IFA-оношлогоо: эсрэгбиеийг тодорхойлох мөн чанар нь юу вэ, үүнийг хэрхэн яаж хийх вэ, зарим өвчний үед үр дүнтэй байдаг уу? VIL-халдварыг оношлох өнөөгийн аргууд Anti VIL 1 2 sho.

Власники патент RU 2283497:

Винахидыг биотехнологи, анагаах ухааны галерейд авчирсан. Imunofortent нь бусад төрлийн першотын вирусын Imunodephicite Lyni (vil) эсрэг іndifіkatsya спектрийн туршилтын систем, Persholi вирусын изимунодефицитийн алгана төрлийн үр тарианы эсрэгтөрөгч. O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol) , gp36 (env ВІL-2), ВІL 1 p24 эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие, илрүүлэх урвалжууд, энэ тохиолдолд эсрэгтөрөгч ВІL ба эсрэгбие ВІL нь ферменттэй холбоотой иммуносорбентийн шинжилгээ, використ сорбци хийх зорилгоор шахмалуудын янз бүрийн нүхэнд сорбсон байна, 96- худгийн полистирол хавтангууд байдаг. Винахид нь мэдрэмтгий байдал, өршөөл, үр дүнгийн үнэлгээний субьектив байдлыг багтаахыг дэмждэг. 1 z.p. f-li, 10 таб., 1 il.

Винахидыг биотехнологи, анагаах ухааны галерейд авчирсан. Vykoristannya: хүний ​​дархлал хомсдолын вирус 1 ба 2, VIL 1 бүлэг Pro болон эсрэгтөрөгч p24 VIL 1 нь уураг нь өвөрмөц эсрэгбие бүх ангиллын илрэлийн ялгах.

Хамааралтай байдал: 1 ба 2, VIL 1 бүлгийн Pro эсрэгбиеийн спектрийг тодорхойлох ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээний туршилт, VIL 1 бүлгийн p24 эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх, VIL 1 ба 2, VIL 2 эсрэгбие илрүүлэх шинжилгээний эерэг эсвэл тодорхой бус үр дүнг баталгаажуулах. бүлгийн эсрэгтөрөгч.

ВИНАХОДЫН ТОДОРХОЙЛОЛТ

IVL-халдварыг лабораторийн оношилгоо нь гурван заавар дээр суурилдаг: a) VIL ба түүний бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн заалт; б) VIL-ийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх; в) дархлааны тогтолцооны мэдэгдэхүйц өөрчлөлт. Серед үндсэн аргуудлабораторийн оношлогоо нь хамгийн өргөн тархсан ийлдэс судлалын - вирусын эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемийг илрүүлэх.

VIL-халдварт эсрэгбие илрүүлэхийн тулд гол аргууд нь ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (IFA) ба иммуноблотинг (IX) юм. IFA нь өвчний эсрэгбиемүүдийг холбосон ялтсууд дээрх вирусын эсрэгтөрөгчийг хөдөлгөөнгүй болгоход суурилдаг бөгөөд эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг хулганын моноклональ эсрэгбиемийг хүний ​​иммуноглобулины G ба M-тэй пероксидазын нэмэлт коньюгацид ашигладаг. Өвөрмөц, мэдрэмтгий хүргэх арга нь өвчтөнүүдийн 95% -д вирусын өвөрмөц эсрэгбиемийг илрүүлэх боломжийг олгодог. Нэмж дурдахад, цусан дахь эсрэгбие багатай бол халдварын эхний үе шатанд, эсхүл өвчний төгсгөлийн үе шатанд, хэрэв бие махбодь нь огцом хомсдох замаар эсрэгбие нийлэгжүүлэх чадваргүй болсон бол уналтын 5% -ийг эзэлдэг. дархлааны систем. Та ч бас чадна эрлийз эерэг үр дүн IFA нь аутоиммун өвчин, онкологийн өвчин, түүнчлэн Eshptein-Barr вирусын улмаас үүссэн халдвартай өвчтөнүүдэд чухал ач холбогдолтой юм. Энэ тохиолдолд ревматоид хүчин зүйл, Эпштейн-Барр вирус эсвэл гистосумын 1 ба 2-р ангиллын толгойн цогцолборын уурагтай төстэй (HLA-4 ба DQW3) эсрэгбиеийн эсрэгбиемүүдийн хөндлөн урвал, BIL антигентэй холбогддог. Гибноэерэг үр дүн нь ихэвчлэн жирэмсэн эмэгтэйчүүд болон сул дорой насны хүмүүст ажиглагддаг. Цус задрал, липеми, сироворт бактерийн бохирдол зэрэг нь буруу үр дүнгийн шалтгаан болдог.

Cym-тэй холбохдоо эсрэгбие илрүүлэх үр дүнгийн өвөрмөц байдлыг шалгах хэд хэдэн аргыг санал болгож, ялалт байгуулсан. Эдгээр аргуудын гурав нь "Western Blot"-ийн өөрчлөлтөд "дархлаа арилгах" урвалыг өдөөдөг. Аргын мөн чанар нь доромжилсон аргад оршдог: эхний шатанд полиакриламид гель дэх нэмэлт электрофорез хийхийн тулд молекулын жингийн BILKIV VIL дор ажиллах шаардлагатай. Дараа нь полиакриламидын гельээс нитроцеллюлозын мембраны гадаргуу руу электрофоретик дамжуулалт үүсдэг. Ийм аргаар эсрэгтөрөгчийг шилжүүлэх нь нэмэлт шууд бус шинжилгээгээр мембранаар илэрдэг: мембраныг дараах материалаар өсгөвөрлөнө; эсрэгбие нь зугтаж, нитроцеллюлозын мембран руу шилжүүлсэн VIL эсрэгтөрөгчтэй холбогдож, дараа нь коньюгаттай хамт өсгөвөрлөнө; эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсэх үед коньюгатыг шинээр нэмж, коньюгатыг нэвтрүүлж, субстраттай инкубаци хийсний дараа эдгээр нитроцеллюлозын эсүүд ялгарч, эсрэгтөрөгч-эсрэгбие-коньюгат цогцолбор уусдаг. Сандал дээр дархлаажуулалтын эерэг, сул эерэг, сөрөг үр дүнгийн жишээг үзүүлэв.

VIL-1 ба VIL-2-ээр халдварласан ХДХВ-эерэг osib-д урагшлах уураг (p) ба гликопротейн (gp)-ийн эсрэгбиемүүдийг илрүүлдэг: хүснэгт А.

Хүснэгтэнд ДЭМБ-аас санал болгосон дархлаажуулалтын үр дүнг үнэлэх шалгуур үзүүлэлтүүдийн танилцуулгад. Оросын төвурьдчилан сэргийлэх, SNIDom-той тэмцэх.

ДЭМБ-ын Vihodyachi ын шалгуур үзүүлэлт, эерэг vvazhayut sirovatki, ямар арга IХ бүрхүүл VIL-1 хоёр уураг хүртэл эсрэгбие илрүүлэх. Зөвхөн бүрхүүлийн уургийн аль нэгтэй (gp160, gp120, gp41) бусад уурагтай эсвэл үүнгүйгээр урвалд орох нь тодорхой байдаг тул үр дүн нь эргэлзээтэй байдаг. SNID-ээс урьдчилан сэргийлэх, тэмцэх талаар ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны Холбооны шинжлэх ухаан, арга зүйн төвийн мэдээлснээр сировацийг эерэг гэж тайлбарлаж, эсрэгбие байгаа эсэхийг зөвхөн нэг хальсны уураг гэж үзэх боломжтой.

p24 эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие байгаа нь тухайн үеийн сероконверцийг илтгэж болох боловч уургийн эсрэгбиеийн хэсгүүд нь өөрөө анхных гэж тооцогддог. Env уурагтай урвалд ороогүй гаг ба полын уургуудтай эерэг урвал нь сероконверцийн эхний үе шатыг илтгэхээс гадна VIL-2 халдвар эсвэл өвөрмөц бус урвал байгааг илтгэнэ.

VIL-ийг дархлаажуулах урвалын шинжээчийн арга гэж оношлоход хэд хэдэн дутагдал байдаг.

1. Нэг цагийн скринингийн чанарт скринингийн дутуу (глюздим бус) скрининг илрүүлэх боломжтой VIL хүртэлх эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийг нэг цагт илрүүлдэг олон удаагийн шинжилгээгээр p24 антиген VIL 1 илэрсэн эсэхийг батлах боломжгүй. -Оросын Холбооны Улсад VIL 37 хүртэлх эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиемийг цаг тутамд илрүүлэх). 2001 он: "Цус сэлбэх станцууд дахь гажигтай доноруудын хувьд нэг шөнийн дотор VIL-ийн эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиемийг илрүүлэх тестийн системийг хөгжүүлэх шаардлагатай").

