IFA diagnostika: kāda ir antivielu noteikšanas būtība, kā to veikt un ar kādām slimībām tā ir efektīva? Aktuālās diagnostikas metodes VIL-infekcijai Anti VIL 1 2 sho.

Vlasniki patents RU 2283497:

Vinahīds tiek nogādāts biotehnoloģijas un medicīnas galerijā. ІMUNUFERMENTIA TEST SISTĒMA ETENTIFIFIKATSI SPEKTRUE OF ANTITIL LAI Vіруса імурудефіцитий илюни (віл) іман товой товиватель, Finger tipa Grup par šo vērpjot antigēnu Viruus IMUDEF_CITE LOOGE TIPA PRIP R24 Iekļaut ІMUNOSORBENT PRET batte PAR ANTIGENIV Vіруса імурудефіците илюни O), gp120 (ENV) , p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env ВІL-2), antivielas pret ВІL 1 p24 antigēnu un noteikšanas reaģentus, šajā gadījumā antigēni ВІL un antivielas ВІL tika sorbēti dažādās tablešu iedobēs ar enzīmu saistītām tabletēm. imūnsorbcijas tests, un vikorista sorbcijai tiek izmantotas 96 iedobju polistirola asorti vai neassorti plāksnes. Vinahid nodrošina jūtīguma, piedošanas veicināšanu, rezultātu vērtēšanas subjektivitātes iekļaušanu. 1 z.p. f-li, 10 tab., 1 il.

Vinahīds tiek nogādāts biotehnoloģijas un medicīnas galerijā. Vykoristannya: visu klašu specifisko antivielu pret proteīniem izpausmju diferenciācija pret cilvēka imūndeficīta vīrusu 1 un 2, VIL 1 grupa Pro un antigēnu p24 VIL 1.

Aktualitāte: ar enzīmu saistītā imūnsorbcijas testa testēšana 1. un 2. antivielu spektra identificēšanai, VIL 1 grupa Pro, antigēna p24 VIL 1 noteikšana un pozitīvo vai neskaidro VIL 1 un 2, VIL 2 antivielu skrīninga rezultātu apstiprināšana grupas antigēns.

VINAHOD APRAKSTS

IVL-infekcijas laboratoriskā diagnostika balstās uz trim direktīvām: a) VIL un tā sastāvdaļu indikācija; b) antivielu noteikšana pret VIL; c) būtiskas izmaiņas imūnsistēmā. Sered pamata metodes laboratoriskā diagnostika ir visizplatītākā seroloģiskā - antivielu noteikšana pret vīrusa antigēniem.

Antivielu noteikšanai VIL infekcijā galvenokārt izmanto vikrostāzes enzīmu imūntestu (IFA) un imūnblotēšanu (IX). IFA pamatā ir vīrusu antigēnu imobilizācija uz plāksnēm, ar kurām ir saistītas slimības antivielas, un antigēnu-antivielu kompleksu izmanto peles monoklonālo antivielu papildu konjugācijai pret cilvēka imūnglobulīniem G un M ar peroksidāzi. Metode specifisku un jutīgu ievadīšanai un ļauj noteikt vīrusam specifiskas antivielas 95% pacientu. Turklāt 5% kritumu iekrīt infekcijas agrīnās stadijās, ja asinīs ir maz antivielu, vai slimības beigu fāzē, ja organisms vairs nespēj sintezēt antivielas, strauji izsīkstot. imūnsistēma. Jūs varat arī Hibnopozitīvi rezultāti IFA, tas ir svarīgi pacientiem ar autoimūnām slimībām un onkoloģiskām slimībām, kā arī Eshptein-Barr vīrusa izraisītas infekcijas gadījumos. Šajā gadījumā rodas antivielu krusteniskā reakcija pret reimatoīdo faktoru, Epšteina-Barra vīrusu vai antigēnu determinantiem, kas līdzīgi 1. un 2. histosumness klases galvas kompleksa olbaltumvielām (HLA-4 un DQW3) un saistīšanās ar BIL antigēniem. Hibnopozitīvi rezultāti bieži tiek novēroti grūtniecēm un cilvēkiem vājā vecumā. Neprecīzu rezultātu cēlonis var būt arī hemolīze, lipēmija, siroworts baktēriju piesārņojums.

Saistībā ar cym ir ierosinātas vairākas metodes, lai pārbaudītu antivielu noteikšanas rezultātu specifiku. Trīs no šīm metodēm, visticamāk, izraisīs "imūnblotēšanas" reakciju "Western Blot" modifikācijā. Metodes būtība ir aizskarošā: pirmajā posmā ir jāpārbauda BILKIV VIL pamatnes molekulmasa papildu elektroforēzei poliakrilamīda gēlā. Pēc tam notiek elektroforētiskā pārnešana no poliakrilamīda gēla uz nitrocelulozes membrānas virsmu. Antigēnu pārnesi šādā veidā membrāna atklāj ar papildu netiešo analīzi: membrānu inkubē ar šādu materiālu; antivielas, kas izplūst, saistās ar VIL antigēniem, kas pārnesti uz nitrocelulozes membrānu, un pēc tam inkubējas ar konjugātu; kad ir izveidots antigēna-antivielu komplekss, konjugātu pievieno jaunajam, pēc konjugāta ievadīšanas un inkubācijas ar substrātu tiek atbrīvota šo nitrocelulozes šūnu klātbūtne, un antigēna-antivielu-konjugāta komplekss tiek izšķīdināts. Uz krēsla tika parādīti pozitīvie, vāji pozitīvie un negatīvie imūnblota rezultāti.

Antivielas pret progresējošiem proteīniem (p) un glikoproteīniem (gp) tiek noteiktas HIV pozitīvam osibam, kas inficēts ar VIL-1 un VIL-2: A tabula.

Tabulā PVO ieteikto imūnblotēšanas rezultātu izvērtēšanas kritēriju izklāstā un Krievu centrs no profilakses un cīņas pret SNIDom.

Vihodyachi s kritēriji PVO, pozitīvs vvazhayut sirovatki, kurā metode ІХ nosaka antivielas līdz diviem proteīniem no apvalka VIL-1. Tā kā reakcija ir acīmredzama tikai ar vienu no čaulas proteīniem (gp160, gp120, gp41) reakcijā ar citiem proteīniem vai bez tā, rezultāts ir apšaubāms. Saskaņā ar Krievijas Federācijas Veselības ministrijas Federālā zinātniskā un metodiskā centra datiem SNID profilaksei un apkarošanai, sirovats ir iespējams interpretēt kā pozitīvu un antivielu klātbūtnei tikai vienu miziņas proteīnu.

Antivielu klātbūtne pret p24 antigēnu var liecināt par serokonversiju šajā periodā, bet paša proteīna antivielu fragmenti tiek uzskatīti par pirmajiem. Pozitīvas reakcijas ar gag un pol proteīniem bez reakcijas ar env proteīniem var atspoguļot agrīnas serokonversijas stadiju, kā arī norādīt uz VIL-2 infekcijas klātbūtni vai nespecifisku reakciju.

