IFA-диагностика: каква е същността на обозначаването на антитела, как да се извърши и ефективна ли е при някои заболявания? Актуални методи за диагностициране на VIL-инфекция Anti VIL 1 2 sho.

Патент на Vlasniki RU 2283497:

Винахид е пренесен в галерията по биотехнологии и медицина. ІMUNUFERMENTIA TEST SYSTEM FOR ETENTIFIFIKATSI SPEKTRUE OF ANTITIL TO VIRusa иmuru недостатъчен илюни (вил) иман товой товивател, Finger type Grup about that twist Antigen to Viruus IMUDEF_CITE LOOGE TYPE PRIP R24 Include (Включи VIRLUNIUT OF THE 11p BUINO 24) , p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env ВІL-2), антитела срещу ²L 1 p24 антиген и реагенти за откриване, в който случай антигените ²L и антителата ²L се сорбират в различни ямки от таблетки за ензимно-свързани имуносорбентен анализ, а за використична сорбция се предлагат 96-ямкови полистиролови плаки. Винахид осигурява насърчаване на чувствителност, прошка, включване на субективността на оценката на резултатите. 1 z.p. ф-ли, 10 табл., 1 ил.

Винахид е пренесен в галерията по биотехнологии и медицина. Vykoristannya: диференциране на проявата на всички класове специфични антитела срещу протеини срещу човешки имунодефицитен вирус 1 и 2, VIL 1 група Pro и антиген p24 VIL 1.

Значение: тестване на ензимната имуноанализна тестова система за идентифициране на спектъра на антитела 1 и 2, VIL 1 група Pro, откриване на антигена p24 VIL 1 и потвърждаване на положителни или обобщени резултати от скрининг за антитела срещу VIL 1 и 2, VIL 1 група

ОПИСАНИЕ НА ВИНАХОД

Лабораторната диагностика на IVL-инфекция се основава на три директиви: а) индикация на VIL и неговите компоненти; б) откриване на антитела срещу VIL; в) значителни промени в имунната система. Сред основни методиЛабораторната диагностика е най-разпространената серологична - откриване на антитела срещу антигени на вируса.

За откриване на антитела при VIL-инфекция основните методи са ензимно-свързан имуносорбентен анализ (IFA) и имуноблотинг (IX). IFA се основава на имобилизирането на вирусни антигени върху плочките, с които са свързани антителата на заболяването, а комплексът антиген-антитяло се използва за допълнително конюгиране на миши моноклонални антитела към човешки имуноглобулини G и M с пероксидаза. Методът за доставяне на специфични и чувствителни и позволява откриване на вирус-специфични антитела при 95% от пациентите. Освен това 5% от падането се пада на ранните стадии на инфекцията, ако има малко антитела в кръвта или в терминалната фаза на заболяването, ако тялото вече не е способно да синтезира антитела чрез рязко изчерпване на имунна система. Можете също хибноположителни резултати IFA е важен при пациенти с автоимунни заболявания и онкологични заболявания, както и с инфекции, причинени от вируса Eshptein-Barr. В този случай кръстосана реакция на антитела към ревматоиден фактор, вирус на Epstein-Barr или към антигенни детерминанти, подобни на протеини на комплекса на главата от клас 1 и 2 на хистозумност (HLA-4 и DQW3) и свързване с BIL антигени. Хибноположителни резултати често се наблюдават при бременни жени и хора в крехка възраст. Хемолиза, липемия, бактериално замърсяване на sirowort също могат да бъдат причина за неточни резултати.

Във връзка с cym са предложени редица методи, които са победили за преглед на специфичността на резултатите от откриването на антитела. Три от тези метода е най-вероятно да предизвикат реакцията на "имунно блотиране" в модификацията "Western Blot". Същността на метода се крие в офанзивния: на първия етап е необходимо да се работи под BILKIV VIL за молекулно тегло за допълнителна електрофореза в полиакриламиден гел. След това настъпва електрофоретичен трансфер от полиакриламидния гел към повърхността на нитроцелулозната мембрана. Трансферът на антигени по този начин се разкрива от мембраната с допълнителен индиректен анализ: мембраната се инкубира със следния материал; антитела, които се измъкват, се свързват с VIL антигените, прехвърлени към нитроцелулозната мембрана, и след това се инкубират с конюгата; когато се установи комплексът антиген-антитяло, конюгатът се добавя към новия, след въвеждането на конюгата и инкубиране със субстрата, присъствието на тези нитроцелулозни клетки се освобождава и комплексът антиген-антитяло-конюгат се разтваря. На креслото бяха представени положителните, слабо положителните и отрицателните резултати от имуноблота.

Антитела срещу напредващи протеини (p) и гликопротеини (gp) се откриват в HIV-позитивен osib, заразен с VIL-1 и VIL-2: таблица A.

В таблицата При представянето на критериите за оценка на резултатите от имуноблотинга, препоръчани от СЗО и Руски центърот превенция и борба срещу SNIDom.

Критериите на Vihodyachi на СЗО, положителни vvazhayut sirovatki, при който метод ІХ откриват антитела до два протеина на черупката VIL-1. Поради очевидността на реакцията само с един от протеините на черупката (gp160, gp120, gp41) в реакцията с други протеини или без нея, резултатът е съмнителен. Според Федералния научно-методически център на Министерството на здравеопазването на Руската федерация за превенция и борба срещу SNID, е възможно да се интерпретира сироватите като положителни и за наличието на антитела само един протеин от люспи.

Наличието на антитела към р24 антигена може да е показателно за сероконверсия по време на периода, но фрагментите на антитялото на самия протеин се считат за първи. Положителните реакции с gag и pol протеини без реакция с env протеини могат да отразяват етапа на ранна сероконверсия, както и да показват наличието на VIL-2 инфекция или неспецифична реакция.