2. IgG ангиас давсан эсрэгбиеийг тодорхойлох. 3, 4-р үеийн (IgG ба IgM эсрэгбиемүүдийг харуулсан) үр дүнтэй туршилтаар хасагдсан эерэг үр дүнг баталгаажуулах боломжгүй юм.

3. Туршилтын онооны тайлбарын субъектив байдал, ялангуяа "эргэлзээтэй" болон "ач холбогдолгүй" үр дүн гарсан тохиолдолд кобын үе шатуудсероконверси (эдгээр уналтын үед нитроцеллюлозын мембран дээр харагдах гөлгөр тэмдэг нь бүдэг бадаг, мөсийг нүдээр харж болно, янз бүрийн хүмүүс үнэлдэг бол тэд ихэвчлэн төөрөгдөлд орохоос айдаг).

4. Шинжилгээний үр дүнг автоматжуулсан тооцооллын үнэлгээ хийх боломжгүй байдал.

5. IFA мэдрэмжийн улмаас хамгийн бага.

6. Сэргээх хангалтгүй байдал (холимог хадгалагдах тохиолдолд нитроцеллюлозын мембран цэцэглэж, илрэлийн бодит баталгаа биш, эсвэл хүнд хэлбэрийн хямралын үед VIL-ийн илрэл биш байж болно).

7. Урвалын томъёолол, хэмнэлтийн хүндрэлүүд (нитроцеллюлозын мембраны холболтууд нь хандлагатай, ихэвчлэн тасардаг).

8. Олон төрлийн IB багц.

Vіdomiy урвалж, є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є є і н нэг цагийн турш н эсрэгбиемийг ижил эмгэг төрөгч, тэр дундаа VIL (DE 4236189 F1, 1994.04.28) vyznachennja. VIL-халдварыг янз бүрийн үе шатанд оношлох боломжийг олгодог туршилтын систем байдаггүй.

Энэхүү дарсны үйлдвэрийн менежер нь судсаар тарих тохиолдолд VIL 1 ба 2, VIL 1 бүлгийн прота антиген p24 VIL 1 хүртэлх эсрэгбие илрүүлэх шинжилгээнд эерэг буюу хуримтлагдсан үр дүнг баталгаажуулах туршилтын системийг худалдан авах шаардлагатай. нэг удаагийн эсрэгтөрөгчийн эсрэгтөрөгчийн шинжилгээ.

Proponovane tehnіchne rіshennya dosyagaєtsya іmunofermentnoyu туршилтын іdentifіkatsії спектрийн систем antitіl нь vіrusu іmunodefіtsitu Lyudin (VІL) pershit Би бусад tipіv, pershit бичнэ groupies Pro viyavlennya антиген osnovі эсрэг хүний дархлал хомсдолын вирус дээр vіrusu іmunodefіtsitu Lyudin pershit төрөл ху24 scho harakterizuєtsya Тим scho Won vklyuchaє іmunosorbent нь ху24 , энэ нь gp41 (env VIL-1 ба VIL-2 бүлэг O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), VIL 1 p24 эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие ба илрүүлдэг. урвалжууд, хэт их өртсөн тохиолдолд VIL эсрэгтөрөгч ба VIL эсрэгбие нь ферментийн дархлааны шинжилгээнд зориулж ялтсуудын янз бүрийн нүхэнд шингэдэг.

Нэмж дурдахад, ферментийн дархлааны шинжилгээнд зориулсан 96 худагтай полистиролын төрөл бүрийн эсвэл төрөл бүрийн бус хавтанг використ сорбци хийхэд ашигладаг.

Техникийн үр дүн, Poleg нь Vinoal нь Tsim, PIDARZHENNE суваг дээр эерэг үр дүн нь Antitus нь VIL 1 I 2, VIL 1 бүлгийн тухай тэр эсрэгтөрөгч p24 vіl 1, мэдрэмжийн үсрэлт, автоматжуулж болно үр дүн, vico. IB varostі-ийн чухал багцуудтай бага хосолсон.

Tse tekhnіchne rіshennya vіdrіznyaєtsya vіd vіdomih:

1. Дархлаа судлалын урвалын хувьд хатуу фазын зөөвөрлөх шахмал байдлаар Vykoristannya.

2. p 24 VIL хүртэлх эсрэгбие болон VIL эсрэгтөрөгчийн багцыг сорбент болгон нэг цагийн туршина.

Винахидыг өгзөг гишгүүрээр дүрсэлсэн байна.

Өргөтгөсөн туршилтын системийн "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR + AG r24 VIL 1" є:

Immunosorbent - VIL-1 бүтцийн уурагтай төстэй рекомбинант эсрэгтөрөгч: gp41 (env VIL-1 ба VIL 1 бүлэг O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), VIL-2: gp36 (env) ба VIL 1(p24) антигентэй хулганы моноклональ эсрэгбие, полистирол түгээх хавтангийн туузан дээрх сорбцийг ялгах.

Дархлаа шингээгч vicorist бэлтгэхийн тулд:

1. HIV-1 gp41 нь E. Coli омгийн № AHIV 103-аар үүсгэгддэг уураг юм.

2. ХДХВ-1 gp120 нь E. Coli омгийн No AHIV 109-ээр үүсгэгддэг уураг юм.

3. ХДХВ-1 p24 нь E. Coli омгийн No AHIV 105-аар үүсгэгддэг уураг юм.

4. ХДХВ-1 p31 - E. Coli омгийн No AHIV 108-аар үүсгэгддэг уураг.

5. HIV-2 p36 нь E. Coli омгийн № AHIV 106-аар үүсгэгддэг уураг юм.

Коньюгат 1, лиофильжсэн эсвэл ховор тохиолддог - биотинтэй хавсарсан p24 VIL1 антигентэй хулганы моноклональ эсрэгбие.

1. Коньюгат 2, лиофилжсэн эсвэл ховор, - VIL-1 бүтцийн уурагтай төстэй рекомбинант эсрэгтөрөгчийн нийлбэр: gp41 (env VIL-1 ба VIL 1 бүлэг O), gp120 (env), p24 (gag), p31(po1) ; VIL-2: gp36 (env), биотинтэй хавсарсан;

2. Коньюгат 3, 4 – лиофилижсэн эсвэл ховор тохиолддог – хрон пероксидазын шошготой стрептавидин;

Өмнөх судалгааны явцад туршилтын системийн дизайныг хянаж, її бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг бэлтгэх технологийг өөрчилж, иммуноферментийн урвалыг оновчтой болгож, гүйцэтгэсэн.

"DS - IFA - ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+Ag p24 VIL 1" туршилтын системд IFA тогтоохдоо p24 хүртэл сорбсон эсрэгбие бүхий хавтангийн нүхэнд 25 мкл коньюгат-1 нэмж, нүхэнд хийнэ. сорбсон антигентэй - 25 мкл коньюгат-2. Урвалын схемийг доор үзүүлэв. Сүүлийн тунгаас 25 мкл болгохын тулд арьсны нүхийг өгнө. Үүний тусламжтайгаар эсрэгтөрөгч бүхий цооногийн өнгө нь улбар шараас улаан өнгөтэй, эсрэгбие бүхий цооногт ногооноос сири хүртэл өөрчлөгддөг. Сумишийг сэгсрэгч дээр 37°С-т 45 минутын турш (эсвэл термостатад 37°С-т 1 жил) өсгөвөрлөнө. Дараа нь тарилгагүйгээр 50 мкл коньюгат-3-ыг p24-ийн эсрэгтөрөгчийн хавтангийн нүхэнд, 50 мкл коньюгат-4-ийг эсрэгтөрөгчийн зорилтот нүхэнд хийнэ. Чичиргээнд 37°С-т 20 минутын турш (эсвэл термостат дахь 37°С-т 30 минут) инкубацийн дараа хавтанг угааж, субстратын хольцыг гаргана. Урвалын эцсийн цаг нь 1 жил 25 минут (эсвэл 1 жил 50 минут). Зорилтот өвчтөнд байгаа p24 эсрэгтөрөгч нь p24 хүртэлх моноклональ эсрэгбиемүүдтэй холбогддог ба өвөрмөц эсрэгбие нь хавтан дээрх рекомбинант эсрэгтөрөгчтэй цогцолбор үүсгэдэг. Ууссан p24-тэй анти-p24-p24 дархлааны цогцолбор нь p24-биотины эсрэг коньюгатууд, дараа нь стрептавидин-пероксидаза, дараа нь Ag-биотин коньюгаттай Ag-BIL-Ab-BIL, дараа нь стрептавидин-пероксидаз бүхий дархлааны цогцолборууд илэрдэг.