VIL diagnostikā kā eksperta metodei reakcijai uz imūnblotēšanu ir vairāki trūkumi:

1. Neiespējamība apstiprināt p24 antigēna VIL 1 noteikšanu vairākos testos, kuros vienas stundas laikā tiek noteikts antigēns un antivielas pret VIL, lai pārbaudītu zem cilindra (ne-gluzdim) testēšanu skrīninga testu kvalitātē. vienu stundu ilga antigēna un antivielu noteikšana pret MIL (obligāti) ). 2001: "Dzemdību donoriem asins pārliešanas stacijās ir nepieciešams izstrādāt pārbaudes sistēmas, kas vienlaikus nosaka antigēnu un antivielas pret VIL").

2. Antivielu noteikšana ārpus IgG klases. Nav iespējams apstiprināt pozitīvos rezultātus, kas tika novērsti 3. un 4. paaudzes aizstājējpārbaudēs (kas uzrāda IgG un IgM antivielas).

3. Pārbaudes vērtējuma interpretācijas subjektivitāte, īpaši "šaubīgu" un "nenozīmīgo" rezultātu gadījumos un vālītes stadijas serokonversija (gludas pēdas, kas šajos kritienos parādās uz nitrocelulozes membrānām, ir izplūdušas, ledus var redzēt ar nesalauztu aci un, ja to novērtē dažādas personas, viņi bieži baidās no apjukuma).

4. Analīzes rezultātu automatizētas kalkulācijas novērtēšanas neiespējamība.

5. Zemākais IFA jutīguma dēļ.

6. Nepietiekama atveseļošanās (maisījuma aiztures gadījumā attīstās nitrocelulozes membrāna un nevar būt objektīvs apliecinājums izpausmei, vai nav VIL izpausme smagās ieplakās).

7. Grūtības reakcijas inscenēšanā un taupīšanā (nitrocelulozes membrānas konjunkti mēdz tiecas un bieži plīst).

8. Liela IB komplektu dažādība.

Vіdomy reaģents, ko var savākt vienas stundas antigēniem un antivielām pret vienu un to pašu patogēnu, ieskaitot BIL (DE 4236189 F1, 28.04.1994.). Nav pārbaudes sistēmas, kas ļautu diagnosticēt VIL infekciju dažādos posmos.

Šīs vīna darītavas vadītājam nepieciešams iegādāties testu sistēmu, ar kuras palīdzību iespējams apstiprināt pozitīvus vai kumulatīvus rezultātus skrīninga pārbaudēs uz antivielām līdz VIL 1 un 2, VIL 1 grupām Prota antigēns p24 VIL 1 intravenozas ievadīšanas gadījumā. antigēnu testi vienreizējiem antigēniem.

Proponation no Technichne Risnia sasniegt ІMUNUPHERMENT testēšanas sistēma Іdentifіkatsіїn spektra Antitail uz Viruus ІMUNUDEFІЦитурить илюни (віл) і і і ина товива, и потипо потипо по имуденная перувенная новенная Р24 порусу імурудефіцийтиты cilvēka imūndeficīta vīrusu, kas ir gp41 (env VIL-1 un Vil -2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), antivielas pret antigēnu VIL 1 p24 un noteikšanas reaģenti, pārmērīgas iedarbības gadījumā, VIL antigēni un VIL antivielas tiek adsorbēti dažādās plākšņu iedobēs fermentu imūnanalīzei.

Turklāt uzvaras sorbcijai tiek izmantotas 96 iedobju polistirola asorti vai neassorti plāksnes enzīmu imūnanalīzei.

Technikiy meiste, sho pieņemt CIM vinarade poligayaє yov mogalostі pidderdenny rezultātus par semestu uz vіl 1 і 2, Vіl 1 Grup Pro Antigen R24 Vіl 1, VCOCї Revoluciony, Mozhvyosti automatizētā intripretakії pārskats, Scho Vuschuє sub'єkivnіt otsіnna, simpar vicannya tests, mazāks pārī ar būtiskiem ІБ varostі komplektiem.

Tse tekhnіchne rіshennya vіdrіznyaєtsya vіd vіdomih:

1. Vykoristannya kā cietas fāzes pārnēsāšanas tablete imunoloģiskām reakcijām.

2. Vienas stundas izmēģinājumi kā sorbents antivielām līdz p 24 VIL un VIL antigēnu komplekts.

Vinahid ir ilustrēts ar soļojošu dibenu.

Paplašinātās pārbaudes sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR + AG r24 VIL 1" vāle є:

Imunosorbents - rekombinantie antigēni, kas līdzīgi strukturālajiem proteīniem VIL-1: gp41 (env VIL-1 un VIL 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), VIL-2: gp36 (env) un monoklonālās peles antivielas pret VIL 1(p24) antigēnu, sorbcija tika atdalīta uz polistirola dozēšanas plāksnes sloksnēm.

Lai sagatavotu vicorist imūnsorbentu:

1. HIV-1 gp41 ir proteīns, ko ražo E. Coli celms Nr. AHIV 103.

2. HIV-1 gp120 ir proteīns, ko ražo E. Coli celms Nr. AHIV 109.

3. HIV-1 p24 ir proteīns, ko ražo E. Coli celms Nr. AHIV 105.

4. HIV-1 p31 - proteīns, ko ražo E. Coli celms Nr. AHIV 108.

5. HIV-2 p36 ir proteīns, ko ražo E. Coli celms Nr. AHIV 106.

Konjugāts 1, liofilizēts vai reti sastopams - peles monoklonālās antivielas pret p24 VIL1 antigēnu, konjugētas ar biotīnu.

1. Konjugāts 2, liofilizēts vai rets, - rekombinanto antigēnu summa, kas līdzīga strukturālajiem proteīniem VIL-1: gp41 (env VIL-1 un VIL 1 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31(po1) ; VIL-2: gp36 (env), konjugēts ar biotīnu;

2. Konjugāti 3, 4 – liofilizēts vai reti – streptavidīns, marķēts ar hronperoksidāzi;

Iepriekšējo pētījumu gaitā tika pārskatīta testēšanas sistēmas konstrukcija, modificēta її komponentu sagatavošanas tehnoloģija, optimizēta un veikta imūnenzimātiskā reakcija.

Iestatot IFA testa sistēmā "DS - IFA - ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + Ag p24 VIL 1", pievienojiet 25 µl konjugāta-1 plāksnes iedobēm ar adsorbētām antivielām līdz p24 un iedobēs. ar adsorbētiem antigēniem - 25 µl konjugāta-2. Reakcijas shēma ir parādīta zemāk. Dodiet caurumu ādai, lai pagatavotu 25 µl pēdējās devas. Tādējādi iedobēs ar antigēniem krāsa mainās no oranžas līdz erysipelas, bet iedobēs ar antivielām - no zaļas uz sīriju. Sumišus inkubē 45 minūtes 37°C temperatūrā kratītājā (vai 1 gadu 37°C termostatā). Pēc tam bez injekcijas pievienojiet 50 µl konjugāta-3 plāksnes antigēna p24 iedobēs un 50 µl konjugāta-4 antigēna mērķa iedobēs. Pēc 20 minūšu inkubācijas 37°C kratītājā (vai 30 minūtes 37°C termostatā) nomazgājiet plāksni un atklājiet substrāta maisījumu. Pēdējā reakcijas stunda ir 1 gads 25 minūtes (vai 1 gads 50 minūtes). Mērķa pacientam esošais p24 antigēns saistās ar monoklonālajām antivielām līdz pat p24, un specifiskās antivielas veido kompleksu ar rekombinantiem antigēniem uz plāksnes. Anti-p24-p24 imūnkomplekss ar p24, kas ir izšķīdināts, izpaužas kā anti-p24-biotīna konjugāti, tad streptavidīna-peroksidāze un Ag-BIL-Ab-BIL imūnkomplekss ar Ag-biotīna konjugātu, pēc tam streptavidīna peroksidāzi.