Има редица недостатъци в диагностицирането на VIL като експертен метод за реакция към имуноблотинг:

1. Невъзможността за потвърждаване на откриването на р24 антигена VIL 1 в множество тестове, които едночасово откриват антигена и антителата до VIL, които могат да тестват за подцилозен (не-глуздим) скрининг в качеството на скрининг тестове за един -часово откриване на антигена и антитела до VIL 37 в Руската федерация). 2001 г.: "За обстежението на донори в станциите за кръвопреливане е необходимо да се разработят тестови системи, които откриват антиген и антитела срещу VIL за една нощ").

2. Идентифициране на антитела извън класа IgG. Невъзможно е да се потвърдят положителни резултати, които са били елиминирани при допълнителни тестове от 3-то и 4-то поколение (които показват IgG и IgM антитела).

3. Субективността на интерпретацията на резултата от теста, особено в случаите на "съмнителни" и "незначителни" резултати и етапи на кочанисероконверсия (гладките петна, които се появяват върху нитроцелулозните мембрани при тези падания, са размити, ледът може да се види с непрекъснато око и при оценка от различни хора те често се страхуват от объркване).

4. Невъзможността за автоматизирана изчислителна оценка на резултатите от анализа.

5. Най-ниска поради IFA чувствителност.

6. Недостатъчност на възстановяване (при задържане на сместа се развива нитроцелулозната мембрана и не може да бъде обективно потвърждение за проявата, или не проявата на ВИЛ при тежки депресии).

7. Трудности при инсценирането на реакцията и спасяването (конюнктите на нитроцелулозната мембрана са склонни и често се разрушават).

8. Голямо разнообразие от IB комплекти.

Vіdomy реагент, който може да се събере за едночасови антигени и антитела към един и същ патоген, включително BIL (DE 4236189 F1, 28.04.1994). Няма тестова система, която позволява диагностициране на VIL-инфекция на различни етапи.

Управителят на тази винарна трябва да закупи тестова система, с помощта на която е възможно да се потвърдят положителни или кумулативни резултати при скрининг тестове за антитела до VIL 1 и 2, VIL 1 групи Прота антиген p24 VIL 1 при интравенозно приложение антигенни тестове за еднократни антигени.

Предоставяне на Technichne Risnia за достигане на ИMUNUPHERMENT тестова система за Идентификация на спектъра Antitail to Viruus ІMUNUDEFІЦитурити илюни (вил) и и и ина товива, и потипо потипо по имуденная перувенная новена Р24 порусу имуденция на човешкия вирус-11pефикация на вируса на имунитета на човека и вируса на имунитета. -2 група O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), антитела срещу антиген VIL 1 p24 и реагенти за откриване, в случай на свръхекспозиция, VIL антигени и VIL антитела се адсорбират в различни ямки на плаки за ензимен имуноанализ.

В допълнение, 96-ямкови полистиролни асорти или неасорти плочи за ензимен имуноанализ се използват за сорбция на vicory.

TECHNIKIY RESULATE, SHO ACCEPT THE CIM VINARADE POLIGAYAє YOV MOGALOSTІ PIDDERDENNY ПОЛОЖИТЕЛНИ РЕЗУЛТАТИ ВЪРХУ ANTITY TO Vіl 1 І 2, Vіl 1 Grup Pro Antigen R24 Vіl 1, Vococїї Автоматизирана революция, Intripovstvíka Revolutiony, Intripovstvíka Víl 1 І 2 по-малко, съчетано с основни комплекти на ІБ варості.

Tse tehnіchne rіshennya vіdrіznyaєtsya vіd vіdomih:

1. Vykoristannya като таблетка с твърда фаза за имунологични реакции.

2. Едночасови проби като сорбент за антитела до p 24 VIL и набор от VIL антигени.

Винахид е илюстриран със стъпало дупе.

Кочанът на разширената тестова система "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR + AG r24 VIL 1" е:

Имуносорбент - рекомбинантни антигени, подобни на структурните протеини VIL-1: gp41 (env VIL-1 и VIL 1 група O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), VIL-2: gp36 (env) и моноклонални миши антитела към VIL 1(p24) антиген, сорбцията се разделя върху ленти от полистиролова дозираща плоча.

За да приготвите имуносорбент викорис:

1. HIV-1 gp41 е протеин, който се произвежда от щам E. Coli No. AHIV 103.

2. HIV-1 gp120 е протеин, който се произвежда от щам E. Coli No. AHIV 109.

3. HIV-1 p24 е протеин, който се произвежда от щам E. Coli No. AHIV 105.

4. HIV-1 p31 – протеин, който се произвежда от щам E. Coli No AHIV 108.

5. HIV-2 p36 е протеин, който се произвежда от E. Coli щам No AHIV 106.

Конюгат 1, лиофилизиран или рядко - миши моноклонални антитела към р24 VIL1 антиген, конюгиран с биотин.

1. Конюгат 2, лиофилизиран или рядък, - сума от рекомбинантни антигени, подобни на структурните протеини VIL-1: gp41 (env VIL-1 и VIL 1 група O), gp120 (env), p24 (gag), p31(po1) ; VIL-2: gp36 (env), конюгиран с биотин;

2. Конюгати 3, 4 – лиофилизирани или рядко – стрептавидин, белязани с хрон пероксидаза;

В хода на предходните изследвания беше преразгледан дизайнът на тест системата, модифицирана е технологията за приготвяне на нейните компоненти, оптимизирана и проведена имуноензимната реакция.