Урвалыг бий болгох схем.

Үр дүнгийн хэлбэр нь үсний хоёр урттай спектрофотометрийн аргаар хийгддэг: 450/620-680 нм, "давталт дээр" холбох хэрэгслийн тохируулгатай. 450 нм-ийн урт хугацааны хэлбэлзлийн үр дүнгийн зөвшөөрөгдөх дүр төрх.

Шинжилгээний үр дүн зөв, учир нь K-тэй худагт оптик цоорхой (ОД) -ын дундаж утга 0.2-оос ихгүй, K+ - 1.0-ээс багагүй байна. VP шүүмжлэлтэй. томъёоны төлбөр:

VP шүүмжлэлтэй. gp41 = тэнцүү үнэ цэнэ VP K-(gp41)+0.15

VP шүүмжлэлтэй. gp120 = тэнцүү үнэ цэнэ VP K-(gp120)+0.15

VP шүүмжлэлтэй. p24 = тэнцүү. үнэ цэнэ VP K-(R24) +0.15

VP шүүмжлэлтэй. p31 = тэнцүү. үнэ цэнэ VP K-(R31) +0.15

VP шүүмжлэлтэй. gp36 = por_vn. үнэ цэнэ VP K-(gp36)+0.15

VP шүүмжлэлтэй. Ag p24 = povn. үнэ цэнэ VP to-(Ag p24)+0.04

de 0.15 ба 0.04 - виробникийн үндсэн дээр статистик боловсруулалтын аргаар тогтоосон коэффициентууд. Туршилтын системийг боловсруулах явцад дараахь зүйлийг хийх шаардлагатай байв.

1. Эрүүл донороос цусны дээж (n=610).

2. ХДХВ-ийн халдвартай холбоогүй янз бүрийн халдвартай цусны сиропууд (GRH, уушгины хатгалгаа, тонзиллит, герпетик ба цитомегаловирусын халдвар, тэмбүү, хламиди, вируст гепатит А, В, С (n=224)).

3. Төрөл бүрийн халдварт бус өвчнөөр өвчилсөн цусны сироп бүхий өвчтөнүүд - гэмтэл, зүрх судасны тогтолцооны өвчин, хорт хавдар (n=35).

4. Эмэгтэй эмэгтэйчүүдийн цусны дээж (n=40).

5. Цусны шинжилгээ, IFA-д ийлдэс эерэг, иммуноблот батлагдсан (n=428).

6. VIL 1,2 ба антиген p24 эсрэгбиемүүдийг нэг цагийн турш хэрэглэхэд ферментийн дархлааны шинжилгээнд авсан эерэг үр дүнтэй сировокын дээж, иммуноблотын үр дүн нь ач холбогдолгүй (n=123).

7. VIL 1,2 хүртэлх эсрэгбиемүүдийг арилгадаггүй серотипийн дотоод самбарыг ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамнаас ферментийн дархлааны шинжилгээ ба иммуноблотын (n=21) бүртгэлд туршиж үзсэн.

8. ХДХВ 1 ЭСРЭГ СТАНДАРТ, БИО РАД, Франц, муур. No 72217, энэ нь вирусын лизатаас авсан эсрэгтөрөгч юм.

9. Бизнесийн дотоод стандарт. Zrazok, scho солих p 24 эсрэгтөрөгчийн концентраци 200 pg / мл, вирусын лизатыг зайлуулж, титрлэлтийг стандартын дагуу "ХДХВ 1 ЭСРЭГ СТАНДАРТ" компани "BIO RAD", Франц, cat. № 72217.

10. Sirovatok стандарт самбар, хүний ​​дархлал хомсдолын вирус (VIL 1) эхний төрлийн эсрэгбие шалгах scho - VZG 42-28-212-93-02P, "Medico-Biological Union", Новосибирск.

11. Сироватокийн стандарт самбар, өөр төрлийн (VIL 2) хүний ​​дархлал хомсдолын вирусын эсрэгбиеийг турших scho - VZG-42-28-216-02P, "Медико-биологийн холбоо", Новосибирск.

12. Дархлал хомсдолын вирусын эсрэгбиеийн эсрэгбиемүүдийг эхний болон өөр хүнээс өшөө авахгүйн тулд sirovatok-ийн стандарт самбар (VIL 1, 2) - VZG-42-28-214-94-02P, "Medico-Biological Холбоо", Новосибирск.

p24 антигенийг илрүүлэх тестийн системийн мэдрэмтгий байдлын үнэлгээг ХДХВ-ийн I ЭСРЭГ СТАНДАРТ, БИО РАД, Хүлээн авах дотоод стандартын дагуу хийсэн. Ялсан Дотоод стандартад шингэрүүлэгчийн хувьд VIL 1, 2-ийн эсрэгбиемүүдийг удаашруулахгүйн тулд 40 pg / мл-ээс 5 pg / мл-ийн хэмжээтэй 4 дараалсан 2 дахин шингэрүүлэлтийг хэвийн донорын сийвэнгээр бэлтгэсэн. Мэдрэмжийн шалгуур болгон гарч ирсэн эсрэгтөрөгчийн хамгийн бага хэмжээг авсан. 1-р хүснэгтэд үзүүлсэн өгөгдлийг хас.

Өвөрмөц эсрэгбие илрүүлэх тестийн системийн мэдрэмтгий байдлыг үнэлэхийн тулд бид хүний ​​дархлал хомсдолын вирусын эсрэгбиемийг (VIL 1, 2) илрүүлэх туршилтын стандарт хавтанг ашигласан (OSO 42-28-212-93-02P p.012, VZG 42-216 - 02P (VIL 2) p.003).

Хамгийн оновчтой өгөгдлийг 3, 4-р хүснэгтэд үзүүлэв.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" шинжилгээний системийн оношлогооны үр ашгийг "Jenscrin-VIL-Ag/Am" (Bio-Rad), "DIA-HIV" тестийн системүүдтэй харьцуулсан. 1 /2" (Diaprof-Med), "Vironostics VIL Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-VIL1.2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-VIL-1.2 K" (Amercard) , "VIL-1, VIL-2-IFA-Avicenna" (Авиценна). Дотор самбараас сироватокийн аль туршилтыг заасан бүх туршилтуудад эсэргүүцсэн. Хүснэгт 5-д үзүүлсэн үр дүн нь "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1"-ийн оношлогооны өндөр үр дүнтэй болохыг харуулж байна.

Мөн "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" тестийн системийн мэдрэмтгий байдлыг өвчтөнүүдийн цусны ийлдэстэй хамт судалж, дархлаажуулалтаар VIL эерэг болох нь тогтоогдсон. Загал 428 ийм сироватыг эсэргүүцсэн. VIL ба p24 антигенийн янз бүрийн уурагтай эсрэгбие илрүүлэх хэд хэдэн хувилбарт шинжилгээ хийсэн. Үр дүнг 6-р хүснэгтэд үзүүлэв.

Хүснэгт 6 VIL 1 эерэг эмэгтэй (n=428) шинжилгээнд VIL 1 ба p24 эсрэгтөрөгчийн өөр өөр уурагтай эсрэгбие илрүүлсэн үр дүн.
% илрэл	Уургийн профайл
	эсрэг gr41	эсрэг gr120	эсрэг r24	эсрэг r31	p24
51,1%	+	+	+	+	-
35,3%	+	-	+	+	-
4%	+	-	+	-	-
3,3%	+	-	-	+	-
1,4%	+	-	-	+	+
1,2%	+	+	+	+	+
1,2%	+	+	-	+	+
0,9%	+	-	+	+	+
0,7%	+	-	+	-	+
0,5%	+	-	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	-
okremyh уураг буюу Ag p24 нь эсрэгбие% илрүүлэх	100%	53,9%	93,2%	94,4%	6,1%

VIL 1 эерэг тест хийхэд эмэгтэйчүүдийн 3% нь gp36 (env VIL 2)-д эерэг хариу үйлдэл үзүүлсэн байна. УИХ-ын гишүүн/OPcrit 2.0 хэтрүүлэхгүйгээр tsikh zrazkah байна. Бид уран зохиолын өгөгдлөөс VIL 1 (gp41) ба VIL 2 (gp36) цагаан бүрхүүлийн хөндлөн урвалын мэдээллийг авсан.