Reakcijas iestatīšanas shēma.

Rezultātu forma tiek veikta spektrofotometriski pie diviem matu garumiem: 450/620-680 nm ar "atkārtošanas" pielāgošanu. Pieļaujamā rezultātu parādīšanās vienam ilgam 450 nm svārstību periodam.

Analīzes rezultāti ir pareizi, jo optiskās spraugas (OD) vidējā vērtība iedobēs ar K- ne vairāk kā 0,2, iedobēs ar K+ - ne zemāka par 1,0. VP kritisks. maksā par formulu:

VP kritisks. gp41 = vienāds vērtību VP K-(gp41)+0,15

VP kritisks. gp120 = vienāds vērtību VP K-(gp120)+0,15

VP kritisks. p24 = vienāds. vērtību VP K-(R24) +0,15

VP kritisks. p31 = vienāds. vērtību VP K-(R31) +0,15

VP kritisks. gp36 = por_vn. vērtību VP K-(gp36)+0,15

VP kritisks. Ag p24 = povn. vērtību VP līdz-(Ag p24)+0,04

de 0,15 un 0,04 - koeficienti, kas noteikti ar statistiskās analīzes metodi, pamatojoties uz virobniku. Testēšanas sistēmas izstrādes procesā bija nepieciešams vikoristano:

1. Asins paraugi no veseliem donoriem (n=610).

2. Asins sīrupi ar dažādām ar HIV nesaistītām infekcijām slimībām (GRH, pneimonija, tonsilīts, herpetiskas un citomegalovīrusa infekcijas, sifiliss, hlamīdijas, vīrusu hepatīts A, B un C (n=224)).

3. Pacienti ar asins sīrupiem, kas slimo ar dažādām neinfekcijas slimībām – traumām, sirds un asinsvadu sistēmas slimībām, onkoloģiju (n=35).

4. Asins paraugi sievietēm (n=40).

5. Asins analīzes, seropozitīvas IFA un apstiprinātas ar imūnblotu (n=428).

6. Sirowoku mātīšu paraugi ar pozitīvu rezultātu, kas ņemti ar enzīmu saistītās imūnsorbcijas analīzēs vienas stundas antivielu VIL 1,2 un antigēna p24 ievadīšanai un nenozīmīgu imūnblota rezultātu (n=123).

7. Sirovatok iekšējais panelis, kas neizslēdz antivielas pret VIL 1.2, tika protestēts par imūnenzimātisko testu sistēmu un imūnblota (n=21) reģistrāciju, ko veica Krievijas Federācijas Veselības ministrija.

8. HIV 1 ANTIGĒNA STANDARTS, BIO RAD, Francija, kat. Nr.72217, kas ir antigēns, kas ņemts no vīrusa lizāta.

9. Biznesa iekšējais standarts. Zrazok, scho, lai aizstātu p 24 antigēna koncentrāciju 200 pg / ml, vīrusa lizāta noņemšana un titrēšana saskaņā ar standarta "HIV 1 ANTIGĒNA STANDARTS" uzņēmums "BIO RAD", Francija, kat. Nr.72217.

10. Standarta panelis sirovatok, scho, lai pārbaudītu antivielas pret pirmā tipa cilvēka imūndeficīta vīrusu (VIL 1) - VZG 42-28-212-93-02P, "Medico-Biological Union", Novosibirska.

11. Standarta panelis sirovatok, scho, lai pārbaudītu antivielas pret cilvēka imūndeficīta vīrusu cita veida (VIL 2) - VZG-42-28-216-02P, "Medicīnas un bioloģiskā savienība", Novosibirska.

12. Standarta sirovatok panelis, lai neatriebtu antivielas pret imūndeficīta vīrusu cilvēkam pirmā un cita tipa (VIL 1, 2) - VZG-42-28-214-94-02P, "Medico-Biological Savienība", Novosibirska.

Testa sistēmas jutīguma novērtējums p24 antigēna noteikšanā tika veikts saskaņā ar HIV I ANTIGĒNA STANDARTU, BIO RAD, iekšējo pieņemšanas standartu. Uzvarotajā iekšējā standartā tika sagatavoti 4 secīgi 2-kārtīgi atšķaidījumi ar normālu donora plazmu no 40 pg/ml līdz 5 pg/ml, lai neaizkavētu antivielu veidošanos pret VIL 1, 2 kā šķīdinātāju. Par jutīguma kritēriju tika uzskatīts mazākais parādītā antigēna daudzums. Noņemiet datus, kas parādīti 1. tabulā.

Lai novērtētu testa sistēmas jutīgumu specifisku antivielu noteikšanā, mēs izmantojām standarta testu paneļus, lai noteiktu antivielas pret cilvēka imūndeficīta vīrusu (VIL 1, 2) (OSO 42-28-212-93-02P p.012, VZG 42-216 - 02P (VIL 2) 003.lpp.).

Optimālie dati ir parādīti 3., 4. tabulā.

Testu sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" diagnostikas efektivitāte tika salīdzināta ar testu sistēmām "Jenscrin-VIL-Ag/Am" (Bio-Rad), "DIA-HIV 1 /2" (Diaprof-Med), "Vironostics VIL Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-VIL1.2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-VIL-1.2 K" (Amercard) , "VIL-1, VIL-2-IFA-Avicenna" (Avicenna). Par kuru no iekšējā paneļa sirovatok testu tika protestēti visos norādītajos testos. 5. tabulā parādītie rezultāti liecina par "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" augsto diagnostisko efektivitāti.

Testa sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" jutība tika pētīta arī ar pacientu asins serumiem, kas ar imūnblotēšanu apstiprināti kā VIL pozitīvi. Žagals protestēja pret 428 tādiem sirovatiem. Tika analizēti vairāki antivielu noteikšanas varianti pret dažādiem VIL proteīniem un p24 antigēnu. Rezultāti ir parādīti 6. tabulā.