При задаване на IFA в тестовата система "DS - IFA - ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + Ag p24 VIL 1" добавете 25 µl конюгат-1 към ямките на плаката с адсорбирани антитела до p24 и в ямките с адсорбирани антигени - 25 µl конюгат-2. Реакционната схема е показана по-долу. Дайте на отвора на кожата, за да направите 25 µl от последната доза. При това в ямките с антигени цветът се променя от оранжев до еризипел, а в ямките с антитела - от зелен до сирий. Sumish се инкубира за 45 минути при 37°C на шейкър (или 1 година при 37°C в термостат). След това, без инжектиране, добавете 50 µl конюгат-3 в ямките на плаката за антиген p24 и добавете 50 µl конюгат-4 в ямките с обозначението на антитялото. След инкубиране в продължение на 20 минути при 37°C на шейкър (или 30 минути при 37°C в термостат), измийте плаката и разкрийте субстратната смес. Последният час на реакцията е 1 година 25 минути (или 1 година 50 минути). Р24 антигенът, присъстващ в целевия пациент, се свързва с моноклонални антитела до р24, а специфичните антитела образуват комплекс с рекомбинантни антигени на плочата. Имунният комплекс анти-р24-р24 с р24, който е разтворен, проявява анти-р24-биотинови конюгати, след това стрептавидин-пероксидаза и Ag-BIL-Ab-BIL имунни комплекси с Ag-биотин конюгат, след това стрептавидин-пероксидаза.

Схема за настройка на реакцията.

Формата на резултатите се извършва спектрофотометрично при две дължини вълна: 450/620-680 nm с настройка на приспособлението "на повторение". Допустимо появяване на резултати за един дълъг период на флуктуации от 450 nm.

Резултатите от анализа са верни, като средната стойност на оптичната междина (OD) в ямките с K-не повече от 0,2, в ямките с K+ - не по-ниска от 1,0. VP критичен. плати за формулата:

VP критичен. gp41 = равно стойност VP K-(gp41)+0,15

VP критичен. gp120 = равно стойност VP K-(gp120)+0,15

VP критичен. p24 = равно. стойност VP K-(R24) +0,15

VP критичен. p31 = равно. стойност VP K-(R31) +0,15

VP критичен. gp36 = por_vn. стойност VP K-(gp36)+0,15

VP критичен. Ag p24 = povn. стойност VP до-(Ag p24)+0,04

de 0,15 и 0,04 - коефициенти, установени по метода на статистическа обработка на базата на виробника. В процеса на разработване на тестовата система беше необходимо да се използва:

1. Кръвни проби от здрави донори (n=610).

2. Кръвни сиропи при заболявания с различни инфекции, несвързани с ХИВ (GRH, пневмония, тонзилит, херпетични и цитомегаловирусни инфекции, сифилис, хламидия, вирусен хепатит A, B и C (n=224)).

3. Пациенти с кръвни сиропи, страдащи от различни неинфекциозни заболявания – травми, заболявания на сърдечно-съдовата система, онкология (n=35).

4. Кръвни проби на жени (n=40).

5. Кръвни изследвания, серопозитивни в IFA и потвърден имуноблот (n=428).

6. Проби от женски сировок с положителен резултат, взети в ензимно-свързан имуносорбентен анализ за едночасово приложение на антитела VIL 1,2 и антиген р24, и незначителен резултат в имуноблот (n=123).

7. Вътрешният панел от серотипове, който не елиминира антитела до VIL 1,2, беше тестван за регистрация на ензимни имуноанализове и имуноблотове (n=21) от Министерството на здравеопазването на Руската федерация.

8. HIV 1 ANTIGEN STANDARD, BIO RAD, Франция, кат. № 72217, който е антиген, взет от вирусния лизат.

9. Вътрешен стандарт на бизнеса. Zrazok, scho за замяна p 24 антиген концентрация от 200 pg/ml, отстраняване на вирусен лизат и титруване съгласно стандарта "HIV 1 ANTIGEN STANDARD" фирма "BIO RAD", Франция, кат. № 72217.

10. Стандартният панел от sirovatok, счо за тестване на антитела към първия тип вирус на човешкия имунодефицит (VIL 1) - VZG 42-28-212-93-02P, "Медико-биологичен съюз", Новосибирск.

11. Стандартен панел от sirovatok, счо за тестване на антитела към вируса на имунодефицит на човек от друг тип (VIL 2) - VZG-42-28-216-02P, "Медико-биологичен съюз", Новосибирск.

12. Стандартен панел от суровини, за да не отмъщават антитела срещу вируса на имунодефицита на човек от първи тип и друг (VIL 1, 2) - VZG-42-28-214-94-02P, "Медико-биологичен Съюз", Новосибирск.

Оценката на чувствителността на тест-системата при откриване на р24 антигена се извършва в съответствие с HIV I ANTIGEN STANDARD, BIO RAD, вътрешен стандарт за приемане. В победния вътрешен стандарт бяха приготвени 4 последователни 2-кратни разреждания при 40 pg/ml до 5 pg/ml с нормална донорна плазма, за да не се забавят антителата срещу VIL 1, 2, като разредител. Най-малкото количество антиген, което се появява, е взето като критерий за чувствителност. Отстранете данните, представени в таблица 1.

За да оценим чувствителността на тестовата система при откриване на специфични антитела, използвахме стандартни панели от тестове за откриване на антитела срещу вируса на човешкия имунодефицит (VIL 1, 2) (OSO 42-28-212-93-02P стр.012, VZG 42-216 - 02P (VIL 2) стр.003).

Оптималните данни са представени в таблици 3, 4.

Диагностичната ефективност на тестовата система "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1" беше сравнена с тест системите "Jenscrin-VIL-Ag/Am" (Bio-Rad), "DIA-HIV 1 /2" (Diaprof-Med), "Vironostics VIL Uni-form II Ag/At" (Biomerioux), "Recombinant-VIL1.2 DSM" (MBS), "Amercard Anti-VIL-1.2 K" (Amercard) , "VIL-1, VIL-2-IFA-Авицена" (Авицена). За който тест на сироваток от вътрешния панел са протестирани във всички посочени тестове. Резултатите, показани в Таблица 5, показват високата диагностична ефективност на "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1".

Чувствителността на тест системата "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" също беше изследвана с кръвни серуми на пациенти, потвърдена чрез имуноблотинг като VIL положителна. Загал протестира 428 такива суровини. Анализирани са редица варианти на откриване на антитела срещу различни протеини на VIL и р24 антигена. Резултатите са представени в Таблица 6.