Үр дүнгийн тайлбар

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + AGr24 VIL 1" стандарт болон дотоод хавтангаас авсан эерэг сировок болон дээжийн VIL-ийн туршилтын дүн шинжилгээ нь энэхүү туршилтын үр дүнг тайлбарлах шалгуурыг өргөжүүлэх боломжийг бидэнд олгоно. Санал болгож буй шалгуурыг 7-р хүснэгтэд үзүүлэв.

Эдгээр шалгуурт үндэслэн IVL эерэг сироворт (n=428) тохиолдсон бүх тохиолдлыг "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL1" эерэг гэж ангилав. Стандарт самбарт VIL 1-ийн эсрэгбиемүүдийг цохих 16 шинж тэмдэг байсан бөгөөд 14 нь эерэг, 2 нь ач холбогдолгүй гэж тэмдэглэгдсэн байна. VIL 2-ын эсрэгбиеийн өшөөг авсан стандарт самбараас 8 шинж тэмдэг эерэг гарсан байна. VIL 1-ийн эсрэгбиеийн өшөөг авсан дотоод самбар дахь 10 цэгээс 7 нь эерэг, 3 нь ач холбогдолгүй гэж үзсэн.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" туршилтын системийн мэдрэмтгий байдлыг мөн өвчтөнүүдийн цусны ийлдэс дээр хийсэн бөгөөд энэ нь эсрэгбиемийг нэгэн зэрэг илрүүлдэг ферментийн дархлааны шинжилгээний системд эерэг үр дүнд хүргэж болзошгүй юм. болон p24 эсрэгтөрөгч, иммуноблот дахь ач холбогдолгүй. Захал 123 ийм эсэргүүцлийг эсэргүүцэв. Мэдээллийг 8-р хүснэгтэд үзүүлэв.

"DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1"-д иммуноблот (n=123) дээр ач холбогдол багатай сироватуудыг туршихад 72 дээж (58.5%) эерэг үр дүн гарсан байна. Үүнээс 26 (21.1%) эмэгтэйд p24 эерэг, 20 (16.3%) нь эсрэгбие, 16 (13%) нь нэг уураг хүртэлх эсрэгбиетэй p24, 10 (8.1%) нь p24-д эсрэгбие илэрсэн байна. хоёр ба түүнээс дээш уураг хүртэл. Ийм байдлаар зөвхөн нэг эсрэгбиемийг (p24 илрүүлэхгүйгээр) туршиж үзэхэд 30 эерэг сорилт (24.4%) эерэг гарах боломжтой болно. Шинжилгээнд p24 антиген илэрсэн нь эерэг 42 нэмэлт шинж тэмдгийг (34.1%) тодорхойлох боломжтой болсон.

Vicoristan bula тестийн системийн өвөрмөц байдлыг үнэлэхийн тулд серотипийн стандарт самбарыг ашигласан бөгөөд ингэснээр эсрэгбие нь VIL 1, 2 (n=20) -ийг устгаагүй; эрүүл доноруудын цусны сиропын дээж (n=610), VIL-тэй холбоогүй янз бүрийн халдварт өвчтэй өвчтөнүүдийн цусны сиропын дээж (n=224); янз бүрийн халдварт бус өвчин - гэмтэл, зүрх судасны тогтолцооны өвчин, онкологи (n=35) бүхий цусны ийлдсийн эмгэгийн тохиолдол; эмэгтэй эмэгтэйчүүдийн цусны дээж (n=40). Усй 929 хүн эсэргүүцлээ илэрхийлжээ. Эрүүл доноруудын цусны сироватаас авсан нэг дээж нь chibno-эерэг үр дүнг харуулсан - gp41 ба p24 хүртэлх эсрэгбие илэрсэн. Эрүүл донорын 7 цусны сироп, VIL-тай холбоогүй халдварт өвчтэй өвчтөний 2 цусны сироп p24 эерэг үр дүнг үзүүлэв.

Туршилтын системийн өвөрмөц байдлыг үнэлэхийн тулд сөрөг тестийн стандарт самбарыг туршсан (ОСО 42-28-214-94-02p, p.009). Өвөрмөц байдал 100% болсон.

Ийм байдлаар урьд нь оношлогдсон хэвийн донорын цусны сироват болон өвчний үед "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" шинжилгээний системийн өвөрмөц байдал 99% болдгийг хийсэн судалгаагаар нотолсон. янз бүрийн халдвар, соматик өвчинтэй.

Авсан өгөгдөл нь "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" өргөтгөсөн туршилтын системийн оношлогооны өндөр үр ашгийг харуулж байна. Туршилтын систем нь эсрэгбие илрүүлдэг тестийн систем эсвэл эсрэгбие ба p24 илрүүлдэг тестийн системээр эерэг скрининг үр дүнг баталгаажуулах замаар сүүлийн 1 ба 2 төрлийн ХДХВ-ийн уураг болон p24 BIL1 эсрэгтөрөгч хүртэлх эсрэгбие илрүүлэх використан байж болно. эсрэгбиеүүд нэг дор. Туршилтын систем нь эерэг үр дүнг баталгаажуулах, түүнчлэн VIL ба p24 эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиеийн динамикийг нэмэгдүүлэхийн тулд иммуноблотын өөр тест болох використан байж болно. өөр өөр үе шатуудхалдварууд.

PEREVAGI ТЕСТ

1. Таблет хэлбэрээр ферментийн дархлааны шинжилгээг баталгаажуулах

2. VIL 1, 2 эсрэгбие ба p24 VIL 1 эсрэгтөрөгчийн спектрийг тодорхойлдог туршилтын баталгаажуулалт.

3. Бүх Ig ангиллын эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх

4. p24 илрүүлэх мэдрэмж 5 pg/ml-ээс бага байна

5. Иммуноблоттой харьцуулахад ач холбогдолгүй үр дүнгийн тооны хурдыг зөвшөөрөх

6. Шинжилгээний цаг - 1 жил 25 мин (имуноблот - 3-аас 20 нас хүртэл)

7. Бүх бүрэлдэхүүн хэсэг, үзэмжийг танилцуулах харааны үнэлгээ.

1. Хүний дархлал хомсдолын вирус (ХДХВ)-ийн эсрэгбиеийн спектрийг тодорхойлох дархлааны ферментийн шинжилгээний систем, эхний болон бусад төрлийн бүлгийн хүмүүс, gp41 (env VIL-1 ба VIL-2 бүлэг O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), VIL 1 эсрэгтөрөгч p24-ийн эсрэгбие, илрүүлэх урвалжууд, хэт их өртсөн тохиолдолд VIL эсрэгтөрөгч ба VIL эсрэгбие нь өөр өөр нүхэнд шингэдэг. ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ хийх хавтан.

2. 1-р зүйлд заасны дагуу ферментийн дархлаа судлалын туршилтын систем бөгөөд энэ нь 96 худагтай використ полистиролыг янз бүрийн хэлбэрээр эсвэл ферментийн дархлааны шинжилгээнд зориулж төрөл бүрийн ялтсуудад сорбцлоход зориулагдсан.

Өнөөдөр SNID-ийн ертөнцөд дэлхийн хамгийн том тэлэлт бол ретровирусын дэд төрөлд хамаарах вирус бөгөөд тэдгээрийг лентивирус буюу илүү "нийтлэг" гэж нэрлэдэг. Үнэхээр хүний ​​биед өмхий 3 цаг орчмын дараа буюу 10 орчим жилийн дараа идэвхжиж эхэлдэг.

Эхний болон бусад хэлбэрийн дархлал хомсдолын тодорхойлогдсон. Гэхдээ та эхний төрлийн вирусын тэлэлтийн талаар зоригтой ярьж болно. Цусандаа ууж, хог дээр ирснээр дархлаа нь нотлогдож байгаа мэт вирус хурдан үржиж эхэлдэг. Танихад ашигладаг CD4 молекул нь хүрч чадахгүй дайсныг таньж мэдсэн л бол бүхэл бүтэн организмд халдвар тараах боломжтой. Эрт оношлогдсон хүмүүсийн хувьд өвчтэй хүмүүст цаг заваа зарцуулж, урт наслах боломж нэмэгддэг.