6. tabula Antivielu noteikšanas rezultāti pret dažādiem VIL 1 un p24 antigēna proteīniem, pārbaudot VIL 1 pozitīvas mātītes (n=428)
% izpausme	Olbaltumvielu profils
	anti-gr41	anti-gr120	anti-r24	anti-r31	24. lpp
51,1%	+	+	+	+	-
35,3%	+	-	+	+	-
4%	+	-	+	-	-
3,3%	+	-	-	+	-
1,4%	+	-	-	+	+
1,2%	+	+	+	+	+
1,2%	+	+	-	+	+
0,9%	+	-	+	+	+
0,7%	+	-	+	-	+
0,5%	+	-	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	-
% antivielu noteikšana pret okremyh proteīniem vai Ag p24	100%	53,9%	93,2%	94,4%	6,1%

Pārbaudot VIL 1 pozitīvu, 3% mātīšu uzrādīja pozitīvu reakciju uz gp36 (env VIL 2). MP/OPcrit ir tsikh zrazkah bez pārsniegšanas 2.0. Datus par baltā ārējā apvalka VIL 1 (gp41) un VIL 2 (gp36) krustenisko reaktivitāti esam ņēmuši no literatūras datiem.

Rezultātu interpretācija

Pozitīvo sirowoku un paraugu no standarta un iekšējiem paneļiem VIL testēšanas analīze "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + AGr24 VIL 1", ļaujot mums paplašināt šī testa rezultātu interpretācijas kritērijus. Ieteicamie kritēriji ir norādīti 7. tabulā.

Pamatojoties uz šiem kritērijiem, visi IVL pozitīvo siroworts gadījumi (n=428) tika klasificēti kā pozitīvi "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL1". Standarta panelī bija 16 pazīmes, kas liecina, ka antivielas pret VIL 1, 14 tika atzīmētas kā pozitīvas un 2 kā nenozīmīgas. Tika konstatēts, ka 8 standarta paneļa pazīmes, kas atrieba antivielas pret VIL 2, bija pozitīvas. No 10 punktiem iekšējā panelī, kurā tika atriebtas antivielas pret VIL 1, 7 tika uzskatīti par pozitīviem un 3 nebija nozīmīgi.

Tika veikta arī testa sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" jutība pacientu asins serumiem, kas var dot pozitīvu rezultātu ar enzīmu saistītās imūnsorbcijas testu sistēmās, kas vienlaikus noteikt antivielas un antigēnu p24, un neaizsegumu imūnblotā. Zahals protestēja pret 123 šādiem protestiem. Dati ir parādīti 8. tabulā.

Pārbaudot sīrupus ar neievērojamu imūnblota rezultātu (n=123) "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" 72 paraugos (58,5%) uzrādīja pozitīvu rezultātu. No tām 26 sievietes (21,1%) bija pozitīvas pret p24, 20 (16,3%) bija pozitīvas pret antivielām, 16 (13%) bija pozitīvas pret p24 ar antivielām līdz vienam proteīnam, 10 (8,1%) bija ar p24 ar antivielām. līdz diviem un vairāk proteīniem. Tādā veidā tikai vienas antivielas pārbaude (bez p24 noteikšanas) ļautu 30 pozitīviem testiem (24,4%) būt pozitīviem. P24 antigēna noteikšana testā ļāva apzīmēt kā pozitīvas 42 papildu pazīmes (34,1%).

Lai novērtētu vicoristan bula testa sistēmas specifiku, tika izmantots standarta serotipu panelis, lai netiktu izvadītas antivielas pret VIL 1, 2 (n=20); asins sīrupi no veseliem donoriem (n=610), asins sīrupi no slimībām ar dažādām ar VIL nesaistītām infekcijas slimībām (n=224); asins seruma kaites gadījumi ar dažādām neinfekcijas slimībām - traumas, sirds un asinsvadu sistēmas slimības, onkoloģija (n=35); sieviešu asins paraugi (n=40). Usijs protestēja pret 929 cilvēkiem. Viens veselu donoru asins sirovātu paraugs uzrādīja chibnopozitīvu rezultātu - tika konstatētas antivielas līdz gp41 un p24. 7 veselu donoru asins sīrupi un 2 ar VIL nesaistītu infekcijas slimību pacientu asins sīrupi uzrādīja pozitīvu rezultātu p24.

Lai novērtētu testa sistēmas specifiku, tika pārbaudīts standarta negatīvo testu panelis (ОСО 42-28-214-94-02p, p.009). Specifiskums kļuva 100%.

Tādā veidā veiktie pētījumi ir parādījuši, ka testa sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTR+AGr24 VIL 1" specifika kļūst par 99% jau esošu normālu donoru asins serotipu un slimības ar dažādām infekcijām un somatiskām slimībām.

Uzņemtie dati liecina par paplašinātās testu sistēmas "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" augsto diagnostisko efektivitāti. Testa sistēma var būt vikoristāna antivielu noteikšanai līdz okrēmisko proteīnu VIL 1 un 2 tipiem un p24 antigēnam VIL1 ar metodi, kas apstiprina pozitīvu skrīninga rezultātu ar testu sistēmām, kas nosaka antivielas, vai ar testa sistēmām, kas nosaka antivielas un p24 antigēnu. uzreiz. Testa sistēma var būt vikoristāns kā alternatīvs tests imunoblotam, lai apstiprinātu pozitīvus rezultātus, kā arī palielinātu antivielu dinamiku pret VIL un p24 antigēnu. dažādi posmi infekcijas.

PEREVAGI TESTS

1. Fermentu imūntesta apstiprināšana tablešu formātā

2. Testa apstiprinājums, kas nosaka antivielu VIL 1, 2 un antigēna p24 VIL 1 spektru.

3. Visu Ig klašu antivielu noteikšana

4. P24 noteikšanas jutība ir mazāka par 5 pg/ml

5. Pieļaujot nenozīmīgo rezultātu skaita ātrumu, salīdzinot ar imūnblotu

6. Analīzes stunda - 1 gads 25 min (imunoblots - no 3 līdz 20 gadiem)

7. Visu komponentu un tēmēkļu ieviešanas vizuālais novērtējums.

1. Imūnenzīmu testa sistēma antivielu spektra identificēšanai pret cilvēka imūndeficīta vīrusu (HIV) pirmā un cita veida, pirmā tipa cilvēkiem, kuri ir gp41 (env VIL-1 un VIL-2 grupa O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), antivielas pret VIL 1 antigēnu p24 un noteikšanas reaģenti, pārmērīgas iedarbības gadījumā VIL antigēni un VIL antivielas tiek adsorbēti dažādās iedobēs. tabletes enzīmu imūnanalīzei.

2. Enzīmu imūnanalīzes testa sistēma saskaņā ar 1. punktu, kas ir paredzēta 96 bedrīšu polistirola sorbcijai dažādās vai dažādās plāksnēs enzīmu imūnanalīzei.

SNID pasaulē lielākā izplešanās pasaulē mūsdienās ir vīruss no retrovīrusu apakšģints, tos sauc arī par lentivīrusiem jeb “biežāk sastopamiem”. Patiešām, cilvēka ķermenī smaka sāk parādīties pēc apmēram trīs stundu stundas, aptuveni 10 gadus vēlāk.