Таблица 6 Резултатите от откриването на антитела срещу различни протеини на VIL 1 и р24 антиген при тестване на VIL 1 положителни жени (n=428)
% проявление	Протеинов профил
	анти-gr41	анти-gr120	анти-r24	анти-r31	стр. 24
51,1%	+	+	+	+	-
35,3%	+	-	+	+	-
4%	+	-	+	-	-
3,3%	+	-	-	+	-
1,4%	+	-	-	+	+
1,2%	+	+	+	+	+
1,2%	+	+	-	+	+
0,9%	+	-	+	+	+
0,7%	+	-	+	-	+
0,5%	+	-	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	+
0,2%	+	+	-	-	-
% откриване на антитела към протеини okremyh или Ag p24	100%	53,9%	93,2%	94,4%	6,1%

При положителен тест за VIL 1, 3% от женските показват положителна реакция към gp36 (env VIL 2). MP/OPcrit имат tsikh zrazkah без превишаване на 2.0. Взехме данните за кръстосаната реактивност на бялата външна обвивка VIL 1 (gp41) и VIL 2 (gp36) от литературните данни.

Интерпретация на резултатите

Анализ на тестването на VIL на положителни сировки и проби от стандартни и вътрешни панели в "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM + AGr24 VIL 1", което ни позволява да разширим критериите за интерпретиране на резултатите от този тест. Препоръчителните критерии са посочени в Таблица 7.

Въз основа на тези критерии, всички случаи на IVL положителни siroworts (n=428) бяха класифицирани като положителни "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL1". В стандартния панел имаше 16 признака, че поразяват антитела срещу VIL 1, 14 бяха маркирани като положителни и 2 като незначителни. Установено е, че 8 признака от стандартния панел, които отмъщават за антитела срещу VIL 2, са положителни. От 10 точки във вътрешния панел, които отмъщават за антитела срещу VIL 1, 7 се считат за положителни и 3 не са значими.

Чувствителността на тест-системата "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" е проведена и върху кръвни серуми на пациенти, което може да доведе до положителен резултат при ензимни имуноанализ системи, които едновременно откриват антитела и р24 антиген, и незначимост в имуноблота. Захал протестира срещу 123 такива протеста. Данните са представени в таблици 8.

При тестване на сурови с незначителен резултат върху имуноблот (n=123) в "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" 72 проби (58,5%) показват положителен резултат. От тях 26 жени (21,1%) са положителни за p24, 20 (16,3%) са положителни за антитела, 16 (13%) са положителни за p24 с антитела до един протеин, 10 (8,1%) са с p24 с антитела до два и повече протеина. По този начин тестването само на едно антитяло (без откриването на р24) би позволило 30 положителни теста (24,4%) да бъдат положителни. Откриването на р24 антигена в теста дава възможност да се обозначат като положителни 42 допълнителни признака (34,1%).

За да се оцени специфичността на тестовата система vicoristan bula, беше използван стандартен панел от серотипове, така че антителата не се елиминират към VIL 1, 2 (n=20); проби от кръвен сироп от здрави донори (n=610), проби от кръвен сироп от пациенти с различни инфекциозни заболявания (n=224), които не са свързани с VIL; случаи на кръвни серумни заболявания с различни неинфекциозни заболявания - травми, заболявания на сърдечно-съдовата система, онкология (n=35); кръвни проби от жени (n=40). Уси протестира 929 души. Една проба от кръвни суровини на здрави донори показа чибноположителен резултат - открити са антитела до gp41 и p24. 7 кръвни сиропа на здрави донори и 2 кръвни сиропа на пациенти с инфекциозни заболявания, несвързани с VIL, показват положителен резултат за p24.

За оценка на специфичността на тестовата система беше тестван стандартен панел от отрицателни тестове (ОСО 42-28-214-94-02p, стр.009). Специфичността стана 100%.

По този начин проведените проучвания показват, че специфичността на тестовата система "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPECTRUM+AGr24 VIL 1" става 99% в случай на предварително диагностицирани кръвни суровини на нормални донори и заболявания. с различни инфекции и соматични заболявания.

Взетите данни показват високата диагностична ефективност на разширената тестова система "DS-IFA-ANTI-VIL 1,2-SPEKTR+AGr24 VIL 1". Тестовата система може да бъде використан за откриване на антитела до последния тип HIV протеини 1 и 2 тип и p24 BIL1 антиген чрез потвърждаване на положителен резултат от скрининга с тест системи, които откриват антитела, или тест системи, които откриват антитела и p24 антитела при веднъж. Тестовата система може да бъде використан като алтернативен тест на имуноблот за потвърждаване на положителни резултати, както и за повишаване на динамиката на антителата срещу VIL и р24 антиген чрез различни етапиинфекции.

ТЕСТ ПЕРЕВАГИ

1. Потвърждение на ензимен имуноанализ във формат на таблетка

2. Потвърждение на теста, който определя спектъра на антитела VIL 1, 2 и антиген p24 VIL 1

3. Откриване на антитела от всички Ig класове

4. Чувствителността за откриване на p24 е по-малка от 5 pg/ml

5. Разрешаване на скоростта на броя на незначимите резултати в сравнение с имуноблота

6. Час на анализ - 1 година 25 мин. (имуноблот - от 3 до 20 години)

7. Визуална оценка на въвеждането на всички компоненти и мерници.

1. Имуноензимна тестова система за идентифициране на спектъра на антителата срещу вируса на човешкия имунодефицит (HIV) от първи и други типове, първия тип група хора, които са gp41 (env VIL-1 и VIL-2 група O), gp120 (env), p24 (gag), p31 (pol), gp36 (env VIL-2), антитела срещу VIL 1 антиген p24 и откриващи реагенти, в случай на свръхекспозиция, VIL антигени и VIL антитела се адсорбират в различни ямки на плочи за ензимно-свързан имуносорбентен анализ.

2. Система за ензимен имуноанализ съгласно претенция 1, която се счита за сорбция на використични 96-ямкови полистирени в разнообразие или в различни плаки за ензимен имуноанализ.