Хэрэв хүн өөрийгөө SNID-д итгэж чадвал тэр буруу явахгүй. Ийм онош тавих хамгийн түгээмэл үндэс нь цусан дахь дархлал хомсдолын эсрэгбие - уураг илрүүлэх нь вирус байгаагийн хариу үйлдэл гэж үздэг бөгөөд 1.5-6 сарын хугацаанд өмхий үнэр гарч эхэлдэг. халдвар авах боломжтой цаг. Энэ хугацаа дуусахаас өмнө оношлогоонд хамрагдах шаардлагатай.

Эсрэгбиеийн тоог ферментийн дархлааны шинжилгээ (IFA) -ийн нэрийг орхигдуулсан vicoryst шинжилгээгээр тодорхойлно. Аль арга нь найдвартай вэ, дарс нь адилхан нарийвчлалтай, өндөр мэдрэмжтэй, qi үзүүлэлтүүд 99.5% -иас дээш байх ёстой. Эмийн зах зээл нь IFA-ийн оношлогооны хэд хэдэн багц тестийг дэмждэг: CombiBest VIL, Anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL, CombiBest anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL 1 2 d 0172. Туршилтын системийн цитозин хэвээр байх ёстой. гурав дахь үе хүртэл. Тохиромжтой урвалж дутмаг: өмхий үнэр нь эрт үе шатанд үргэлж өвчин тусдаггүй. Тухайн хүн аль хэдийн вирус тээгч болсон, тэр түншүүдийн хувьд аюултай байж магадгүй ч цусанд эсрэгбие байхгүй хэвээр байна.

Үндсэн төхөөрөмжид 12 * 8 эсвэл 192 VIL-ийн эсрэг шинжилгээ хийх хэд хэдэн туршилтыг тохируулна уу. Тэдэнтэй хамт өөрийгөө засахыг зөвлөдөггүй. Хоёр төрлийн SNID-ийн эсрэгбиеийн тоог илрүүлэх - бэлдмэлийн тайлбарт энэ нь нялцайн шинж тэмдэг гэж заасан байдаг. Мөн бүх ангиллын эсрэгбиемүүдийг SNID-д хуваарилна. Хэрэв эсрэгбие байхгүй бол өвчин оношлогддоггүй.

Туршилтын дөрөвний нэг нь "ажиллуулах", цөцгий эсрэгбие, тэдгээр нь SNID-ийн эсрэгтөрөгч, барилгын өмхий үнэр нь халдварыг эрт илрүүлж, гурав дахь үеийн халдварыг бууруулдаг. Тэнцвэржүүлэхийн тулд: цусан дахь антиген ВІL є, аль хэдийн 5-р добиноос эхэлж, эхний эсрэгбие нь эрт биш, сарын дараа багасдаг. CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (1-р багц) болон CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (2-р багц) 4-р үеийн өмнө турших ёстой. Эдгээр урвалжуудын багцыг хурдасгасны дараа 1, 2-р хэлбэрийн эсрэгбие - p24 антигенийг илрүүлж, ийлдэс эсвэл хүний ​​цусны сийвэнд хүрдэг. Bagato улс zastosovuyt IFA өөрийгөө тест 4 үе, жишээ нь, би үүнийг Antigen / Antibody, товчилсон гэж нэрлэдэг - AGATE.

Туршилтыг нэргүй байдлаар хийдэг.

ВІL-іnfektsіyu нь хэд хэдэн аргууд, өвөрмөц урьдчилан сэргийлэлт, эмчилгээний үр дүн хангалтгүй байдаг тул хяналтгүй өвчин гэж ангилдаг. VIL-халдвартай холбоотой эпидемиологийн нөхцөл байдлыг хянахын тулд скрининг оношлогооны хяналтанд ялах нь чухал юм. VIL-халдварыг оношлох дунд аргын тоо нь таргалалттай өвчтөнүүдийн өвчний ийлдэс судлалын маркеруудыг илрүүлэх боломжийг олгодог ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (IFA) юм.

Цомомовы дээр Возной Антитил-ийн үр дүнг VIL, Сироватци цус 40 823 Осіб, Патзиинти зөвлөхүүд, Поликлинік, Ликарин Миста, мөн ижил төв төвд танилцуулсан бөгөөд тэдгээрийг хөхүүл (хар тамхичид. вируст гепатит B, Эдгээр бэлгийн замын өвчинтэй). 2005 онд Эх барих, эмэгтэйчүүдийн үндэсний эрдэм шинжилгээний хүрээлэнгийн дархлаа судлалын лабораторид хяналтын үзлэг хийсэн. ӨМНӨ. Отта RAMS Халдварт өвчин.

Цусны серозын ийлдэсийг анхан шатны оёдлын хувьд "Comb_Best anti-VIL-1+2" (ZAT "Vektor-Best, Новосибирск)" тестийн системийг шалгасан. - 2 (A, G, M ангиллын иммуноглобулин) . Энэхүү оношилгооны багцад рекомбинант VIL уургуудыг шахмалуудын нүхэнд хөдөлгөөнгүй болгох, мөн пероксидазын хронтой коньюгат тохиолдолд хоёуланг нь оруулна. Сировокийн шинжилгээний үр дүнгийн үнэлгээг туршилтын системийн зааврын зөвлөмжийн дагуу хийсэн: сөрөг (VIL-1 ба VIL-2-ийн эсрэгбие байхгүй) туршилтын дээж, оптик хүч (OD) гэж тооцогддог. үүнээс IFA дахь OPcrit-ийн утгаас хэтрээгүй.

40823 сам хорхойноос 40222 (98.5%)-ийг лабораторид шинжлүүлэхэд ELISA-ийн сөрөг үр дүн гарч, хяналтын дээжийн 601 (1.5%) нь эерэг гэж үнэлэгдсэн. Дараагийн өдрийн үр дүнд давхардсан тоогоор 601 ширхгийн арьсанд (шахмалны хоёр худаг) давтан шинжилгээ хийхэд 440 (73.2%) нь эерэг, 161 (26.8%) нь сөрөг гэж үнэлэгдсэн. Эрүүл мэнд, нийгмийн хөгжлийн яамны зөвлөмжийн дагуу скрининг эерэг гарсан 440 сиропыг хөлдөөж, нэмэлт дэмжлэг үзүүлэх зорилгоор Анагаах ухааны 30 им-ын лавлагаа лабораторийн зөвлөгөө, оношилгооны өрөөнд шилжүүлэв. С.П. Боткина. "EKOlab-Vironostics VIL 1.2 Ag/At" ("EKOlab", Электрогорск), "Genscreen Plus" янз бүрийн ELISA туршилтын системүүд дээр хэд хэдэн судалгаа явуулсан. ХДХВ Ag-Ab” (“BioRad”, АНУ), мөн иммуноблотын иж бүрдэл. Баталгаажуулах шинжилгээнд хамрагдсан 440 эхийн шинжилгээний хариу вирүс ургах боломжтой, 323 (73,4%)-д эерэг, 102 (23,2%)-д сөрөг гарчээ. Хяналтын 15 дээжинд (3.4%) ач холбогдолгүй шинжилгээний үр дүнг устгасан.

Манай лабораторид CombiBest-ийн эсрэг VIL-1+2 тестийн системийн туршилтын эхний туршилтын явцад авсан EP-ийн утга 323 эерэг эмэгтэйн 314 (97.2%) нь 0.900-аас 1.780 болж байгааг дараах байдлаар харуулж байна. 9 (2.8%) srazkіv - 0.500-0.900. 102 сөрөг серотипийн скринингээс авсан OD-ийн утгыг 52 өвчтөнд (51%) 0.195-аас 0.400 хүртэлх зайд туршиж үзсэн; 40 (39.2%) дээжийн хувьд - 0401-0800; 10 (9.8%) арилгасан - 0.800 гаруй.

Ийнхүү хийж гүйцэтгэсэн ажлын үр дүнд "Comb_Best anti-VIL-1 + 2" тестийн системийн шинжилгээгээр VIL-халдварт ийлдэс судлалын маркер илэрсэн цусны сироватын анхны септицеми илэрсэн байна. өндөр үр дүнтэй байдаг. Скрининг эерэг үр дүн нь лавлагаа лабораторид хийсэн нэмэлт хяналтын судалгаагаар 73% -д нь батлагдсан бөгөөд шинжилгээнд хамрагдсан 40,823 өвчтөний 0.25% хүрэхгүй тохиолдолд эерэг үр дүн бүртгэгдсэн байна.

Тодорхойлолт

Бэлтгэл

Заалт

Үр дүнгийн тайлбар

Тодорхойлолт

Томилох арга Ферментийн дархлааны шинжилгээ (IFA).