Identificēts pirmā un cita veida imūndeficīts. Bet jūs varat droši runāt par pirmā tipa vīrusa izplatību. Iedzerot asinis un atnākot uz metienu, it kā apliecinot imunitāti, vīruss sāk strauji vairoties. Kamēr CD4 molekula, kas tiek izmantota atpazīšanai, identificē nepieejamo ienaidnieku, tā var inficēt visu organismu. Tiem, kuri diagnosticē diagnozi agrāk, viņiem ir lielākas iespējas slimajiem veltīt laiku un dzīvot ilgāk.

Ja cilvēks spēj noticēt SNID, viņš nekļūdīsies. Visbiežāk šādas diagnozes pamatā ir imūndeficīta antivielu noteikšana asinīs - olbaltumvielas, kas tiek vainotas kā reakcija uz vīrusa klātbūtni, un smaka sāk nomierināties 1,5 līdz 6 mēnešu laikā. iespējamās infekcijas stunda. Pirms šī perioda beigām ir jāveic diagnostika.

Antivielu skaits tiek noteikts, vicoryst analīze, kas otrimav nosaukumu imūnfermentu (IFA). Kura metode ir uzticama, vīns ir vienlīdz precīzs un ļoti jutīgs, un tā rādītājiem vajadzētu būt virs 99,5%. Farmācijas tirgū tiek reklamēti vairāki IFA diagnostikas testu komplekti: Combibest VIL, Anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL, CombiBest anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL 1 2 d 0172. Testa sistēmām jāpaliek līdz trešajam. paaudze. Noteikto reaģentu trūkums: smaka ne vienmēr liecina par slimību agrīnā stadijā. Cilvēks jau ir vīrusu nesējs, viņa ir potenciāli nedroša partneriem, bet asinīs joprojām nav antivielu.

Iestatiet galvenajā aprīkojumā vairākus testus, lai veiktu 12 * 8 vai 192 anti-VIL analīzes. Ar tiem nav ieteicams pašlabot. Preparātu aprakstā teikts, ka tā ir smuku pazīme - noteikt antivielu skaitu pret abu veidu SNID. Un arī piešķiriet SNID visu klašu antivielas. Ja antivielu nav, tad slimība netiek diagnosticēta.

Ceturtā daļa testu paaudzes "izskriet", krēmveida antivielas, tie SNID antigēni, ēkas smaka atklāj infekciju agrāk, pazemina trešās paaudzes infekciju. Izlīdzināšanai: antigēns ВІL є asinīs, sākot jau no 5. dobi, un pirmās antivielas parādās ne agrāk, zemākas pēc mēneša. CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (1. komplekts) un CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (2. komplekts) jāpārbauda pirms 4. paaudzes. Paātrinot ar šo reaģentu komplektu, tiek konstatētas antivielas pret 1., 2. tipa - p24 antigēnu, sasniedzot serumu vai cilvēka asins plazmu. Bagato valsts zastosovuyt IFA pārbauda sevi 4 paaudzes, piemēram, es to saucu par Antigēnu / Antivielu, saīsināti - AGĀTS.

Pārbaude tiek veikta anonīmi.

ВІL-іnfektsіyu tiek klasificēta kā nekontrolēta slimība, jo ir apvienotas vairākas metodes, specifiska profilakse un nepietiekama terapijas efektivitāte. Lai kontrolētu epidemioloģisko situāciju ar VIL infekciju, ir svarīgi uzvarēt skrīninga diagnostisko novērošanu. Vidējo VIL infekcijas diagnostikas metožu skaitu aizņem enzīmu imūnsorbcijas tests (IFA), kas ļauj noteikt seroloģiskos slimības marķierus pacientiem ar aptaukošanos.

Vietnē Cyoma Rydomlennі prezentēja Antitail visnant Vіl rezultātu Sirovattsі Krovі 40 823 OSIB, to patērēja Pazіnti zhіnechih konsorāļi, Polikіkіnіk, Lіkaren Mist un Torzhniteіsv, Schniteal speіsu Center. vīrusu hepatīts B, Ar tām veneriskajām slimībām). Novērošana tika veikta 2005. gadā Nacionālā Dzemdniecības un ginekoloģijas pētniecības institūta imunoloģijas laboratorijā. PIRMS. Otta RAMS infekcijas slimības.

Asins serozu seromu primārajai šūšanai tika pārbaudīta testa sistēma "Comb_Best anti-VIL-1+2" (ZAT "Vektor-Best", Novosibirska) - 2 (A, G un M klases imūnglobulīni) . Šajā diagnostikas komplektā rekombinantie VIL proteīni tiek ievietoti gan imobilizācijai tablešu iedobēs, gan konjugāta gadījumā ar peroksidāzes hronu. Sirowoku analīzes rezultātu novērtējums tika veikts saskaņā ar testa sistēmas instrukciju ieteikumu: negatīvi (nav antivielu pret VIL-1 un VIL-2) tika uzskatīti par testa paraugiem, optiskais stiprums (OD) no kuriem IFA nepārsniedza OPcrit vērtību.

Laboratorijā pārbaudot 40222 (98,5%) no 40823 garnelēm, tika iegūts negatīvs ELISA rezultāts, un 601 (1,5%) novērošanas paraugs tika novērtēts kā sākotnēji pozitīvs. Nākamās dienas atkārtotas ādas analīzes rezultātā 601 siroworts dublikātos (divas tabletes iedobes) 440 (73,2%) paraugi novērtēti kā pozitīvi, bet 161 (26,8%) - kā negatīvi. Atkarībā no Veselības un sociālās attīstības ministrijas ieteikuma 440 skrīninga pozitīvas mātītes tika sasaldētas un pārvietotas papildu atbalsta saņemšanai uz Zāļu references laboratorijas Nr.30 im konsultatīvo un diagnostikas kabinetu. S.P. Botkina. Tika veikti vairāki pētījumi ar dažādām ELISA testu sistēmām “EKOlab-Vironostics VIL 1.2 Ag/At” (“EKOlab”, Elektrogorsk), “Genscreen Plus”. HIV Ag-Ab” (“BioRad”, ASV), kā arī imūnblotu komplekti. 440 māšu analīzes rezultāti apstiprinošajos testos ļāva augt vīte, 323 (73,4%) bija pozitīvas un 102 (23,2%) bija negatīvas. 15 pēcpārbaudes paraugiem (3,4%) tika noņemti nenozīmīgi analīzes rezultāti.

Sekojošais nozīmē, ka EP vērtība, kas tika ņemta mūsu laboratorijā CombiBest anti-VIL-1+2 testu sistēmas testu sākotnējās testēšanas laikā, 314 (97,2%) no 323 pozitīvajām mātītēm kļuva no 0,900 līdz 1,780, un 9 (2,8%) srazkіv - 0,500-0,900. OD vērtības, kas iegūtas no 102 negatīvu serotipu skrīninga, 52 pacientiem (51%) tika pārbaudītas intervālā no 0,195 līdz 0,400; 40 (39,2%) paraugiem - 0401-0800; 10 (9,8%) dzēš – virs 0,800.

Tādā veidā veiktā darba rezultātā tika pierādīts, ka ar testu sistēmas "Comb_Best anti-VIL-1 + 2" testiem pirmā asins sirovātu septicēmija seroloģisko marķieru klātbūtnei VIL-infekcijā. ir ļoti efektīva. Pozitīvus skrīninga rezultātus apstiprināja papildu novērošanas pētījumi references laboratorijā 73% gadījumu, un pozitīvi rezultāti tika reģistrēti mazāk nekā 0,25% no 40 823 pārbaudītajiem pacientiem.