Най-голямата експанзия на света днес в света на SNID е вирус от ретровирусен подрод, те също се наричат ​​лентивируси или по-често срещани. Всъщност в тялото на човек вонята започва да проявява активност след около три часа, около 10 години по-късно.

Идентифициран имунодефицит от първи и друг тип. Но можете смело да говорите за разширяването на вируса от първия тип. След като изпие кръвта и дойде на носилката, сякаш доказва имунитет, вирусът започва да се размножава бързо. Докато молекулата CD4, която се използва за разпознаване, идентифицира недостъпния враг, тя може да зарази целия организъм. За тези, които диагностицират по-рано, имат повече шансове болните да отделят време и да живеят по-дълго.

Ако човек може да се накара да повярва в SNID, той няма да сбърка. Най-честата основа за такава диагноза е откриването на антитела в кръвта срещу имунодефицит - протеини, които се обвиняват като реакция на наличието на вирус, а вонята започва да се утаява за период от 1,5 до 6 месеца по време на час на възможна инфекция. Преди края на този период е необходимо да се подложи на диагностика.

Броят на антителата се определя, використ анализ, който пропуска името на ензимния имуноанализ (IFA). На кой метод се вярва, виното е еднакво точно и силно чувствително, показателите за чи трябва да са над 99,5%. Фармацевтичният пазар насърчава редица диагностични тестови комплекти за IFA: Combibest VIL, Anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL, CombiBest anti-VIL 1 2, CombiBest anti-VIL 1 2 d 0172. Тестовите системи трябва да останат до третия. поколение. Липса на назначени реагенти: смрадите не винаги показват болест в ранните срокове. Човекът вече е вирусоносен, потенциално е опасен за партньорите, но все още няма антитела в кръвта.

Зададете в основното оборудване редица тестове за провеждане на 12 * 8 или 192 анти-VIL анализа. Не се препоръчва самокоригиране с тях. В описанието на препаратите е посочено, че това е признак на смърт - за откриване на броя на антителата срещу SNID и от двата вида. И също така присвоете антитела от всички класове към SNID. Ако няма антитела, тогава болестта не се диагностицира.

Една четвърт от поколението тестове „за да се движат“, крем антитела, тези антигени на SNID, вонята на сградата, за да се разкрие инфекцията по-рано, намаляват инфекцията от трето поколение. За изравняване: антиген ВІL є в кръвта, започвайки още от 5-та dobi, като първите антитела се появяват не по-рано, по-ниски след месец. CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (комплект 1) и CombiBest VIL 1, 2 AG / AT (комплект 2) трябва да бъдат тествани преди 4-то поколение. След ускоряване с набор от тези реагенти се откриват антитела към антиген тип 1, 2 - р24, достигащи до серума или човешката кръвна плазма. Bagato страна zastosovuyt IFA тест себе си 4 поколения, например, аз го наричам Антиген / Антитяло, съкратено - АГАТ.

Тестването се извършва анонимно.

ВІL-іnfektsіyu се класифицира като неконтролирано заболяване поради комбинацията от редица методи, специфична профилактика и недостатъчна ефективност на терапията. За овладяване на епидемиологичната ситуация с VIL-инфекция е важно да спечелите скринингово диагностично проследяване. Броят на средните методи за диагностициране на VIL-инфекция е зает от ензимно-свързан имуносорбентен анализ (IFA), който позволява откриване на серологични маркери на заболяване при пациенти със затлъстяване.

В Cyoma Rydomlennі представи резултата от visnant на Antitail to Vіl в Sirovattsі Krovі 40 823 OSIB, той беше консумиран от Pazіnti zhіnechih consorals, Polikіkіnіk, Lіkaren Mist, и Torzhni Centerіv, Scho Spetsіalіalyvе вирусен хепатитБ, С тези венерически заболявания). Проследяването е извършено през 2005 г. в лабораторията по имунология на Националния научноизследователски институт по акушерство и гинекология. ПРЕДИ. Ота RAMS инфекциозни заболявания.

За първично зашиване на серомите на кръвната сероза е тествана тестовата система "Comb_Best anti-VIL-1+2" (ZAT "Vektor-Best", Новосибирск). - 2 (имуноглобулини от класове A, G и M) . В този диагностичен набор рекомбинантните VIL протеини се вмъкват както за имобилизация в ямките на таблетките, така и в случай на конюгат с пероксидаза хрон. Оценката на резултатите от анализа на сировок е извършена съгласно препоръката на инструкциите за тестовата система: отрицателни (без антитела срещу VIL-1 и VIL-2) се считат за тестови проби, оптичната сила (OD) от които в IFA не надвишава стойността на OPcrit.

При скрининг в лабораторията за 40222 (98,5%) от 40823 скариди беше взет отрицателен резултат ELISA и 601 (1,5%) от последващата проба беше оценена като първоначално положителна. В резултат на следващия ден повторен анализ на кожата на 601 сироворти в дубликати (две гнезда на таблетката) 440 (73,2%) от пробите бяха оценени като положителни, а 161 (26,8%) - като отрицателни. По препоръка на Министерството на здравеопазването и социалното развитие 440 скрининг-позитивни жени бяха замразени и преместени за допълнителна помощ в консултативно-диагностичния кабинет на референтна лаборатория по медицина № 30 им. S.P. Боткина. Бяха проведени редица изследвания на различни тестови системи ELISA „EKOlab-Vironostics VIL 1.2 Ag/At” („EKOlab”, Электрогорск), „Genscreen Plus ХИВ Ag-Ab” (“BioRad”, САЩ), както и имуноблот комплекти. Резултатите от анализа на 440 майки при потвърждаващи тестове позволиха растежа на увяхване, 323 (73,4%) са положителни, а 102 (23,2%) са отрицателни. За 15 последващи проби (3,4%) бяха отстранени незначимите резултати от анализа.