Хяналтын материалЦусны ийлдэс

Гэртээ хүрэх боломжтой

VIL 1 ба 2-р төрлийн эсрэгбие болон антиген p24 VIL-ийн хосолсон илрүүлэлт, шинжилгээ.

Хүндэтгэл. Эерэг болон хуримтлагдсан хариу үйлдэл хийснээр үр дүнг харуулсан нэр томъёог ажлын 10 хоног хүртэл нэмэгдүүлэх боломжтой. SNID (Buffaled Immunodeficiency Syndrome) -д хүргэдэг BIL (Хүний дархлал хомсдолын вирус) нь ретровирусын гэр бүлд хамаардаг. Энэ нь гетеросексуал болон гомосексуал аль алиных нь бэлгийн хавьталд орох үед, судсаар мансууруулах бодис тарих эсвэл эмчилгээний процедурын үед толгойн булингартай хүнээс хүнд халдварладаг. Вирусын халдвар нь халдвартай цус, бүтээгдэхүүнээр сэлбэх, эх нутгаас нь эрхтнийг хандивлах, эмнэлгийн эмч нар - халдвартай зүү, багаж хэрэгслээр гэмтсэн үед тохиолдож болно. VL-ийн халдвар нь халдвартай эхээс хүүхдэд дамжих замаар (босоо замаар) дамжих боломжтой боловч архаг вирусын эсрэг эмчилгээнээс урьдчилан сэргийлэх орчин үеийн аргууд нь бүх зөвлөмжийн дагуу ийм эрсдлийг хамгийн бага хэмжээнд хүртэл бууруулж чадна.

Вирус ба клитин хоорондын харилцан үйлчлэлийн үйл явц нь хэд хэдэн үе шатыг агуулдаг: вирус ба клитин хоорондын холбоо, түүний нөмрөг үүсэх, цитоплазм руу нэвтрэх, вирусын РНХ-ээс ДНХ-ийн нийлэгжилт, вирусын ДНХ-ийг эзэн геномд нэвтрүүлэх. Хэрэв тийм бол халдварын далд үе шат эхэлдэг. Ийм нөхцөлд провирусын ДНХ нь идэвхгүй, эзний амьдралд саад учруулахгүйгээр нэг цагийн турш үргэлжилж болно. Вирусын уургийн илэрхийлэл байхгүй ч вирусын эсрэг дархлааны хариу урвал байхгүй. Организмын дархлааны системийг тодорхойлдог VIL-ийн эсрэгбие нь вирусын ДНХ болон вирусын идэвхтэй нөхөн үржихүйн коб идэвхжсэний дараа гарч ирдэг. Бага хүчин зүйл, түүний дотор организмын бие даасан генетик шинж чанараас шалтгаалан далд хугацааны гурвалсан байдал буурдаг.

VIL-ийн эсрэгбиемүүдийг халдварын дараа өөр өдрөөс эхлэн буруутгаж болно; їх vmіst zbіlshuєtsya 2-4 хоног сунах ба zberіgaєtsya баян rokіv сунах. Халдварын 90-95% -д нь халдварын дараах эхний гурван сард, 5-9% -д - 3-6 сарын хугацаанд, 0.5-1% -д нь амьдралынхаа туршид үнэр гарч ирдэг.

Халдварын эхний үе шатанд вирусын эсрэгбие гарч ирэхээс өмнө (тэр үед сероконверт үүсэхээс өмнө) цусны сийвэнгийн сийвэнгийн дээжинд VIL, zocrema iogo капсид уураг p24-ийн эсрэгтөрөгч байгааг илрүүлж болно. Хожим нь, сероконверсийн дараа VIN нь илрэхгүй болдог.

ХДХВ-ийн Ag/Ab Combo тестийг (Архитектор, Эбботт) ашиглах боломжтой 4-р үеийн тестийн системийн хослолууд нь VIL 1 ба 2 төрлийн эсрэгбие, түүнчлэн P24 VIL эсрэгтөрөгчийг илрүүлдэг бөгөөд энэ нь эрт илрүүлэх боломжийг олгодог. халдварын. INVITRO лабораторид хийгддэг скрининг шинжилгээний онцлог шинж чанаруудаас өмнө VIL-халдварыг илрүүлэхийн тулд varto, амжилттай өндөр өвөрмөц (> 99.5%); Шинжилгээнд 100% мэдрэмтгий байдал нь ийлдэс хувиргах үеийн шинж чанар бүхий эсрэгбие, р24 эсрэгтөрөгчийн тестийн мэдрэмж нь 18 pg / мл-тэй ойролцоо байна.

ОХУ-ын Эрүүл мэндийн яамны тушаалаар VIL суворогийн лабораторийн шинжилгээг хийх журам нь дархлааны ферментийн (IFA) аргаар VIL-ийн эсрэгбие байгаа эсэхийг шалгах (баталгаажуулах) үе шатыг агуулдаг. туршиж, баталгаажуулалтын үе шат (сурталчилгаа) илүү. Хамгийн богино хугацааны скрининг IFA-систем нь 100% өвөрмөц байдлыг баталгаажуулдаггүй тул өвчтөний цусны ийлдсийн шинж чанартай холбоотой өвөрмөц бус, хибно-эерэг үр дүн гарах боломжтой гэдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй. Тиймээс ELISA-ийн эерэг скринингийн үр дүнг баталгаажуулах туршилтаар баталгаажуулахгүй байж болох бөгөөд үүний дараа өвчтөнд сөрөг ач холбогдолгүй үр дүнг харуулна. Хяналтын үр дүнг заагаагүй бол туршилтыг 2-3 хоногийн дараа динамикаар давтан хийнэ.

ХДХВ-ийн халдвартай эхчүүд, хүүхдүүдийн ХДХВ-ийн халдварын лабораторийн оношлогоо нь өөрийн гэсэн онцлогтой байж болно. VIL (IgG анги) хүртэлх эхийн эсрэгбие нь 18 сар хүртэл цусанд эргэлдэж болно. Шинээр төрсөн хүүхдэд VIL-ийн эсрэгбие байгаа нь вирус нь ихэсийн саадыг нэвтрээгүй гэсэн үг биш юм. VIL-ийн халдвартай эхийн хүүхдүүд төрснөөс хойш 36 сарын турш лаборатори-оношлогооны бөглөрөлд ордог.

Бэлтгэл

Тусгай сургалт шаардлагагүй. Өдрийн үлдсэн цагаас хойш 4 жилийн өмнө цусны дээж авахыг зөвлөж байна. Та эцсийн хугацаанд бэлтгэх хамгийн чухал зөвлөмжүүдтэй танилцаж болно. VIL-ийн эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиемийг илрүүлэхийн тулд урьдчилан биш, магадгүй халдварын дараа дор хаяж хоёр удаа, гурав ба зургаан удаа сөрөг үр дүн гарсны дараа давтан хийнэ. TOV "INVITRO"-д оршин суух хүсэлтийг бүртгэх нь паспорт эсвэл сольж болох баримт бичгийн ард явагддаг (шилжилтийн карт, оршин суугаа газрын цагийн бүртгэл, цэргийн албанд зориулах, паспорт олгохдоо эцэслэн батлах). паспорт, бүртгэгч). Баримт бичгийг obov'yazkovo танилцуулах нь цаг хугацаа, ОХУ-ын бүртгэлийн дараах болон гэрэл зургийн тухай хууль бус, мэдээлэл буруутай. Паспорт (түүнийг орлуулсан баримт бичиг) хүчинтэй байхын тулд өвчтөн биоматериал хүргэх нэргүй өргөдөл гаргах эрхтэй. Нэргүй obstezhennі тохиолдолд үйлчлүүлэгч татгалзсан өргөдөл, биоматериал нь зөвхөн өвчтөнд зориулсан дугаарыг оноож байна гэж, эмнэлгийн ажилтнууд, өргөдөл гаргаж байна. ! Нэрээ нууцалсан мөрдөн байцаалтын үр дүнг эмнэлэгт хэвтүүлэх боломжгүй, мэргэжлийн хяналтанд ORUIB-д бүртгүүлэх шаардлагагүй.