Apraksts

Sagatavošana

Norāde

Rezultātu interpretācija

Apraksts

Iecelšanas metode Enzīmu imūntests (IFA).

Pēcpārbaudes materiāls Asins serums

Pieejams ceļš uz mājām

Antivielu pret VIL 1. un 2. tipu un antigēnu p24 VIL kombinēta noteikšana, tests.

Cieņa. Ar pozitīvām un kumulatīvām reakcijām termiņus, kas parāda rezultātu, var palielināt līdz 10 darba dienām. BIL (cilvēka imūndeficīta vīruss), kas izraisa SNID (Buffaled Immunodeficiency Syndrome) - pieder retrovīrusu ģimenei. Tas tiek pārnests no cilvēka uz cilvēku ar galvas un šļirču, kas paredzētas intravenozai zāļu ievadīšanai vai ārstnieciskām procedūrām, duļķainību, seksuālu kontaktu laikā gan heteroseksuālu, gan homoseksuālu. Pārnešana uz vīrusu var notikt, pārlejot ar inficētām asinīm un produktiem, orgānu ziedošanu no mūsu dzimtās zemes, ārstniecības personām - traumējot ar inficētām adatām un instrumentiem. Infekciju ar VL var pārnēsāt no inficētas mātes bērnam (vertikāls ceļš), lai gan mūsdienīgas hroniskas pretretrovīrusu terapijas profilakses metodes, ievērojot visus ieteikumus, var samazināt šādu risku līdz minimumam.

Vīrusa un klitīnas mijiedarbības process ietver vairākus posmus: saikne starp vīrusu un klitīnu, tā tunikas attīstība, iekļūšana citoplazmā, DNS sintēze no vīrusa RNS, vīrusa DNS ievadīšana saimnieka genomā. Ja tā, sākas latentā infekcijas stadija. Šādā stāvoklī provīrusa DNS var pastāvēt stundu, neizrādot aktivitāti un neiejaucoties kunga dzīvē. Kamēr nav vīrusu proteīnu ekspresijas, nav imūnās atbildes pret vīrusu. Antivielas pret VIL, kas raksturo organisma imūnsistēmu, parādās pēc vīrusa DNS aktivizācijas un vīrusa aktīvās reprodukcijas vālītes. Latentā perioda krituma trivalitāte zemu faktoru, tostarp organisma individuālo ģenētisko īpašību, dēļ.

Var vainot antivielas pret VIL, sākot ar citu dienu pēc inficēšanās; їх vmіst zbіlshuєtsya stiepjas 2-4 dienas un zberіgaєtsya stiepjas bagāts rokіv. 90-95% infekciju smaka parādās pirmajos trīs mēnešos pēc inficēšanās, 5-9% - trīs līdz sešu mēnešu laikā, 0,5-1% - ilgākā mūžā.

Pirmajā infekcijas stadijā, pat pirms antivielu parādīšanās pret vīrusu (pēc tam pirms serokonversijas), serozes plazmas paraugos var noteikt VIL antigēnu, zocrema iogo capsid proteīna p24 klātbūtni. Vēlāk, pēc serokonversijas, VIN kļūst nenosakāms.

4. paaudzes testu sistēmu kombinācijas, līdz kurām var izmantot HIV Ag/Ab Combo testu (Architect, Abbott), nosaka gan VIL 1 un 2 tipa antivielas, gan P24 VIL antigēnu, kas ļauj laikus atklāt. no infekcijas. Pirms skrīninga testa specifikas, kas tiek veikts INVITRO laboratorijā, VIL-infekcijas varto noteikšanai, augsta veiksmes specifika (> 99,5%); 100% jutība pret analīzi pret antivielām, kas raksturīgas serokonversijas periodam, un jutība pret testu pret p24 antigēnu ir tuvu 18 pg/ml.

VIL suvoro regulējuma laboratoriskās pārbaudes veikšanas kārtība pēc Krievijas Federācijas Veselības ministrijas rīkojumiem un ietver VIL antivielu klātbūtnes skrīninga (apstiprinājuma) pārbaudes posmu ar imūnenzimātiskām (IFA) metodēm, kuras ir atļauts veikt. pārbaudīts, un verifikācijas stadija (adverification) vairāk. Jāņem vērā, ka īsākā skrīninga IFA-sistēmas negarantē 100% specifiskumu, tāpēc pastāv iespēja iegūt nespecifiskus, hibnopozitīvus rezultātus, kas saistīti ar pacienta asins seruma īpašībām. Tāpēc pozitīvu skrīninga ELISA rezultātu var neapstiprināt ar apstiprinošiem testiem, pēc kuriem pacientam tiek parādīts negatīvs nenozīmīgs rezultāts. Ja novērošanas rezultāts nav norādīts, tests dinamiski jāatkārto pēc 2-3 dienām.

HIV infekcijas laboratoriskajai diagnostikai bērniem, cilvēkiem ar HIV inficētām mātēm, var būt savas īpatnības. Mātes antivielas līdz VIL (IgG klasei) var cirkulēt asinīs līdz 18 mēnešu vecumam. Antivielu klātbūtne pret VIL jaundzimušajiem nenozīmē, ka vīruss nav iekļuvis placentas barjerā. Ar VIL inficētu māšu bērniem 36 mēnešus pēc dzemdībām tiek veikta laboratoriski diagnostiskā obstrukcija.

Sagatavošana

Īpaša apmācība nav nepieciešama. Asins paraugu ieteicams ņemt ne agrāk kā 4 gadus pēc pārējās dienas. Var iepazīties ar svarīgākajiem ieteikumiem, lai sagatavotos līdz noteiktajam termiņam. Sekojiet līdzi antigēna un antivielu noteikšanai pret VIL ne agrāk, vismaz divas reizes pēc iespējamās inficēšanās, atkārtojot pēc trīs un sešām reizēm ar negatīvu rezultātu. Pieteikumu reģistrācija uzturēšanās veikšanai TOV "INVITRO" tiek veikta aiz pases vai aizvietojama dokumenta (migrācijas karte, dzīvesvietas laika uzskaite, nodošana militārajam dienestam, noformēšana pasu birojā, izsniedzot pases). pase, reģistrators). Dokumenta uzrādīšanā obov'yazkovo ir vainīgs nedarbā un informācijā par Krievijas Federācijas laiku un pēcreģistrāciju un fotogrāfiju. Par pases (to aizstājošā dokumenta) derīgumu pacientam ir tiesības iesniegt anonīmu iesniegumu par biomateriāla piegādi. Anonīma obstezhennі gadījumā, ja iesniegums tiek noraidīts kā klients, biomateriālam tiek piešķirts numurs, kas ir tikai pacientam, bet medicīnas personālam, kurš noformē iesniegumu. ! Izmeklēšanas rezultātus, kas tiek glabāti anonīmi, nevar uzrādīt hospitalizācijai, profesionāliem pārskatiem nav nepieciešama reģistrācija ORUIB.

