immunitet bloki

HIL infektsiyasining qoldiq tashxisini faqat ijobiy immun blot natijasi (IX) keyin aniqlash mumkin. Yoga uchun nitroselüloz aralashmasi ishlatiladi, chunki virusli oqsillar qo'llaniladi.

IB uchun qon namunasi venadan olinadi. Bundan tashqari, maxsus ishlov berish va oqsillar beriladi, ular y syrovatsida joylashgan bo'lib, ular zaryad va molekulyar massa uchun maxsus jelga qo'llaniladi (manipulyatsiya elektr maydonining oqimi ostida maxsus jihozlarda amalga oshiriladi). Qon zardobidan jelga nitrotsellyuloza jeli qo'llaniladi va maxsus kamerada dog'lar ("blotting") amalga oshiriladi. Smug qayta ishlanadi va hatto materiallarda VILga qarshi antitellar mavjud, keyin hidlar IBda antigenik smugs bilan bog'lanadi va ko'rinadigan chiziqlarda paydo bo'ladi.

IB ijobiy yo'l sifatida qabul qilinadi:

• Amerika CDC mezonlariga ko'ra - erkak, ikki yoki uchta qatorda gp41, p24, gp120/gp160;
• Amerika FDA mezonlariga ko'ra - erkaklarda - ikkita qator p24, p31 va gp41 yoki gp120 / gp160 qatorlari.

Bemorlarning 99,9 foizida IX ning ijobiy natijasi VIL-infektsiyani ko'rsatadi.

Chiziqlarning ko'rinishi uchun - IB salbiy.

z gp160, gp120 va gp41 chiziqlari aniqlanganda, IB shubhali. Ushbu natijani quyidagilar bilan ko'rish mumkin:

• onkologik kasallik;
• bo'shlik;
• qisman qon quyish.

Shu bilan birga, boshqa kompaniyalarni qo'shimcha yollash bilan kuzatib borish tavsiya etiladi. Biroq, qo'shimcha IBdan so'ng, natija shubhali bo'ladi, qonning cho'zilishidan himoyalanish kerak (IB terining 3 oyligidan keyin amalga oshiriladi).

Polimeraza Lanzug reaktsiyasi

PCR testi virusga RNKni ko'rsatishi mumkin. Yogo sezgirligi ma'badga etib boradi va infektsiyadan 10 kun o'tgach, VIL-infektsiyani ko'rsatishga imkon beradi. Ba'zi hollarda PLR chibnopozitiv natijalar berishi mumkin, shuning uchun yuqori sezuvchanlik boshqa infektsiyalarga antikorlarga ta'sir qilishi mumkin.

Diagnostika usuli berilgan, bu qimmat, u maxsus jihozlar va mutaxassislarning yuqori malakasini talab qiladi. Qi sabablarga ko'ra aholini ommaviy sinovdan o'tkazishga yo'l qo'yilmaydi.

Bunday holatlarda PLR zastosovuetsya:

• yangi tug'ilgan chaqaloqlarda VILning namoyon bo'lishi uchun, chunki ular VIL bilan kasallangan onalarda tug'ilgan;
• VILning "asr davrida" namoyon bo'lishi yoki sumnivny IB uchun;
• qonda VIL kontsentratsiyasini nazorat qilish;
• donor qonini kuzatish uchun

Faqat PLR testidan so'ng, VIL tashxisi qo'yilmaydi, ammo u qiyin vaziyatlarni bartaraf etish uchun qo'shimcha diagnostika usuli sifatida amalga oshiriladi.

Ekspress usuli

VIL tashxisidagi yangiliklardan biri ekspress testlar bo'lib, natijalarini allaqachon 10-15 daqiqada baholash mumkin. Eng samarali va aniq natijalar kapillyar oqim tamoyillariga asoslangan qo'shimcha immunokromatografik testlardan kelib chiqadi. Xushbo'y hid maxsus jabduqlar, qon yak yoki boshqa doslidzhuvani rodin (slina, slash) qo'llaniladi. VIL ga antikorlarning mavjudligi uchun testda 10-15 kvilingdan so'ng rang nazorat qiluvchi ayol aniqlanadi - ijobiy natija. Agar natija salbiy bo'lsa, nazorat qiluvchi xotin endi mavjud emas.

IFA testlari kabi va keyin ekspress testlar natijalari IB tahlili bilan tasdiqlanadi. Shundan keyingina VIL-infektsiya tashxisini qo'yish mumkin.

Uy sinovi uchun ekspress to'plamdan foydalaning. OraSure Technologies1 (AQSh) FDA tomonidan tasdiqlangan test, retseptsiz mavjud va OIVni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin. Sinovdan so'ng, ijobiy natija bilan, kasal odamga tashxisni tasdiqlash uchun ixtisoslashtirilgan markazda obstezhenniyadan o'tishi tavsiya etiladi.

Uyda tayyorlangan viski uchun boshqa testlar hali FDA tomonidan tasdiqlanmagan va ularning natijalari yanada noaniq bo'lishi mumkin.

IV avlodning IFA testlariga o'zlarining aniqligi uchun testlarni ifodalovchilardan qat'i nazar, badbo'y hid aholini qo'shimcha tekshirish uchun keng qo'llaniladi.

VIL-ínfektsíí namoyon bo'lishi uchun tahlil binosi har qanday poliklinikada, CRL yoki ixtisoslashtirilgan SNID-markazlarida mumkin. Rossiya hududida hidlar mutlaqo maxfiy yoki anonim tarzda amalga oshiriladi. Teri bilan og'rigan bemor tahlil sanasigacha tibbiy va psixologik maslahat olish huquqiga ega bo'lishi mumkin. VIL bo'yicha testlar uchun to'lov tijorat ipotekalarida kamroq sodir bo'ladi va davlat klinikalari va dorixonalarida badbo'y hid bepul.

VIL-ínfektsíêyu yuqtirilishi mumkin bo'lgan yo'llar haqida va yuqtirish ehtimoli haqida afsonalar kabi, o'qing.