Хэргээ хүлээхээс өмнө үзүүл

• Збілшення тунгалагийн зангилаануудхоёр бүс гаруй.
• Лимфопени бүхий лейкопени.
• Шөнө архи ууна.
• Үндэслэлгүй шалтгаанаар огцом туранхай.
• Гурав хоногоос дээш суулгалт, тодорхой шалтгаан байхгүй.
• Тодорхойгүй шалтгаантай халууралт.
• Үтрээний төлөвлөлт
• Хагалгааны өмнөх бэлтгэл, эмнэлэгт хэвтэх.
• Довтолгооны халдвар эсвэл түүнээс хойшхи шинж тэмдэг: сүрьеэ, илэрхий токсоплазмоз, ихэвчлэн дахилттай герпес вирусын халдвар, дотоод эрхтний кандидоз, давтагдах герпес мэдрэлийн мэдрэлийн үрэвсэл, викликана микоплазма, пневмоцистис эсвэл пневмонелла.
• Залуу эр дэх Капошигийн саркома.
• Vipadkovi stateevі холбоо барих.

Үр дүнгийн тайлбар

Үр дүнгийн тайлбар нь оношийг биш харин эмчийн мэдээллийг өгөх явдал юм. Энэ хэсгийн мэдээллийг өөрийгөө оношлох, өөрийгөө таних зорилгоор ашиглах боломжгүй. Анамнез, бусад obstezheniya үр дүн: үнэн зөв оношийг энэ obstezhennia үр дүнд эмч, vikoristovuyuchi хийх ёстой бөгөөд би бусад судлуудын мэдээлэл хэрэгтэй болно.

INVITRO бие даасан лабораторид хувь хүмүүс нас баржээ: туршилтын yakіsny. Үр дүнг танилцуулах хэлбэр: VIL 1 ба 2-ийн эсрэгбие, p24 эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг "сөрөг" гэж үздэг. Скринингийн ферментийн иммуноссайд VIL эсвэл эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие илэрсэн тохиолдолд sirowort-ийн дээжийг SNID-ийн Москвагийн төвд иммуноблотын аргаар нэмэлт баталгаажуулахын тулд залруулж, эерэг ба ач холбогдолгүй үр дүнг баталгаажуулдаг.

Эерэг үр дүн:

1. ХДХВ-ийн халдвар;
2. давтан эсвэл нэмэлт үр дүнд хүргэдэг hibnopositive үр дүн *);
3. 18 сараас доош насны хүүхдүүд, VIL-ийн халдвартай эхчүүдийн хүүхдүүдийн дунд судалгаа нь мэдээлэлгүй байсан.

*Антитилийг VIL 1 ба 2, эсрэгтөрөгчийн VIL 1 ба 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott)-ийн скрининг шинжилгээний системийн өвөрмөц байдал нь урвалжуудын өгсөн үнэлгээгээр дэлхийн хүн амын дунд 99.6% дөхөж байна. болон болзошгүй хөндлөнгийн оролцоотой бүлгийн өвчтөнүүдэд (HBV, HCV, Rubella, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. ба доторх халдварууд, аутоиммун эмгэгүүд (ревматоид артрит, антинуклеар зэрэг) эсрэгбие), IgG, IgM-ийн шилжилт, моноклональ гаммопати, гемодиализ, олон цус сэлбэх).

VIL-іnfektsії-ийг цаг тухайд нь оношлох нь маш чухал арга болж хувирдаг бөгөөд үүнээс өмнө өргөмжлөлийн коб нь өвчний цаашдын хөгжлийг томруулж, өвчтэй хүний ​​​​амьдралыг үргэлжлүүлэхийн тулд баялаг байж болно. Үлдсэн жилүүдэд Галусийн аймшигт өвчний илрэлээр вагоми дэвшилт ажиглагдаж байна: хуучин туршилтын системүүд төгс системүүдээр солигдож, агааржуулалтын аргууд илүү хүртээмжтэй болж, нарийвчлал нь мэдэгдэхүйц сайжирсан.

Энэ нийтлэлд VIL-ийн халдварыг оношлох өнөөгийн аргуудын талаар мэддэг бөгөөд энэ асуудлыг цаг тухайд нь баярлуулах, өвчтэй хүмүүсийн хэвийн амьдралыг сайжруулахын тулд язгууртнууд yakі korisno.

VIL оношлогооны аргууд

Орос улсад VIL-халдварыг оношлохын тулд хоёр тэнцүү аргыг багтаасан стандарт процедурыг явуулдаг.

• IFA тестийн систем (скрининг шинжилгээ);
• иммуноблот (IB).

Түүнчлэн оношлогоонд бусад аргыг ашиглаж болно.

• экспресс тест.

IFA туршилтын системүүд

VIL-халдварыг илрүүлэх оношилгооны эхний үе шатанд скрининг тест (IFA) тогтоогдсон бөгөөд энэ нь лабораторид VIL уургийг бий болгох үндэс суурь болох бөгөөд халдвар авсан тохиолдолд бие махбодид чичиргээ үүсгэдэг өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг барьж авдаг. . Туршилтын системийн урвалжууд (ферментүүд) -тэй харилцан үйлчилсний дараа индикаторын бохирдол өөрчлөгддөг. Өнгөний өөрчлөлтийг харгалзан тэдгээрийг тусгай төхөөрөмж дээр боловсруулдаг бөгөөд ингэснээр сонгосон шинжилгээний үр дүнг тодорхойлно.

Тиймээс IFA-тест нь VIL-халдварыг нэвтрүүлснээс хойш хэдхэн хоногийн дараа үр дүнг харуулж чадна. Энэ шинжилгээ нь вирус байгаа эсэхийг харуулдаггүй, гэхдээ шинэ зүйлд эсрэгбие үүсэхийг харуулдаг. Зарим тохиолдолд хүний ​​биед VIL-ийн эсрэгбие нь халдварын талбарт 2 хоногийн дараа үүсдэг боловч ихэнх хүмүүст 3-6 хоногийн дараа өмхий үнэр үүсдэг.

Янз бүрийн мэдрэмжийн IFA-туршилтын үеийн Іsnuє chotiri. Дэлхийн бусад орнуудад нийлэг пептид эсвэл рекомбинант уургийн үндсэн дээр бүтээгдсэн бөгөөд илүү өвөрмөц, нарийвчлалтай байж болох тул III ба IV үеийн туршилтын системүүд ихэвчлэн хөгждөг. Тэд VIL-халдварыг оношлох, VIL-ийн тархалтыг хянах, донорын цусыг дахин шалгах явцад өвчтөний аюулгүй байдлыг хянах замаар ялалт байгуулж чадна. III ба IV үеийн IFA-туршилтын системийн нарийвчлал нь 93-99% (Баруун Европын орнуудад үйлдвэрлэсэн илүү мэдрэмтгий туршилтууд - 99%) байна.

IFA тестийн хувьд өвчтөний венээс 5 мл цус авдаг. Үлдсэн хүлээн авалт, дүн шинжилгээ хийх хооронд дор хаяж 8 жил шаардагдана (дүрмээр бол та ирээдүйд ялах болно). Ийм шинжилгээг халдвар дамжсанаас хойш 3 хоногийн өмнө хийхийг зөвлөж байна (жишээлбэл, шинэ хууль ёсны түнштэй хамгаалалтгүй хуулийн дараа).

IFA тестийн үр дүнг 2-10 хоногийн дотор авна.

• сөрөг үр дүн: fahivtsya хүргэж чадахгүй байна халдвар VIL байгааг харуулж байна;
• сөрөг үр дүн: та болгоомжилж болно эрт нэр томъёохалдвар (3 хүртэл хоног), SNID-ийн хожуу үе шатанд амьсгал давчдах, цусыг буруу бэлтгэсэн тохиолдолд;
• hibnopositive үр дүн: энэ нь зарим өвчний үед, цусыг буруу бэлтгэсэн тохиолдолд аюултай байж болно;
• эерэг үр дүн: халдварын шинж тэмдэг VIL халдвар, IB хийх, өвчтөнийг SNID төвд мэргэжилтэн рүү шилжүүлэхийн тулд.

IFA тест яагаад эерэг үр дүнг өгч чадах вэ?

VIL-ийн IFA сорилын буруу үр дүн нь цусны дээжийг буруу авсан эсвэл ийм нөхцөл, өвчтэй өвчтөнүүдээс үүдэлтэй байж болно.

• олон миелома;
• Эпштейн Барр вирусээр өдөөгдсөн халдварт өвчин;
• баазын дараа;
• аутоиммун өвчин;
• үтрээний арын дэвсгэр дээр;
• вакцинжуулалтын дараах бааз.

Дээр дурдсан шалтгааны улмаас цус нь өвөрмөц бус хөндлөн реактив эсрэгбиетэй байж болох бөгөөд тэдгээрийн үүсэх нь VIL-ийн халдвараар өдөөгддөггүй.