Следното означава, че стойността на EP, взета в нашата лаборатория по време на първоначалното тестване на тестовете на тестовата система CombiBest anti-VIL-1+2, за 314 (97,2%) от 323 положителни жени стана от 0,900 до 1,780, и 9 (2,8%) srazkіv - 0,500–0,900. Стойностите на OD, взети от скрининга на 102 отрицателни сировока, за 52 пациенти (51%) са тествани в интервала от 0,195 до 0,400; за 40 (39,2%) проби - 0401-0800; 10 (9,8%) изчиствания – над 0,800.

По този начин, в резултат на извършената работа, беше показано, че първата септицемия на кръвни суровини за наличие на серологични маркери при VIL-инфекция с тестовете на тестовата система "Comb_Best anti-VIL-1 + 2" е високо ефективен. Положителните резултати от скрининга са потвърдени от допълнителни последващи изследвания в референтна лаборатория в 73% от случаите, а положителни резултати са регистрирани при по-малко от 0,25% от 40 823 изследвани пациенти.

Описание

Подготовка

Индикация

Интерпретация на резултатите

Описание

Метод на назначаване Ензимен имуноанализ (IFA).

Последващ материалКръвен серум

Наличен път към дома

Комбинирано откриване на антитела срещу VIL тип 1 и 2 и антиген p24 VIL, тест.

Уважение. При положителни и кумулативни реакции сроковете, които показват резултата, могат да бъдат увеличени до 10 работни дни. BIL (Human Immunodeficiency Virus), който води до SNID (Buffaled Immunodeficiency Syndrome) – принадлежи към семейството на ретровирусите. Предава се от човек на човек с непосредствена мътност на главата и спринцовки за интравенозно приложение на лекарства или терапевтични процедури, по време на сексуални контакти, както хетеросексуални, така и хомосексуални. Предаването на вируса може да настъпи при преливане на заразена кръв и продукти, дарение на органи от родната земя, при лекари - при нараняване от заразени игли и инструменти. Инфекцията с VL може да се предаде по път от заразена майка към дете (вертикален път), въпреки че съвременните методи за превенция от хронична антиретровирусна терапия, с всички препоръки, могат да намалят този риск до минимум.

Процесът на взаимодействие между вируса и клитина включва няколко етапа: свързване между вируса и клитина, развитие на неговата туника, проникване в цитоплазмата, синтез на ДНК от вирусна РНК, въвеждане на вирусна ДНК в генома на гостоприемника. Ако е така, започва латентният стадий на инфекция. В такова състояние ДНК, произвеждаща вирус, може да издържи един час, без да проявява активност и да не плюе върху живота на лорд. Въпреки че няма експресия на вирусни протеини, няма имунен отговор към вируса. Антителата срещу VIL, които характеризират имунната система на организма, се появяват след активирането на вирусната ДНК и кочана на активното възпроизвеждане на вируса. Тривалност на латентния период да падне поради ниски фактори, включително индивидуални генетични характеристики на организма.

Антителата срещу VIL могат да бъдат обвинявани, като се започне от друг ден след заразяването; їх vmіst zbіlshuєtsya чрез разтягане 2-4 дни и zberіgaєtsya чрез разтягане богати rokіv. При 90-95% от инфекциите миризмите се появяват през първите три месеца след заразяването, в 5-9% - в период от 3 до 6 месеца, в 0,5-1% - в повече живот.

В първия стадий на инфекция, дори преди появата на антитела срещу вируса (след това преди сероконверсията), в плазмените проби от серозата може да се установи наличието на антигени на VIL, zocrema iogo capsid protein p24. По-късно, след сероконверсия, VIN става неоткриваем.

Комбинации от тест системи от 4-то поколение, до които може да се използва HIV Ag/Ab Combo тест (Architect, Abbott), откриват както антитела срещу VIL 1 и 2 тип, така и P24 VIL антиген, който позволява ранно откриване на инфекция. Преди специфичните характеристики на скрининг теста, който се провежда в лабораторията INVITRO, за откриване на VIL-инфекция varto, висока специфичност на успех (> 99,5%); 100% чувствителност към анализа към антитела, характерни за периода на сероконверсия, и чувствителността към теста към p24 антигена е близо до 18 pg/ml.

Процедурата за провеждане на лабораторно изследване за регулиране на VIL suvoro със заповеди на Министерството на здравеопазването на Руската федерация и включва етапа на скрининг (потвърждаване) на изследване на наличието на антитела срещу VIL чрез имуноензимни (IFA) методи, които са разрешени да бъдат тестван, а етапът на проверка (аверификация) повече. Трябва да се отбележи, че най-кратките скринингови IFA-системи не гарантират 100% специфичност, така че има възможност за неспецифични, хибно-положителни резултати, свързани с характеристиките на кръвния серум на пациента. Следователно положителният резултат от скрининга ELISA може да не бъде потвърден от потвърждаващи тестове, след което на пациента се показва отрицателен незначителен резултат. Ако резултатът от проследяването не е показан, тестът трябва да се повтори динамично след 2-3 дни.

Лабораторната диагностика на ХИВ-инфекция при деца, хора с ХИВ-инфектирани майки може да има своите особености. Майчините антитела до VIL (клас IgG) могат да циркулират в кръвта до 18-месечна възраст. Наличието на антитела срещу VIL при новородени не означава, че вирусът не е проникнал през плацентарната бариера. Децата на инфектирани с VIL майки се подлагат на лабораторно-диагностична обструкция в продължение на 36 месеца след раждането.

Подготовка

Не се изисква специално обучение. Препоръчва се кръвна проба да се вземе не по-рано от 4 години след останалата част от деня. Можете да се запознаете с най-важните препоръки за подготовка до крайния срок. Проследяване на откриването на антиген и антитела срещу VIL не по-рано, поне два пъти след възможна инфекция, с повторения след три и шест пъти отрицателен резултат. Регистрацията на заявления за извършване на престой в ТОВ "ИНВИТРО" се извършва зад паспорт или документ, който може да бъде заменен (миграционна карта, регистрация по време на местоживеене, отдаване на военна служба, финализиране от паспортната служба при издаване паспорт, регистратор). Представяне на документа obov'yazkovo е виновен за пакости и информация за времето и след регистрацията на Руската федерация и снимка. За валидността на паспорта (документа, който го замества), пациентът има право да подаде анонимно заявление за доставка на биоматериал. В случай на анонимно obstezhennі, заявление, което е отхвърлено като клиент, на биоматериала се присвоява номер, който е само за пациента, този за медицинския персонал, който изготвя заявлението. ! Резултатите от разследването, които се пазят анонимно, не могат да бъдат представени за хоспитализация, професионалните прегледи не изискват регистрация в ORUIB.