Parādīt pirms grēksūdzes

• Zbіlshennya limfmezgli divos reģionos.
• Leikopēnija ar limfopēniju.
• Nakts dzeršana.
• Nepamatota iemesla dēļ strauji novājējis.
• Caureja ilgāk par trim dienām, bez skaidra iemesla.
• Nezināma iemesla drudzis.
• Vaginācijas plānošana
• Pirmsoperācijas sagatavošana, hospitalizācija.
• Norāde uz aizskarošām infekcijām vai vēlāk: tuberkuloze, manifesta toksoplazmoze, herpes vīrusa infekcija, kas bieži atkārtojas, iekšējo orgānu kandidoze, recidivējoša herpes zoster neiralģija, viclicana mikoplazma, pneimocistis vai pneimonella.
• Kapoši sarkoma jaunam vīrietim.
• Vipadkovi stateevі kontakti.

Rezultātu interpretācija

Rezultātu interpretācija ir sniegt informāciju ārstam, nevis diagnozi. Informāciju no šīs sadaļas nevar izmantot pašdiagnozei un pašidentifikācijai. Precīzu diagnozi nosaka ārsts, vikoristovuyuchi šīs obstezhennia rezultātā, un man būs nepieciešama informācija no citām vēnām: anamnēze, citu obstezheniya rezultāti.

Indivīdi nomira Neatkarīgajā laboratorijā INVITRO: test yakіsny. Rezultātu noformēšanas forma: antivielu klātbūtnei pret VIL 1 un 2 un antigēnu p24 tiek uzskatīta par "negatīvu". Ja skrīninga enzīmu imūnanalīzē tiek konstatētas antivielas pret VIL vai antigēnu, sirowort paraugs tiek koriģēts turpmākai apstiprināšanai ar imūnblota metodi uz SNID Maskavas centru, kas pārbauda pozitīvus un nenozīmīgus rezultātus.

Pozitīvs rezultāts:

1. HIV infekcija;
2. hibnopozitīvs rezultāts, kas noved pie atkārtotiem vai papildu rezultātiem *);
3. pētījums nebija informatīvs bērniem līdz 18 mēnešu vecumam, ar VIL inficētu māšu bērniem.

*Skrīninga testu sistēmas Antityla specifika pret VIL 1 un 2 un antigēnu VIL 1 un 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott) saskaņā ar reaģentu sniegtajiem novērtējumiem kļūst tuvu 99,6% gan pasaules populācijā. un pacientu grupā ar potenciāliem traucējumiem (infekcijas HBV, HCV, masaliņu, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. un in., autoimūnām patoloģijām (tai skaitā reimatoīdais artrīts, antinukleāra klātbūtne). antivielas), IgG, IgM nobīdes, monoklonāla gammopātija, hemodialīze, vairākas asins pārliešanas).

Savlaicīga VIL-іnfektsії diagnostika kļūst par ļoti svarīgu pieeju, lai agrāk pacilātības vālīte var būt bagāta ar to, kāpēc pietuvināt slimības tālāko attīstību un turpināt slimā dzīvi. Pārējos gados vagomijas progresēšana tiek novērota baigās slimības Galusijas izpausmē: vecās pārbaudes sistēmas tiek aizstātas ar perfektām, kondicionēšanas metodes kļūst pieejamākas, un to precizitāte ievērojami uzlabojas.

Šajā rakstā ir zināms par pašreizējām VIL-infekcijas diagnostikas metodēm, muižniecība yakі korisno, lai savlaicīgi gavilētu par šo problēmu un uzlabotu slimā parasto dzīvi.

VIL diagnostikas metodes

Krievijā VIL infekcijas diagnosticēšanai tiek veikta standarta procedūra, kas ietver divas vienādas:

• IFA testu sistēma (skrīninga analīze);
• imūnblots (IB).

Diagnostikai var izmantot arī citas metodes:

• eksprestests.

IFA testa sistēmas

Diagnozes pirmajā posmā VIL-infekcijas noteikšanai tiek noteikts skrīninga tests (IFA), kas ir pamats VIL proteīnu radīšanai laboratorijās, kas uztver specifiskas antivielas, kuras infekcijas gadījumā tiek vibrētas organismā. . Pēc jebkādas mijiedarbības ar testa sistēmas reaģentiem (enzīmiem) mainās indikatora piesārņojums. Ņemot vērā krāsas maiņu, tie tiek apstrādāti ar speciālu aprīkojumu, lai tiktu noteikts izvēlētās analīzes rezultāts.

Tādējādi IFA-testi var uzrādīt rezultātu jau dažas dienas pēc VIL-infekcijas ievadīšanas. Šī analīze nenorāda uz vīrusa klātbūtni, bet parāda antivielu veidošanos pret kaut ko jaunu. Atsevišķos gadījumos cilvēka organismos antivielas pret VIL veidojas jau pēc 2 dienām infekcijas laukā, bet lielākajai daļai cilvēku smaka rodas uz mazākiem termiņiem, pēc 3-6 dienām.

Dažādas jutības IFA testu paaudzes Іsnuє chotiri. Pārējā pasaulē biežāk tiek izstrādātas III un IV paaudzes testu sistēmas, jo tās ir izveidotas uz sintētisko peptīdu vai rekombinanto proteīnu bāzes un tām var būt lielāka specifika un precizitāte. Viņi var uzvarēt VIL-infekcijas diagnostikā, VIL izplatības uzraudzībā un pacienta drošības pārbaudē donoru asiņu atkārtotas pārbaudes laikā. IFA-testu sistēmu III un IV paaudzes precizitāte ir 93-99% (jutīgāki testi, kas tiek ražoti Rietumeiropas zemēs - 99%).

IFA testa veikšanai no pacienta vēnas ņem 5 ml asiņu. Starp atlikušo uzņemšanas laiku un analīzi var paiet vismaz 8 gadi (kā likums, nākotnē jūs uzvarēsit). Šādu testu ieteicams veikt ne agrāk kā 3 dienas pēc infekcijas pārnešanas (piemēram, pēc neaizsargāta statūta ar jaunu statūtu partneri).

IFA testa rezultāti tiek ņemti 2-10 dienu laikā:

• negatīvs rezultāts: norāda uz infekcijas VIL klātbūtni, kas neizraisa fahivtsya;
• hibnonegatīvs rezultāts: jūs varat uzmanīties agrīnie termiņi infekcija (līdz 3 dienām), SNID vēlīnās stadijās ar izteiktu nosmakšanu un nepareizas asins sagatavošanas gadījumā;
• hibnopozitīvs rezultāts: tas var būt bīstams dažu slimību gadījumā un nepareizas asins sagatavošanas gadījumā;
• pozitīvs rezultāts: liecina par infekciju VIL-infekcija, lai veiktu ІB un pacienta nosūtīšanu pie speciālista uz SNID centru.

Kāpēc IFA tests var dot pozitīvus rezultātus?