Үлдсэн жилүүдэд илүү мэдрэмтгий пептид ба рекомбинант уургийн (өмхий үнэрийг генетикийн инженерчлэлээр нийлэгжүүлдэг) үр дүнд III ба IV үеийн тестийн системүүд хэт их ачаалалтай байгаагаас үүдэн хибноэерэг үр дүнгийн давтамж буурчээ. in vitro). Ийм ELISA тестийг эхлүүлсний дараа худал үр дүнгийн давтамж мэдэгдэхүйц буурч, 0.02-0.5% дөхсөн.

Чибнопозитив үр дүнгийн илрэл нь тухайн хүн VIL-ийн халдвар авсан гэсэн үг биш юм. Ийм тохиолдолд ДЭМБ дахин нэг ЭЛИЗА шинжилгээ хийхийг зөвлөж байна (4-р үеийн obov'yazkovo).

Өвчтөний цусыг лавлагаа эсвэл арбитрын лабораторид "давтах" тэмдгээр илгээж, IV үеийн IFA шинжилгээний систем дээр үргэлжлүүлнэ. Хэрэв шинэ шинжилгээний үр дүн сөрөг байвал эхний үр дүнг өршөөл (chibnopositive) гэж хүлээн зөвшөөрч, IB хийгдэхгүй. Өөр нэг шинжилгээний эхний цагийн үр дүнгийн эерэг тоогоор sumnіvnym нь өвчтэй хүн VIL-іnfikuvannya-ийн хэрэгцээг батлахын тулд IX-ийг 4-6 хоногийн дотор явуулахаар томилогддог.

Дархлааны толбо

HIL-ийн халдварын үлдэгдэл оношийг зөвхөн эерэг дархлааны үр дүн (IX) гарсны дараа тогтоож болно. Иогийн хувьд вирусын уураг түрхэж байгаа тул нитроцеллюлозын хольцыг хэрэглэдэг.

IB-ийн цусны дээжийг судаснаас авдаг. Цаашилбал, її syrovatsі-д байрладаг тусгай боловсруулалт, уураг өгдөг бөгөөд тэдгээрийг цэнэг, молекулын массын хувьд тусгай гель дээр түрхдэг (цахилгаан талбайн урсгалын дор тусгай төхөөрөмж дээр залруулга хийдэг). Цусны ийлдэсээс гель дээр нитроцеллюлозын гель түрхэж, тусгай камерт толбо ("блотинг") хийдэг. Хуурамч бодисыг боловсруулж, тэр ч байтугай материалд VIL-ийн эсрэгбиемүүд байдаг, дараа нь өмхий нь IB дээр эсрэгтөрөгчийн ялгадастай холбоотой бөгөөд харагдахуйц шугамаар гарч ирдэг.

IB нь эерэг арга гэж тооцогддог:

• Америкийн CDC шалгуурын дагуу - эрэгтэй, хоёр буюу гурван мөрөнд gp41, p24, gp120/gp160;
• Америкийн FDA-ийн шалгуурын дагуу - эрэгтэйчүүдэд - хоёр мөр p24, p31 ба мөр gp41 эсвэл gp120 / gp160.

Өвчтөнүүдийн 99.9% -д IX-ийн эерэг үр дүн нь VIL-халдварыг илтгэнэ.

Шугамын харагдах байдлын хувьд - IB сөрөг.

z gp160, gp120, gp41 мөрүүдийг илрүүлэх үед IB эргэлзээтэй байна. Энэ үр дүнг дараах байдлаар харж болно.

• онкологийн өвчин;
• хоосон байдал;
• хэсэгчилсэн цус сэлбэх.

Үүний зэрэгцээ бусад компаниудыг нэмэлт ажилд авахыг зөвлөж байна. Гэсэн хэдий ч нэмэлт IB хийсний дараа үр дүн нь эргэлзээтэй болж, цусыг сунгахаас сэргийлэх шаардлагатай (IB нь арьсны 3 сарын дараа хийгддэг).

Полимераз Ланзуг урвал

ПГУ-ын шинжилгээ нь вирусын РНХ-г илтгэж болно. Ариун сүмд хүрч, халдварын дараа 10 хоногийн дараа VIL-ийн халдварыг харуулах боломжийг олгодог його мэдрэмж. Зарим тохиолдолд PLR нь чибноэерэг үр дүнг өгдөг тул өндөр мэдрэмж нь бусад халдварын эсрэгбиемүүдэд хариу үйлдэл үзүүлдэг.

Оношилгооны аргыг өгдөг бөгөөд энэ нь үнэтэй бөгөөд тусгай тоног төхөөрөмж, мэргэжилтнүүдийн өндөр ур чадвар шаардагдана. Ци шалтгаанаар хүн амын массын туршилтаар її хийхийг хориглоно.

Ийм нөхцөлд PLR zastosovuetsya:

• шинэ төрсөн нярайд VIL-ийн илрэлийн хувьд, учир нь тэд VIL-ийн халдвартай эхчүүдэд төрсөн;
• "зууны үед" эсвэл sumnivny IB-д VIL-ийн илрэлийн хувьд;
• цусан дахь VIL-ийн концентрацийг хянах;
• донорын цусыг хянах зорилгоор

Зөвхөн PLR тестийн дараа VIL-ийн оношийг тавьдаггүй боловч хүнд хэцүү нөхцөл байдлыг арилгах нэмэлт оношлогооны арга болгон явуулдаг.

Экспресс арга

VIL-ийн оношлогоонд гарсан шинэлэг зүйлүүдийн нэг бол экспресс тестүүд байсан бөгөөд үр дүнг нь 10-15 минутын турш аль хэдийн тооцоолж болно. Хамгийн үр дүнтэй, үнэн зөв үр дүн нь хялгасан судасны урсгалын зарчмууд дээр суурилсан нэмэлт иммунохроматографийн шинжилгээнээс гардаг. өмхий үнэр нь тусгай оосор, цусыг сарлаг, эсвэл бусад doslidzhuvani rodin (slina, slash) дээр хэрэглэдэг. VIL-ийн эсрэгбие байгаа эсэхийг шалгахын тулд 10-15 ширхэг сорил хийсний дараа өнгөт хянагч эмэгтэй илэрсэн - эерэг үр дүн. Хэрэв үр дүн нь сөрөг байвал хяналтын эхнэр байхгүй болно.

IFA тестийн дараа болон дараа нь экспресс тестийн үр дүнг IB шинжилгээгээр баталгаажуулдаг. Зөвхөн дараа нь VIL-халдварыг оношлох боломжтой.

Гэрийн шинжилгээнд зориулж экспресс хэрэгслийг ашиглана уу. OraSure Technologies1 (АНУ)-ын FDA-аас зөвшөөрөгдсөн тестийг жоргүйгээр авах боломжтой бөгөөд ХДХВ-ийг илрүүлэхэд ашиглаж болно. Шинжилгээний дараа эерэг үр дүн гарсан тохиолдолд оношийг баталгаажуулахын тулд өвчтэй хүнийг тусгай төвд obstezhennia хийлгэхийг зөвлөж байна.

Гэрийн вискиний бусад туршилтыг FDA хараахан батлаагүй байгаа бөгөөд үр дүн нь бүр ч эргэлзээтэй байж магадгүй юм.

Туршилтын нарийвчлалыг илэрхийлсэн хүмүүсээс үл хамааран IV үеийн IFA шинжилгээнд зориулж өмхий үнэрийг хүн амын нэмэлт шинжилгээнд өргөн ашигладаг.

VIL-іnfektsії-ийн илрэлийн шинжилгээг ямар ч поликлиник, CRL эсвэл тусгай SNID төвүүдэд хийх боломжтой. ОХУ-ын нутаг дэвсгэр дээр өмхий үнэрийг бүрэн нууцлалтайгаар эсвэл нэрээ нууцалсан байдлаар явуулдаг. Арьсны өвчтөнд шинжилгээ хийх өдрийг хүртэл эмнэлгийн болон сэтгэл зүйн зөвлөгөө авах боломжтой. VIL тестийн төлбөрийг арилжааны ипотекийн зээлээр авах магадлал бага байдаг бөгөөд төрийн өмчит эмнэлэг, эмийн сангаас өмхий үнэр нь үнэ төлбөргүй байдаг.

VIL-іnfektsієyu халдвар авч болох эдгээр аргуудын талаар мөн халдвар авах магадлалын тухай домог мэт мэддэг, эндээс уншина уу.