Покажи се преди изповед

• Zbіlshennya лимфни възлинад два региона.
• Левкопения с лимфопения.
• Нощно пиене.
• Рязко отслабнал по неразумна причина.
• Диария повече от три дни, без ясна причина.
• Треска с неизвестна причина.
• Планиране на вагината
• Предоперативна подготовка, хоспитализация.
• Индикация за агресивни инфекции или по-късно: туберкулоза, манифестна токсоплазмоза, инфекция с херпес вирус, която често се повтаря, кандидоза на вътрешните органи, повтаряща се невралгия на херпес зостер, микоплазма viclicana, пневмоцистис или пневмонела.
• Сарком на Капоши при млад мъж.
• Vipadkovi stateevі контакти.

Интерпретация на резултатите

Интерпретацията на резултатите е да предостави информация за лекаря, а не диагноза. Информацията от този раздел не може да бъде създадена за самодиагностика и самоидентификация. Точна диагноза трябва да бъде поставена от лекар, който използва в резултат на това obstezhennia, и ще ми трябва информация от други вени: анамнеза, резултати от други obstezheniya.

Индивиди загинаха в независимата лаборатория INVITRO: тест yakіsny. Формата на представяне на резултатите: за наличие на антитела срещу VIL 1 и 2 и антигена р24 се разглежда като "отрицателна". В случай на откриване на антитела срещу VIL или към антигена в скрининговия ензимен имуноанализ, пробата от sirowort се коригира за по-нататъшно потвърждение чрез имуноблот метод до Московския център на SNID, който проверява положителни и незначителни резултати.

Положителен резултат:

1. ХИВ инфекция;
2. хибноположителен резултат, който води до повтарящи се или допълнителни резултати *);
3. проучването не е информативно при деца на възраст под 18 месеца, деца на майки, заразени с VIL.

*Специфичността на системата за скрининг тест Antityla към VIL 1 и 2 и антигена VIL 1 и 2 (HIV Ag/Ab Combo, Abbott), според оценките, представени от реагентите, става близо до 99,6% и в глобалната популация и в групата пациенти с потенциални интерференции (инфекции HBV, HCV, рубеола, HAV, EBV, HNLV-I, HTLV-II, E.coli, Chl.trach. и ин., автоимунни патологии (включително ревматоиден артрит, наличие на антинуклеарни антитела), промени на IgG, IgM, моноклонална гамапатия, хемодиализа, множество кръвопреливания).

Навременното диагностициране на VIL-инфекции става много важен подход, за да може по-рано кочанът на екзалтация да бъде богат на защо да се увеличи по-нататъшното развитие на болестта и да продължи живота на болния. През останалите години се наблюдава прогресия на вагомия в галузианската проява на ужасно заболяване: старите тестови системи се заменят с перфектни, методите за кондициониране стават по-достъпни и тяхната точност се подобрява значително.

В тази статия е известно за съвременните методи за диагностициране на VIL-инфекция, благородството, което е полезно за навременното ликуване на този проблем и подобряването на нормалния живот на болния.

VIL диагностични методи

В Русия за диагностициране на VIL-инфекция се провежда стандартна процедура, която включва две равни:

• IFA тестова система (скрининг анализ);
• имуноблот (IB).

Също така за диагностика могат да се използват други методи:

• експресен тест.

IFA тестови системи

На първия етап от диагностиката за откриване на VIL-инфекция се установява скрининг тест (IFA), който е в основата на създаването на VIL протеини в лаборатории, който улавя специфични антитела, които вибрират в тялото в случай на инфекция . След всяко взаимодействие с реагентите (ензимите) на тестовата система, замърсяването на индикатора се променя. Предвид промяната на цвета, те се обработват на специално оборудване, така че да се определи резултатът от избрания анализ.

По този начин IFA-тестовете могат да покажат резултата още няколко дни след въвеждането на VIL-инфекция. Този анализ не показва наличието на вирус, но показва производството на антитела към нещо ново. В някои случаи в човешките организми антитела срещу VIL се генерират след 2 дни в областта на инфекцията, но при повечето хора зловонието се генерира в по-ниски срокове, след 3-6 дни.

Іsnuє chotiri от поколение IFA-тестове от различна чувствителност. В останалата част на света по-често се разработват тестови системи от III и IV поколения, тъй като са създадени на базата на синтетични пептиди или рекомбинантни протеини и могат да имат по-голяма специфичност и точност. Те могат да бъдат победители за диагностициране на VIL-инфекция, наблюдение на разпространението на VIL и безопасността на пациента по време на повторната проверка на донорската кръв. Точността на IFA-тест системите III и IV поколения е 93-99% (по-чувствителни тестове, които се произвеждат в земите на Западна Европа - 99%).

За теста IFA се вземат 5 ml кръв от вената на пациента. Между остатъка от приема и анализа може да минат поне 8 години (като правило ще бъдете победители в бъдеще). Такъв тест се препоръчва да се направи не по-рано от 3 дни след предаването на инфекцията (например след незащитен статут с нов законен партньор).

Резултатите от IFA теста се вземат за 2-10 дни:

• отрицателен резултат: показва наличието на инфекция VIL, която не води до fahivtsya;
• хибнегативен резултат: можете да се пазите ранни сроковеинфекция (до 3 дни), в случай на късни стадии на SNID с изразена асфиксия и при неправилна подготовка на кръвта;
• хибноположителен резултат: може да бъде опасно при някои заболявания и при неправилна подготовка на кръвта;
• положителен резултат: показател за инфекция VIL-инфекция, с цел извършване на ІБ и насочване на пациента към специалист към центъра на СНИД.