Nepareizus IFA testa rezultātus VIL noteikšanai var izraisīt nepareiza asins paraugu ņemšana vai pacientiem ar šādiem stāvokļiem un slimībām:

• multiplā mieloma;
• infekcijas slimība, ko provocē Epšteina Barra vīruss;
• nometne pēc;
• autoimūna slimība;
• uz vaginuma fona;
• pēcvakcinācijas nometne.

Iepriekš aprakstīto iemeslu dēļ asinīs var būt nespecifiskas krusteniski reaģējošas antivielas, kuru veidošanos nav izraisījusi VIL infekcija.

Pārējos gados chibnopozitīvo rezultātu biežums tikmēr ir samazinājies III un IV paaudzes testu sistēmu pārpildīšanas dēļ jutīgāku peptīdu un rekombinanto proteīnu rezultātā (smirdumus sintezē papildu gēnu inženierija in vitro). Pēc šādu ELISA testu sākuma nepatiesu rezultātu biežums ievērojami samazinājās un kļuva tuvu 0,02-0,5%.

Chibnopozitīvā rezultāta izpausme nenozīmē, ka persona ir inficēta ar VIL. Šādos gadījumos PVO iesaka veikt vēl vienu ELISA testu (4. paaudzes obov'yazkovo).

Pacienta asinis tiek nosūtītas uz references vai arbitrāžas laboratoriju ar zīmi “atkārtot” un tiek turpinātas IV paaudzes IFA testu sistēmā. Ja jaunas analīzes rezultāts ir negatīvs, pirmais rezultāts tiek atzīts par apžēlošanu (hibnopozitīvs) un IB netiek veikts. Ar pozitīvu sumnіvnym rezultātu pirmās stundas cita testa rezultāts, slimajam cilvēkam tiek nozīmēts veikt IX 4-6 dienu laikā, lai apstiprinātu nepieciešamību pēc VIL-іnfikuvannya.

Imūnā blots

HIL infekcijas atlikušo diagnozi var noteikt tikai pēc pozitīva imūnblota rezultāta (IX). Jogai tiek izmantots nitrocelulozes maisījums, jo tiek uzklāti vīrusu proteīni.

Asins paraugus IB ņem no vēnas. Tālāk tiek dota īpaša apstrāde un proteīni, kas atrodas її syrovatsі, tie tiek uzklāti uz speciāla gēla to lādiņam un molekulmasai (manipulācijas tiek veiktas ar speciālu aprīkojumu elektriskā lauka pieplūdumā). Gēlam no asins seruma tiek uzklāts nitrocelulozes gēls un speciālā kamerā tiek veikta blotēšana (“blotēšana”). Smugs ir apstrādāts un pat materiālos ir antivielas pret VIL, tad smirdoņi saistās ar antigēnu smuki uz IB un parādās redzamās līnijās.

ІБ tiek uzskatīts par pozitīvu veidu:

• saskaņā ar Amerikas CDC kritērijiem - uz vīriešu, divas vai trīs līnijas gp41, p24, gp120 / gp160;
• saskaņā ar Amerikas FDA kritērijiem - vīriešiem - divas līnijas p24, p31 un līnija gp41 vai gp120 / gp160.

99,9% pacientu pozitīvs IX rezultāts norāda uz VIL infekciju.

Līniju redzamībai - ІБ negatīvs.

Ja tiek noteiktas līnijas z gp160, gp120 un gp41, IB ir apšaubāma. Šo rezultātu var redzēt ar:

• onkoloģiskā slimība;
• vagitāte;
• daļēja asins pārliešana.

Tajā pašā laikā ir ieteicams veikt papildu pasākumus citu uzņēmumu piesaistei. Taču pēc papildu IB rezultāts kļūst apšaubāms, jāsargājas no asiņu stiepšanās (IB tiek veikta pēc 3 ādas mēnešiem).

Polimerāzes Lanzuga reakcija

PCR tests var norādīt uz vīrusa RNS. Jogo jutība sasniegt templi un ļauj parādīt VIL-infekciju jau 10 dienas pēc inficēšanās. Dažos gadījumos PLR var dot chibnopozitīvus rezultātus, tādējādi augsta jutība var reaģēt uz antivielām pret citām infekcijām.

Tiek dota diagnostikas metode, kas ir dārga, tai būs nepieciešams īpašs aprīkojums un augsta speciālistu kvalifikācija. Qi iemeslu dēļ nav atļauts veikt її ar iedzīvotāju masveida pārbaudi.

PLR zastosovuetsya šādās situācijās:

• par VIL izpausmi jaundzimušajiem, jo ​​tie dzimuši ar VIL inficētām mātēm;
• par VIL izpausmi "gadsimta periodā" vai sumnivny IB;
• VIL koncentrācijas kontrole asinīs;
• donoru asiņu novērošanai

Tikai pēc PLR testa VIL diagnoze netiek veikta, bet tā tiek veikta kā papildu diagnostikas metode sarežģītu situāciju novēršanai.

Ekspress metode

Viens no jauninājumiem VIL diagnostikā bija eksprestesti, kuru rezultātus var novērtēt jau pēc 10-15 minūtēm. Visefektīvākos un precīzākos rezultātus iegūst papildu imūnhromatogrāfiskie testi, kuru pamatā ir kapilārās plūsmas principi. Smaka ir speciāla zirglieta, uz jaku uzliek asinis, vai citu doslidzhuvani rodin (slina, slash). Lai noteiktu antivielu klātbūtni pret VIL, pēc 10–15 testa spalvām tiek noteikta krāsu kontroles mātīte - pozitīvs rezultāts. Ja rezultāts ir negatīvs, kontroles sieva vairs nav klāt.

Tāpat kā un pēc IFA testiem, eksprestestu rezultātus apstiprina IB analīze. Tikai pēc tam var noteikt VIL-infekcijas diagnozi.

Mājas testēšanai izmantojiet ātro komplektu. OraSure Technologies1 (ASV) FDA apstiprināts tests, pieejams bez receptes un var tikt izmantots HIV noteikšanai. Pēc testa ar pozitīvu rezultātu slimajam ir ieteicams veikt obstezhenniju specializētā centrā, lai apstiprinātu diagnozi.

FDA vēl nav apstiprinājusi citus mājās gatavota viskija testus, un to rezultāti var būt vēl neskaidrāki.

Neatkarīgi no tiem, kas izsaka testus par to precizitāti, tiek upurēti IV paaudzes IFA testiem, smaka tiek plaši izmantota iedzīvotāju papildu pārbaudēm.

Analīzes veidošana VIL-infektsії izpausmei ir iespējama jebkurā poliklīnikā, CRL vai specializētos SNID centros. Krievijas teritorijā smirdēšana tiek veikta absolūti konfidenciāli vai anonīmi. Ādas pacients var būt tiesīgs saņemt medicīnisku un psiholoģisku konsultāciju līdz analīzes datumam. Mazāk iespējams, ka jāmaksā par VIL pārbaudēm, izmantojot hipotēkas, un valsts pārvaldītās klīnikās un aptiekās smaka ir bez maksas.

Par veidiem, kā var inficēties ar VIL-іnfektsієyu un kā mīti zina par iespējamību inficēties, lasiet