Защо IFA тестът може да даде положителни резултати?

Неправилните резултати от IFA теста за VIL могат да бъдат причинени от неправилно вземане на кръв или при пациенти със следните състояния и заболявания:

• множествена миелома;
• инфекциозно заболяване, провокирано от вируса на Epstein Barr;
• лагер след;
• автоимунно заболяване;
• на фона на вагинизма;
• лагер след ваксинация.

Поради причините, описани по-горе, кръвта може да има неспецифични кръстосано реактивни антитела, чието генериране не е провокирано от VIL-инфекция.

През останалите години честотата на чибнопозитивните резултати междувременно намалява поради пренаселеността на тест системите от III и IV поколения, в резултат на по-чувствителни пептидни и рекомбинантни протеини (вонята се синтезират чрез допълнително генно инженерство инвитро). След началото на такива ELISA тестове честотата на фалшивите резултати значително намалява и се доближава до 0,02-0,5%.

Проявата на чибноположителен резултат не означава, че лицето е заразено с VIL. В такива случаи СЗО препоръчва да се направи още един ELISA тест (4-то поколение obov'yazkovo).

Кръвта на пациента се изпраща в референтната или арбитражна лаборатория със знак „повторение“ и се продължава на тестовата система IFA от IV поколение. Ако резултатът от нов анализ е отрицателен, тогава първият резултат се признава като помилване (чибноположителен) и IB не се извършва. С положителен брой sumnіvnym резултата от първия час от друг тест, на болното лице се възлага да извърши IX за 4-6 дни, за да потвърди необходимостта от VIL-іnfikuvannya.

Имунно петно

Остатъчната диагноза на HIL инфекция може да бъде установена само след положителен имунен блот резултат (IX). За йога се използва нитроцелулозна смес, като се прилагат вирусните протеини.

Вземането на кръв за IB се взема от вена. По-нататък се дава специална обработка и протеини, които се намират в її syrovatsі, те се нанасят върху специален гел за техния заряд и молекулна маса (манипулацията се извършва на специално оборудване под приток на електрическо поле). Върху гела от кръвния серум се нанася нитроцелулозен гел и се извършва блотиране („блотиране“) в специална камера. Самодоволството се обработва и дори в материалите има антитела срещу VIL, след което смрадите се свързват с антигенни самодоволства на IB и се появяват на видими линии.

ІБ се счита за положителен начин:

• според американските критерии на CDC - на мъжка, две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
• по американски критерии на FDA - при мъже - две линии p24, p31 и линия gp41 или gp120 / gp160.

При 99,9% от пациентите положителният резултат на IX показва VIL-инфекция.

За видимостта на линиите - ІБ отрицателна.

Когато се открият линии z gp160, gp120 и gp41, IB е съмнително. Този резултат може да се види с:

• онкологично заболяване;
• вагиналност;
• частични кръвопреливания.

В същото време се препоръчва последващи действия с допълнително набиране на други компании. Въпреки това, след допълнителен IB, резултатът става съмнителен, необходимо е да се предпазите от разтягане на кръвта (IB се извършва след 3 месеца на кожата).

Полимеразна реакция на Lanzug

PCR тестът може да покаже РНК на вируса. Чувствителност на Його да достигне слепоочието и да ви позволи да покажете VIL-инфекция вече 10 дни след заразяването. В някои случаи PLR може да даде чибноположителни резултати, така че високата чувствителност може да реагира на антитела срещу други инфекции.

Даден е методът на диагностика, който е скъп, ще изисква специално оборудване и висока квалификация на специалисти. Чи причини не е позволено да се извършват с масово тестване на населението.

PLR zastosovuetsya в такива ситуации:

• за проява на VIL при новородени, тъй като те са родени от VIL-инфектирани майки;
• за проявата на ВИЛ в "периода на века" или за сумнивния IB;
• контрол на концентрацията на VIL в кръвта;
• за проследяване на донорска кръв

Едва след PLR теста, диагнозата на VIL не се прави, а се извършва като допълнителен диагностичен метод за отстраняване на трудни ситуации.

Експресен метод

Една от иновациите в диагностиката на VIL бяха експресните тестове, резултатите от които могат да бъдат оценени вече за 10-15 минути. Най-ефективните и точни резултати идват от допълнителни имунохроматографски тестове, базирани на принципите на капилярния поток. Вонята е специална сбруя, кръв се нанася върху яка, или друг дослиджуван родин (слина, наклонена черта). За наличието на антитела срещу VIL, след 10-15 quills на теста, се открива цветна контролна женска - положителен резултат. Ако резултатът е отрицателен, контролната съпруга вече не присъства.

Както и след IFA тестовете, резултатите от експресните тестове се потвърждават от IB анализа. Едва тогава може да се постави диагноза VIL-инфекция.

Използвайте експресен комплект за домашно тестване. Тест, одобрен от OraSure Technologies1 (САЩ) от FDA, наличен без рецепта и може да се използва за откриване на ХИВ. След теста, с положителен резултат, се препоръчва болният да се подложи на лечение в специализиран център за потвърждаване на диагнозата.

Други тестове за домашно уиски все още не са одобрени от FDA и техните резултати може да са още по-двусмислени.

Независимо от това, че експресните тестове за тяхната точност са принесени в жертва на IFA тестове от IV поколение, вонята се използва широко за допълнителни тестове на населението.

Изграждането на анализи за проява на VIL-инфекции е възможно във всяка поликлиника, CRL или специализирани SNID-центрове. На територията на Русия смрадите се извършват абсолютно поверително или анонимно. Пациентът с кожата може да отговаря на условията за медицинска и психологическа консултация до датата на анализа. Плащането за тестове на VIL е по-малко вероятно да се случи при търговски ипотеки, а в държавни клиники и аптеки, вонята е безплатна.

За тези начини, по които можете да се заразите с VIL-іnfektsієyu и като митове знаят за възможността да се заразите, прочетете на